ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส (PCR) เป็นหนึ่งในวิธีการที่รู้จักกันอย่างแพร่หลายที่ใช้ในห้องปฏิบัติการวิทยาศาสตร์ชีวภาพ
แผ่น PCR ผลิตจากพลาสติกชั้นหนึ่งเพื่อการประมวลผลและการวิเคราะห์ตัวอย่างหรือผลลัพธ์ที่เก็บรวบรวมได้อย่างยอดเยี่ยม
มีผนังบางและเป็นเนื้อเดียวกันเพื่อให้ถ่ายเทความร้อนได้อย่างแม่นยำ
ในการเตรียมการสำหรับการใช้งานแบบเรียลไทม์ ส่วนเล็กของ DNA หรือ RNA จะถูกแยกและเก็บไว้ในแผ่น PCR
แผ่น PCR มีประสิทธิภาพสูงในการปิดผนึกด้วยความร้อนและยังจำกัดการไหลของความร้อนอีกด้วย
อย่างไรก็ตาม แม้ว่าแผ่น PCR จะมีประสิทธิภาพและเชื่อถือได้ แต่ข้อผิดพลาดและความไม่ถูกต้องก็อาจเกิดขึ้นได้ง่ายในระหว่างการประมวลผลตัวอย่าง
ดังนั้นหากท่านสนใจอยากได้ของดีและมีคุณภาพแผ่น PCRการติดต่อผู้ผลิตเพลต PCR ที่เชื่อถือได้ถือเป็นเรื่องที่ดี วิธีนี้ช่วยให้คุณมั่นใจได้ว่าจะได้รับข้อเสนอที่ดีที่สุด
ต่อไปนี้คือข้อควรระวังบางประการที่ควรปฏิบัติตามเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนของสารเคมีหรือตัวอย่าง และป้องกันไม่ให้ความไม่แม่นยำปรากฏในผลลัพธ์
การฆ่าเชื้อรอบข้าง
ผลบวกและผลลบที่ไม่ถูกต้องเกิดขึ้นเนื่องจากมีสิ่งเจือปน ซึ่งทำให้คุณต้องสงสัยในผลลัพธ์
สิ่งเจือปนและสารปนเปื้อนเกิดขึ้นในหลายรูปแบบ เช่น DNA ที่ไม่เกี่ยวข้องหรือสารเคมีเจือปน ซึ่งในที่สุดจะทำให้ประสิทธิภาพและประสิทธิผลของปฏิกิริยาลดลง
มีหลายวิธีที่จะลดอัตราการปนเปื้อนของแผ่น PCR ได้อย่างมาก
การใช้หัวกรองที่ผ่านการฆ่าเชื้อเป็นอีกวิธีหนึ่งที่มีประโยชน์ในการป้องกันไม่ให้สิ่งสกปรกแทรกซึมเข้าไปในตัวอย่างของคุณผ่านปิเปต
จัดเตรียมอุปกรณ์ที่สะอาดหมดจด ประกอบด้วยปิเปตและชั้นวางสำหรับใช้ PCR โดยเฉพาะ วิธีนี้จะช่วยให้มั่นใจได้ว่าสิ่งสกปรกหรือสารปนเปื้อนจะถ่ายเทไปทั่วห้องปฏิบัติการได้น้อยมาก
ใช้สารฟอกขาวและเอธานอลบนปิเปต ชั้นวางและม้านั่งเพื่อเช็ดสิ่งปนเปื้อนออก
จัดสรรพื้นที่สำรองไว้สำหรับปฏิกิริยา PCR ทั้งหมดของคุณเพื่อลดการปนเปื้อนของอนุภาคให้เหลือน้อยที่สุด
ควรใช้ถุงมือที่สะอาดในทุกขั้นตอนและเปลี่ยนบ่อยๆ
แผ่น PCR
ตรวจสอบความเข้มข้นและความบริสุทธิ์ของเทมเพลต
ควรรักษาความสะอาดของโต๊ะและอุปกรณ์ที่ใช้ในการวิเคราะห์ตัวอย่างด้วย PCR การตรวจสอบระดับความบริสุทธิ์ของตัวอย่างก่อนการวิเคราะห์และประมวลผลถือเป็นสิ่งสำคัญ
โดยทั่วไปเครื่องวิเคราะห์จะพิจารณาถึงระดับความเข้มข้นและความบริสุทธิ์ของตัวอย่าง DNA
พยายามให้ค่าการดูดกลืนแสงสำหรับ 260nm/280nm ไม่น้อยกว่า 1.8 ในขณะที่ความยาวคลื่นที่ตามมาระหว่าง 230nm และ 320nm ใช้เพื่อระบุสิ่งเจือปน
ในบางกรณี เกลือเคโอโทรปิกและสารประกอบอินทรีย์อื่นๆ จะถูกตรวจพบที่อัตราการดูดกลืนแสง 230 นาโนเมตร ในขณะที่ความขุ่นในตัวอย่าง DNA จะถูกตรวจพบและตรวจยืนยันที่อัตราการดูดกลืนแสง 320 นาโนเมตรเช่นกัน
หลีกเลี่ยงการโหลดแผ่น PCR ด้วยผลิตภัณฑ์มากเกินไป
แม้ว่าจะต้องการใช้งานผลิตภัณฑ์หลายรายการพร้อมๆ กัน แต่ก็ส่งผลให้เกิดการปนเปื้อนข้ามกันในแผ่น PCR
การโหลดผลิตภัณฑ์ต่างชนิดลงในเพลต PCR มากเกินไปจะทำให้สิ้นเปลืองและทำให้ยากต่อการระบุตัวอย่างเป็นอย่างยิ่ง
เก็บบันทึกของรีเอเจนต์ Aliquot PCR
การแช่แข็ง/ละลายอย่างต่อเนื่องและการใช้ส่วนย่อยบ่อยครั้งอาจทำให้รีเอเจนต์ PCR เอนไซม์ และ DNTP เสียหายผ่านการตกผลึกใหม่
พยายามตรวจสอบอัตราการแบ่งส่วนที่ใช้ในการเตรียมตัวอย่างที่จะวิเคราะห์อยู่เสมอ
LIMS ที่เหมาะสมกว่าสำหรับการควบคุมสินค้าคงคลังและปริมาณของสารเคมีและตัวอย่างที่ถูกแช่แข็งหรือละลาย
เลือกอุณหภูมิการอบที่ดีที่สุด
การเลือกและใช้อุณหภูมิการอบที่ไม่ถูกต้องเป็นอีกวิธีหนึ่งที่ทำให้ผล PCR มีข้อผิดพลาด
บางครั้งปฏิกิริยาไม่เป็นไปตามที่วางแผนไว้ จึงต้องลดอุณหภูมิการอบเพื่อให้เกิดปฏิกิริยาสำเร็จ
อย่างไรก็ตาม การลดอุณหภูมิลงจะเพิ่มโอกาสที่จะเกิดผลบวกปลอมและไพรเมอร์ไดเมอร์ปรากฏขึ้น
การยืนยันการวิเคราะห์เส้นโค้งการหลอมเหลวถือเป็นสิ่งสำคัญเมื่อใช้แผ่น PCR เนื่องจากเป็นตัวบ่งชี้ที่ดีในการเลือกอุณหภูมิการอบอ่อนที่ถูกต้อง
ซอฟต์แวร์ออกแบบไพรเมอร์ช่วยในการออกแบบ การจัดเตรียมอุณหภูมิการอบที่เหมาะสม พร้อมลดข้อผิดพลาดในแผ่น PCR โดยตรง
ต้องการแผ่น PCR คุณภาพสูงหรือไม่?
ในกรณีที่คุณกำลังพิจารณาว่าจะหาผู้ผลิตที่เชื่อถือได้จากที่ไหนแผ่น PCRไม่ต้องค้นหาอีกต่อไปเพราะคุณมาถูกที่แล้ว
กรุณาคลิกที่นี่เพื่อติดต่อเราเพื่อผลิตภัณฑ์และบริการคุณภาพสูงในราคาที่ไม่แพงเกินไป
เวลาโพสต์: 30 ต.ค. 2564