Les réactions en chaîne par polymérase (PCR) sont l’une des méthodes les plus connues utilisées dans les laboratoires des sciences de la vie.
Les plaques PCR sont fabriquées à partir de plastiques de première qualité pour un excellent traitement et une excellente analyse des échantillons ou des résultats collectés.
Ils ont des parois fines et homogènes pour assurer un transfert thermique précis.
En préparation d'applications en temps réel, de minuscules sections d'ADN ou d'ARN sont isolées et stockées dans des plaques PCR.
Les plaques PCR sont très efficaces en matière de thermoscellage et limitent également le flux de chaleur.
Cependant, aussi efficaces et fiables que soient les plaques PCR, des erreurs et des inexactitudes peuvent facilement survenir lors du traitement des échantillons.
Par conséquent, si vous êtes intéressé à obtenir un produit de bonne qualité et de haute qualitéPlaques PCR.Il est préférable de contacter un fabricant de plaques PCR fiable. Vous êtes ainsi assuré de bénéficier de la meilleure offre.
Voici quelques précautions à suivre pour éviter les contaminations des réactifs ou des échantillons et éviter que des inexactitudes ne s'infiltrent dans les résultats.
Stériliser l'environnement
Des résultats positifs ou négatifs incorrects se produisent en raison de la présence d'impuretés, ce qui vous fait douter des résultats.
Les impuretés et les contaminants se présentent sous diverses formes, telles que de l’ADN non apparenté ou des additifs chimiques qui finissent par diminuer l’efficacité et l’efficience de la réaction.
Il existe de nombreuses façons de réduire considérablement le taux de contamination de la plaque PCR.
L’utilisation d’embouts filtrants stérilisés est un autre moyen utile d’empêcher les impuretés de s’infiltrer dans vos échantillons via les pipettes.
Consacrez un équipement parfaitement propre, composé de pipettes et de portoirs, exclusivement à la PCR. Cela garantira un transfert minimal d'impuretés ou de contaminants dans le laboratoire.
Utilisez des agents de blanchiment et de l’éthanol sur les pipettes, les supports et les bancs pour essuyer les contaminants.
Allouez un espace réservé à toutes vos réactions PCR afin de minimiser davantage la contamination par les particules.
Utilisez des gants propres à chaque étape et remplacez-les fréquemment.
plaques PCR
Inspectez la concentration et la pureté du modèle.
La propreté de la paillasse et du matériel utilisé lors de l'analyse des échantillons par PCR doit être maintenue. Il est essentiel de valider le degré de pureté des échantillons avant analyse et traitement.
En général, les analyseurs prennent en compte la concentration et le niveau de pureté des échantillons d’ADN.
Le rapport d'absorbance pour 260 nm/280 nm ne doit pas être inférieur à 1,8. Les longueurs d'onde suivantes, comprises entre 230 nm et 320 nm, sont utilisées pour identifier les impuretés.
Dans un cas, les sels chaotropiques et autres composés organiques sont détectés à une absorption de 230 nm. La turbidité des échantillons d'ADN est également détectée et vérifiée à une absorption de 320 nm.
Évitez de surcharger les plaques PCR avec le produit
Même si l’on souhaite exécuter plusieurs produits simultanément, cela entraîne une contamination croisée des plaques PCR.
La surcharge des plaques PCR avec différents produits entraîne des déchets et rend extrêmement difficile l'identification des échantillons.
Conserver des enregistrements des réactifs PCR aliquotés
Les cycles de congélation/décongélation continus et l'utilisation fréquente d'aliquotes peuvent endommager les réactifs PCR, les enzymes et les DNTP par recristallisation.
Efforcez-vous toujours de surveiller le taux d’aliquote utilisé lors de la préparation des échantillons à analyser.
Le LIMS préférable est plus adapté pour contrôler l’inventaire et la quantité de réactifs et d’échantillons congelés ou décongelés.
Choisissez la meilleure température de recuit.
Le choix et l’utilisation d’une température de recuit incorrecte constituent une autre méthode par laquelle les résultats de la PCR contiennent des erreurs.
Parfois, la réaction ne se déroule pas comme prévu. Il est alors souhaitable de réduire la température de recuit afin de faciliter la réussite de la réaction.
Cependant, l’abaissement de la température augmente les risques de faux positifs et d’apparition de dimères d’amorces.
Il est important de confirmer l'analyse de la courbe de fusion lors de l'utilisation des plaques PCR car c'est un bon indicateur de la sélection de la température de recuit correcte.
Le logiciel de conception d'amorces aide à la conception et à la fourniture de la bonne température de recuit, réduisant ainsi directement les erreurs dans les plaques PCR.
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Date de publication : 30 octobre 2021