5 einföld ráð til að koma í veg fyrir villur þegar unnið er með PCR-plötur

PCR (polymerase chain reactions) er ein af þekktustu aðferðunum sem notaðar eru í lífvísindarannsóknarstofum.

PCR plöturnar eru framleiddar úr fyrsta flokks plasti fyrir framúrskarandi vinnslu og greiningu sýna eða niðurstaðna sem safnað er.

Þeir hafa þunna og einsleita veggi til að tryggja nákvæma varmaflutning.

Til undirbúnings fyrir rauntímaforrit eru örsmáir hlutar af DNA eða RNA aðskildir og geymdir í PCR plötum.

PCR plöturnar eru mjög skilvirkar í hitaþéttingu og takmarka einnig hitaflæði.

Hins vegar, þótt PCR plöturnar séu árangursríkar og áreiðanlegar, geta villur og ónákvæmni auðveldlega komið fyrir við vinnslu sýna.

Þess vegna, ef þú hefur áhuga á að fá góða og hágæðaPCR plötur.Það er tilvalið að hafa samband við áreiðanlegan framleiðanda PCR-plata. Þannig ertu viss um að fá besta verðið.

Hér eru nokkrar varúðarráðstafanir sem þarf að fylgja til að forðast mengun hvarfefna eða sýna og koma í veg fyrir að ónákvæmni smýgi sér inn í niðurstöðurnar.

Að sótthreinsa umhverfið
Rangar jákvæðar eða neikvæðar niðurstöður eiga sér stað vegna óhreininda, sem fær þig til að efast um niðurstöðurnar.

Óhreinindi og mengunarefni koma fyrir í ýmsum myndum, svo sem óskyldum DNA eða efnaaukefnum sem að lokum draga úr skilvirkni og virkni viðbragðanna.

Það eru fjölmargar leiðir til að draga verulega úr mengunartíðni PCR-plötunnar.

Notkun sótthreinsaðra síuodda er önnur gagnleg leið til að koma í veg fyrir að óhreinindi smjúgi inn í sýnin í gegnum pípetturnar.

Notið alveg hreinan búnað, sem samanstendur af pípettum og rekkjum, eingöngu fyrir PCR. Þetta tryggir hverfandi flutning óhreininda eða mengunarefna um rannsóknarstofuna.

Notið bleikiefni og etanól á pípettur, rekki og bekki til að þurrka burt óhreinindi.

Úthlutaðu sérstöku rými fyrir allar PCR viðbrögð þín til að lágmarka enn frekar agnamengun.

Notið hreina hanska við hvert skref og skiptið þeim oft út.

PCR plötur
Kannaðu styrk og hreinleika sniðmátsins.
Gæta skal þess að bekkurinn og búnaðurinn sem notaður er við greiningu sýna með PCR séu hreinir. Mikilvægt er að staðfesta hreinleika sýnanna fyrir greiningu og vinnslu.

Almennt taka greiningartæki mið af styrk og hreinleika DNA sýnanna.

Reynið að gleypnihlutfallið fyrir 260 nm/280 nm sé ekki lægra en 1,8. Bylgjulengdir á milli 230 nm og 320 nm eru notaðar til að greina óhreinindi.

Í einu tilviki eru kaótrópísk sölt og önnur lífræn efnasambönd greind við gleypnihraða upp á 230 nm. Grugg í DNA sýnum er einnig greint og staðfest við gleypnihraða upp á 320 nm.

Forðist að ofhlaða PCR-plöturnar með vörunni
Þótt æskilegt sé að keyra margar vörur samtímis, þá leiðir það til krossmengunar á PCR-plötunum.

Ofhleðsla PCR plötunnar með mismunandi afurðum veldur sóun og gerir það afar erfitt að ákvarða sýnin.

Halda skrá yfir PCR hvarfefni í skammtastærðum
Stöðug frystingar-/þíðingarlotur og tíð notkun á skammti gæti skemmt PCR hvarfefni, ensím og DNTP vegna endurkristöllunar.

Reynið alltaf að fylgjast með hraða skammtsins sem notaður er við undirbúning sýna til greiningar.

LIMS hentar betur til að stjórna birgðum og magni hvarfefna og sýna sem eru fryst eða þiðin.

Veldu besta glæðingarhitastigið.
Að velja og nota rangt glæðingarhitastig er enn ein aðferð til að PCR niðurstöður innihalda villur.

Stundum gengur viðbrögðin ekki eins og til stóð. Æskilegt er að lækka glæðingarhitastigið til að auðvelda viðbrögðin að takast vel.

Hins vegar eykur lækkun hitastigs líkurnar á fölskum jákvæðum niðurstöðum og að grunntvíliður komi fram.

Það er mikilvægt að staðfesta greiningu bræðslukúrvunnar þegar PCR plötur eru notaðar þar sem þær eru góð vísbending um að velja rétt glæðingarhitastig.

Hugbúnaður fyrir hönnun grunns hjálpar við hönnun, útvegar rétt glæðingarhitastig sem dregur beint úr villum í PCR plötunum.

Þarftu hágæða PCR plötu?
Ef þú hefur verið að íhuga hvar þú getur fundið áreiðanlegan framleiðandaPCR plöturLeitaðu ekki lengra því þú ert á réttum stað.

Vinsamlegastsmelltu hér til að hafa samband við okkurfyrir hágæða vörur og þjónustu á verði sem tæmir ekki bankareikninginn.


Birtingartími: 30. október 2021