Reacțiile în lanț ale polimerazei (PCR) sunt una dintre metodele pe scară largă utilizate în laboratoarele de științe ale vieții.
Plăcile PCR sunt produse din materiale plastice de primă clasă pentru o procesare și analiză excelentă a probelor sau rezultatelor colectate.
Au pereți subțiri și omogeni pentru a asigura un transfer termic precis.
În pregătirea aplicațiilor în timp real, secțiuni minuscule de ADN sau ARN sunt izolate și stocate pe plăci PCR.
Plăcile PCR sunt foarte eficiente în sigilarea termică și restricționează și fluxul de căldură.
Cu toate acestea, oricât de eficiente și fiabile sunt plăcile PCR, erorile și inexactitățile apar ușor în timpul procesării probelor.
Prin urmare, dacă sunteți interesat să obțineți un produs de bună calitate șiPlăci PCR.Ideal este să contactați un producător de plăci PCR de încredere. Astfel, aveți garanția că veți obține cea mai bună ofertă.
Iată câteva precauții de urmat pentru a evita contaminarea reactivilor sau a probelor și pentru a preveni apariția unor inexactități în rezultate.
Sterilizarea împrejurimilor
Rezultatele pozitive sau negative incorecte apar din cauza prezenței impurităților, ceea ce te face să te îndoiești de rezultate.
Impuritățile și contaminanții apar sub diverse forme, cum ar fi ADN-ul neînrudit sau aditivii chimici, care în cele din urmă scad eficiența și eficacitatea reacției.
Există numeroase modalități de a reduce considerabil rata de contaminare a plăcii PCR.
Utilizarea vârfurilor de filtru sterilizate este o altă modalitate utilă de a preveni pătrunderea impurităților în probe prin pipete.
Dedicați exclusiv utilizării PCR un set de echipamente complet curate, format din pipete și stative. Acest lucru va garanta un transfer neglijabil de impurități sau contaminanți în laborator.
Folosiți înălbitori și etanol pe pipete, suporturi și mese de lucru pentru a îndepărta contaminanții.
Alocați un spațiu rezervat pentru toate reacțiile PCR pentru a minimiza contaminarea cu particule.
Folosește mănuși curate la fiecare pas și înlocuiește-le frecvent.
Plăci PCR
Inspectați concentrația și puritatea șablonului.
Curățenia băncii de lucru și a echipamentului utilizat la analiza probelor cu PCR trebuie menținută. Este esențial să se valideze gradul de puritate al probelor înainte de analiză și procesare.
În general, analizoarele iau în considerare concentrația și nivelul de puritate al probelor de ADN.
Raportul de absorbanță pentru 260nm/280nm nu trebuie să fie mai mic de 1,8. Lungimile de undă ulterioare, între 230nm și 320nm, sunt utilizate pentru identificarea impurităților.
Într-un caz, sărurile chaotropice și alți compuși organici sunt detectați la o rată de absorbție de 230 nm. În timp ce turbiditatea probelor de ADN este, de asemenea, detectată și verificată la o rată de absorbție de 320 nm.
Evitați supraîncărcarea plăcilor PCR cu produs
Oricât de mult se dorește să se ruleze mai multe produse simultan, acest lucru duce la contaminarea încrucișată a plăcilor PCR.
Supraîncărcarea plăcilor PCR cu diferite produse generează deșeuri și face extrem de dificilă identificarea probelor.
Păstrați evidența reactivilor PCR din alicote
Ciclurile continue de congelare/decongelare și utilizarea frecventă a alicotului pot deteriora reactivii PCR, enzimele și DNTP-urile prin recristalizare.
Întotdeauna încercați să monitorizați rata alicotei utilizate în timpul pregătirii probelor care urmează să fie analizate.
Un LIMS de preferat este mai potrivit pentru controlul stocurilor și al cantității de reactivi și probe congelate sau decongelate.
Alegeți cea mai bună temperatură de recoacere.
Alegerea și utilizarea temperaturii greșite de recoacere este o altă metodă prin care rezultatele PCR pot conține erori.
Uneori, reacția nu decurge conform planului. Se dorește reducerea temperaturii de recoacere pentru a facilita o reacție reușită.
Cu toate acestea, scăderea temperaturii crește șansele de rezultate fals pozitive și apariția dimerilor de primer.
Este important să se confirme analiza curbei de topire atunci când se utilizează plăci PCR, deoarece este un bun indicator al selectării temperaturii corecte de recoacere.
Software-ul de proiectare a primerilor ajută la proiectare, asigurând temperatura corectă de recoacere, reducând direct eroarea din plăcile PCR.
Aveți nevoie de o placă PCR de înaltă calitate?
În cazul în care v-ați întrebat unde să găsiți un producător de încredere dePlăci PCRNu mai căuta, pentru că ești în locul potrivit.
Cu amabilitateclick aici pentru a ne contactapentru produse și servicii de înaltă calitate la un preț care nu vă va goli contul bancar.
Data publicării: 30 octombrie 2021