Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR) on üks bioteaduste laborites laialdaselt kasutatavaid meetodeid.
PCR-plaadid on valmistatud esmaklassilisest plastist, et tagada proovide või tulemuste suurepärane töötlemine ja analüüsimine.
Neil on õhukesed ja homogeensed seinad, mis tagavad täpse soojusülekande.
Reaalajas rakenduste ettevalmistamiseks eraldatakse DNA või RNA väikesed lõigud ja säilitatakse PCR-plaatidel.
PCR-plaadid on kuumtihendamisel väga tõhusad ja piiravad ka soojuse voogu.
Kuigi PCR-plaadid on tõhusad ja usaldusväärsed, tekivad proovide töötlemisel kergesti vead ja ebatäpsused.
Seega, kui olete huvitatud heast ja kvaliteetsest tootestPCR-plaadid.Ideaalne on pöörduda usaldusväärse PCR-plaatide tootja poole. Nii saate kindlasti parima pakkumise.
Siin on mõned ettevaatusabinõud, mida tuleks järgida reagentide või proovide saastumise vältimiseks ja ebatäpsuste leviku takistamiseks tulemustes.
Ümbruskonna steriliseerimine
Lisandite olemasolu tõttu tekivad valed positiivsed või negatiivsed tulemused, mis panevad teid tulemustes kahtlema.
Lisandid ja saasteained esinevad mitmesugusel kujul, näiteks mitteseotud DNA või keemilised lisandid, mis lõpuks vähendavad reaktsiooni efektiivsust ja tõhusust.
PCR-plaadi saastumiskiiruse vähendamiseks on palju võimalusi.
Steriliseeritud filtriotsikute kasutamine on veel üks kasulik viis, kuidas vältida lisandite sattumist pipettide kaudu proovidesse.
Kasutage PCR-i jaoks ainult täiesti puhast varustust, mis koosneb pipettidest ja alustest. See tagab lisandite või saasteainete minimaalse leviku laboris.
Saasteainete pühkimiseks kasutage pipettidel, riiulitel ja pinkidel valgendit ja etanooli.
Osakeste saastumise edasiseks minimeerimiseks eraldage kõigi oma PCR-reaktsioonide jaoks reserveeritud ruum.
Kasutage igal sammul puhtaid kindaid ja vahetage neid sageli.
PCR-plaadid
Kontrollige malli kontsentratsiooni ja puhtust.
PCR-meetodil proovide analüüsimisel tuleks säilitada laua ja kasutatavate seadmete puhtus. Enne analüüsi ja töötlemist on oluline valideerida proovide puhtusaste.
Üldiselt võtavad analüsaatorid arvesse DNA proovide kontsentratsiooni ja puhtusastet.
Püüdke tagada, et neeldumiste suhe lainepikkustel 260 nm ja 280 nm ei oleks väiksem kui 1,8. Lisandite tuvastamiseks kasutatakse järgmisi lainepikkusi vahemikus 230 nm kuni 320 nm.
Näiteks kaotroopseid sooli ja teisi orgaanilisi ühendeid tuvastatakse neeldumiskiirusel 230 nm. DNA proovide hägusust tuvastatakse ja kontrollitakse samuti neeldumiskiirusel 320 nm.
Vältige PCR-plaatide ülekoormamist tootega
Kuigi on soovitav mitut toodet samaaegselt töödelda, põhjustab see PCR-plaatide ristsaastumist.
PCR-plaatide ülekoormamine erinevate toodetega raiskab materjali ja muudab proovide kindlakstegemise äärmiselt keeruliseks.
Pidage alikvootsete PCR-reagentide kohta arvestust
Pidevad külmutamise/sulatamise tsüklid ja alikvootide sagedane kasutamine võivad PCR-reagente, ensüüme ja DNTP-sid rekristalliseerumise kaudu kahjustada.
Analüüsitavate proovide ettevalmistamisel püüdke alati jälgida kasutatava alikvoodi kiirust.
Eelistatav LIMS sobib paremini külmutatud või sulatatud reagentide ja proovide varude ning koguse kontrollimiseks.
Valige parim kuumutustemperatuur.
Vale lõõmutamistemperatuuri valimine ja kasutamine on veel üks meetod, miks PCR-tulemused sisaldavad vigu.
Mõnikord ei lähe reaktsioon plaanipäraselt. Eduka reaktsiooni hõlbustamiseks on soovitav alandada lõõmutamistemperatuuri.
Temperatuuri alandamine suurendab aga valepositiivsete tulemuste ja praimeri dimeeride ilmnemise tõenäosust.
PCR-plaatide kasutamisel on oluline kinnitada sulamiskõvera analüüs, kuna see on hea näitaja õige lõõmutamistemperatuuri valikuks.
Praimerite disainitarkvara aitab disainida ja õige lõõmutamistemperatuuri tagamine vähendab otseselt PCR-plaatidel tekkivat viga.
Vajad kvaliteetset PCR-plaati?
Kui olete mõelnud, kust leida usaldusväärset tootjatPCR-plaadidÄra enam otsi, sest oled õiges kohas.
PalunKliki siia, et meiega ühendust võttakvaliteetsete toodete ja teenuse eest hinnaga, mis ei löö pankrotti.
Postituse aeg: 30. okt 2021