As reaccións en cadea da polimerase (PCR) son un dos métodos máis coñecidos e empregados nos laboratorios de ciencias da vida.
As placas de PCR fabrícanse con plásticos de primeira clase para un excelente procesamento e análise das mostras ou resultados recollidos.
Teñen paredes delgadas e homoxéneas para proporcionar unha transferencia térmica precisa.
Como preparación para aplicacións en tempo real, recóllense seccións diminutas de ADN ou ARN e almacénanse en placas de PCR.
As placas de PCR son moi eficientes no selado térmico e tamén restrinxen o fluxo de calor.
Non obstante, por moi eficaces e fiables que sexan as placas de PCR, os erros e as inexactitudes xurden con facilidade durante o procesamento de mostras.
Polo tanto, se estás interesado en obter un produto de boa calidadePlacas de PCR.O ideal é contactar cun fabricante de placas PCR fiable. Deste xeito, tes a garantía de obter a mellor oferta.
Aquí tes algunhas precaucións que debes seguir para evitar contaminacións de reactivos ou mostras e evitar que se introduzan inexactitudes nos resultados.
Esterilización do contorno
Prodúcense resultados positivos ou negativos incorrectos debido á presenza de impurezas, o que fai dubidar dos resultados.
As impurezas e os contaminantes preséntanse en diversas formas, como ADN non relacionado ou aditivos químicos, que finalmente diminúen a eficiencia e a eficacia da reacción.
Hai moitas maneiras de reducir en gran medida a taxa de contaminación da placa de PCR.
Empregar puntas de filtro esterilizadas é outra forma útil de evitar que as impurezas se infiltren nas mostras a través das pipetas.
Dedique un conxunto de equipamento completamente limpo, composto por pipetas e gradillas, exclusivamente para o uso da PCR. Isto garantirá unha transferencia insignificante de impurezas ou contaminantes polo laboratorio.
Empregar lixivia e etanol nas pipetas, gradillas e mesas para eliminar os contaminantes.
Reserva un espazo para todas as túas reaccións de PCR para minimizar aínda máis a contaminación por partículas.
Usa luvas limpas en cada paso e substitúeas con frecuencia.
Placas de PCR
Inspeccione a concentración e a pureza do modelo.
Débese manter a limpeza da mesa e do equipamento empregado ao analizar mostras coa PCR. É esencial validar o grao de pureza das mostras antes da análise e o procesamento.
Xeralmente, os analizadores teñen en conta a concentración e o nivel de pureza das mostras de ADN.
Procure que a relación de absorbancia para 260 nm/280 nm non sexa inferior a 1,8. Mentres que as lonxitudes de onda seguintes entre 230 nm e 320 nm úsanse para identificar impurezas.
Nun caso, os sales caotrópicos e outros compostos orgánicos detéctanse a unha taxa de absorbancia de 230 nm. Mentres que a turbidez nas mostras de ADN tamén se detecta e verifica a unha taxa de absorbancia de 320 nm.
Evitar a sobrecarga das placas de PCR con produto
Por moito que se desexe executar varios produtos simultaneamente, isto provoca contaminación cruzada das placas de PCR.
A sobrecarga das placas de PCR con diferentes produtos supón residuos e dificulta enormemente a determinación das mostras.
Manter rexistros de alícuotas de reactivos de PCR
Os ciclos continuos de conxelación/desconxelación e o uso frecuente de alícuotas poden danar os reactivos de PCR, os encimas e os DNTP por recristalización.
Procure sempre controlar a taxa de alícuota utilizada mentres prepara as mostras para a súa análise.
Un LIMS preferible é máis axeitado para controlar o inventario e a cantidade de reactivos e mostras conxeladas ou desconxeladas.
Escolla a mellor temperatura de recocido.
Escoller e usar a temperatura de recocido incorrecta é outro método polo que os resultados da PCR conteñen erros.
Ás veces, a reacción non sae segundo o previsto. É desexable reducir a temperatura de recocido para facilitar unha reacción exitosa.
Non obstante, baixar a temperatura aumenta as posibilidades de falsos positivos e de aparición de dímeros de cebadores.
É importante confirmar a análise da curva de fusión ao usar as placas de PCR, xa que é un bo indicador de seleccionar a temperatura de recocido correcta.
O software de deseño de cebadores axuda co deseño, proporcionando a temperatura de recocido correcta, o que reduce directamente o erro nas placas de PCR.
Necesitas unha placa PCR de alta calidade?
No caso de que estiveses a pensar onde atopar un fabricante fiable dePlacas de PCRNon busques máis porque estás no lugar axeitado.
AmablementeFai clic aquí para contactar connoscopara produtos e servizos de alta calidade a un prezo que non che arruinará o banco.
Data de publicación: 30 de outubro de 2021