PCR Plakalarıyla Çalışırken Hataları Önlemek İçin 5 Basit İpucu

Polimeraz zincir reaksiyonları (PCR), yaşam bilimleri laboratuvarlarında yaygın olarak kullanılan yöntemlerden biridir.

PCR plakaları, numunelerin veya toplanan sonuçların mükemmel şekilde işlenmesi ve analizi için birinci sınıf plastiklerden üretilmektedir.

Hassas ısı transferi sağlamak için ince ve homojen duvarlara sahiptirler.

Gerçek zamanlı uygulamalara hazırlık amacıyla DNA veya RNA'nın çok küçük kesitleri izole edilerek PCR plakalarına depolanır.

PCR plakaları ısıyla kapatmada oldukça etkilidir ve aynı zamanda ısının akışını da sınırlar.

Ancak PCR plakaları ne kadar etkili ve güvenilir olsalar da, örneklerin işlenmesi sırasında hata ve yanlışlıklar kolaylıkla ortaya çıkabilmektedir.

Bu nedenle, iyi ve kaliteli bir ürün edinmek istiyorsanızPCR plakaları.Güvenilir bir PCR plaka üreticisiyle iletişime geçmek idealdir. Bu sayede en iyi anlaşmayı elde ettiğinizden emin olursunuz.

Reaktiflerin veya numunelerin kirlenmesini önlemek ve sonuçlara yanlışlık girmesini önlemek için uyulması gereken bazı önlemler şunlardır.

Çevreyi Sterilize Etmek
İçerisinde bulunan kirliliklerden dolayı yanlış pozitif veya negatif sonuçlar ortaya çıkar ve bu da sonuçlardan şüphe duymanıza sebep olur.

Reaksiyonun etkinliğini ve verimliliğini azaltan, ilgisiz DNA veya kimyasal katkı maddeleri gibi çeşitli formlarda safsızlıklar ve kirleticiler ortaya çıkar.

PCR plağının kontaminasyon oranını büyük ölçüde azaltmanın birçok yolu vardır.

Steril filtreli uçlar kullanmak, pipetler aracılığıyla numunelerinize yabancı maddelerin sızmasını önlemenin bir diğer faydalı yoludur.

Pipetler ve raflardan oluşan tamamen temiz bir ekipman setini yalnızca PCR kullanımına ayırın. Bu, laboratuvarda önemsiz miktarda kirlilik veya kirletici madde transferini garanti edecektir.

Kirleticileri silmek için pipetlerde, raflarda ve tezgahlarda ağartıcı ve etanol kullanın.

Partikül kontaminasyonunu en aza indirmek için tüm PCR reaksiyonlarınız için ayrılmış bir alan ayırın.

Her adımda temiz eldiven kullanın ve eldivenlerinizi sık sık değiştirin.

PCR plakaları
Şablonun Konsantrasyon ve Saflığını Denetleyin.
PCR ile numuneleri analiz ederken kullanılan tezgahın ve ekipmanın temizliği sağlanmalıdır. Analiz ve işleme öncesinde numunelerin saflık derecesinin doğrulanması esastır.

Analizörler genellikle DNA örneklerinin konsantrasyonunu ve saflık seviyesini dikkate alırlar.

260nm/280nm için absorbans oranının 1.8'den az olmamasına çalışılmalıdır. 230nm ile 320nm arasındaki dalga boyları ise safsızlıkların belirlenmesinde kullanılır.

Örneğin, kaotropik tuzlar ve diğer organik bileşikler 230 nm absorbans hızında tespit edilir. DNA örneklerindeki bulanıklık da 320 nm absorbans hızında tespit edilir ve doğrulanır.

PCR Plakalarını ürünle aşırı yüklemekten kaçının
Birden fazla ürünün aynı anda çalıştırılması istendiği halde, PCR plakalarının çapraz kontaminasyonu söz konusudur.

PCR plakalarının farklı ürünlerle aşırı yüklenmesi israfa neden olur ve numunelerin tespitini son derece zorlaştırır.

Aliquot PCR Reaktiflerinin Kayıtlarını Tutun
Sürekli dondurma/çözme döngüleri ve sık alikot kullanımı, PCR reaktiflerine, enzimlere ve DNTP'lere yeniden kristalleşme yoluyla zarar verebilir.

Analiz edilecek numuneleri hazırlarken kullanılan alikot oranını her zaman izlemeye çalışın.

Tercih edilen LIMS, dondurulan veya çözülen reaktif ve numunelerin envanterini ve miktarını kontrol etmek için daha uygundur.

En İyi Tavlama Sıcaklığını Seçin.
Yanlış tavlama sıcaklığının seçilmesi ve kullanılması da PCR sonuçlarının hatalı olmasına yol açan bir diğer yöntemdir.

Bazen reaksiyon planlandığı gibi gitmez. Başarılı bir reaksiyonu kolaylaştırmak için tavlama sıcaklığının düşürülmesi istenir.

Ancak sıcaklığın düşürülmesi yanlış pozitiflerin ve primer dimerlerin ortaya çıkma olasılığını artırır.

PCR plakaları kullanıldığında erime eğrisinin analizinin doğrulanması önemlidir, çünkü doğru tavlama sıcaklığının seçilmesinde iyi bir göstergedir.

Primer tasarım yazılımı, PCR plakalarındaki hatayı doğrudan azaltarak doğru tavlama sıcaklığının sağlanmasında ve tasarımında yardımcı olur.

Yüksek Kaliteli PCR Plakasına mı İhtiyacınız Var?
Güvenilir bir üreticinin nerede bulunacağını düşünüyorsanızPCR plakalarıArtık aramanıza gerek yok çünkü doğru yerdesiniz.

LütfenBizimle iletişime geçmek için buraya tıklayınBütçenizi zorlamayacak fiyatlarla yüksek kaliteli ürünler ve hizmetler için.


Gönderi zamanı: 30-Eki-2021