Les reaccions en cadena de la polimerasa (PCR) són un dels mètodes més coneguts que s'utilitzen en els laboratoris de ciències de la vida.
Les plaques de PCR es fabriquen amb plàstics de primera classe per a un processament i anàlisi excel·lents de les mostres o resultats recollits.
Tenen parets primes i homogènies per proporcionar una transferència tèrmica precisa.
Com a preparació per a aplicacions en temps real, es separen petites seccions d'ADN o ARN i s'emmagatzemen en plaques de PCR.
Les plaques de PCR són altament eficients en el segellat tèrmic i també restringeixen el flux de calor.
Tanmateix, per molt efectives i fiables que siguin les plaques de PCR, els errors i les inexactituds apareixen fàcilment durant el processament de mostres.
Per tant, si esteu interessats en obtenir una bona i alta qualitatPlaques de PCR.L'ideal és contactar amb un fabricant de plaques PCR fiable. Amb això, tens la garantia d'obtenir la millor oferta.
Aquí teniu algunes precaucions a seguir per evitar contaminacions de reactius o mostres i evitar que s'infiltrin inexactituds en els resultats.
Esterilitzar l'entorn
Es produeixen resultats positius o negatius incorrectes a causa de la presència d'impureses, cosa que fa dubtar dels resultats.
Les impureses i els contaminants es presenten en diverses formes, com ara ADN no relacionat o additius químics, que finalment disminueixen l'eficiència i l'eficàcia de la reacció.
Hi ha moltes maneres de reduir considerablement la taxa de contaminació de la placa de PCR.
L'ús de filtres esterilitzats és una altra manera útil d'evitar que les impureses s'infiltrin a les mostres a través de les pipetes.
Dediqueu un conjunt d'equipament completament net, format per pipetes i graelles, exclusivament a l'ús de la PCR. Això garantirà una transferència insignificant d'impureses o contaminants pel laboratori.
Utilitzeu lleixiu i etanol a les pipetes, les grades i les taules per eliminar els contaminants.
Assigneu un espai reservat per a totes les reaccions de PCR per minimitzar encara més la contaminació per partícules.
Feu servir guants nets a cada pas i canvieu-los sovint.
plaques de PCR
Inspeccioneu la concentració i la puresa de la plantilla.
Cal mantenir la neteja de la taula i de l'equip utilitzat en analitzar mostres amb la PCR. És essencial validar el grau de puresa de les mostres abans de l'anàlisi i el processament.
Generalment, els analitzadors tenen en compte la concentració i el nivell de puresa de les mostres d'ADN.
Intenteu que la relació d'absorbància per a 260 nm/280 nm no sigui inferior a 1,8. Mentre que les longituds d'ona següents entre 230 nm i 320 nm s'utilitzen per identificar impureses.
En un cas, les sals caotròpiques i altres compostos orgànics es detecten a una taxa d'absorbància de 230 nm. Mentre que la terbolesa en mostres d'ADN també es detecta i verifica a una taxa d'absorbància de 320 nm.
Eviteu sobrecarregar les plaques de PCR amb producte
Per molt que es desitgi executar diversos productes simultàniament, es produeix una contaminació creuada de les plaques de PCR.
La sobrecàrrega de les plaques de PCR amb diferents productes genera residus i fa que sigui extremadament difícil determinar les mostres.
Mantenir registres d'alíquotes de reactius de PCR
Els cicles continus de congelació/descongelació i l'ús freqüent d'alíquotes poden danyar els reactius de PCR, els enzims i els DNTP a través de la recristal·lització.
Intenteu sempre controlar la taxa d'alíquota utilitzada mentre prepareu les mostres per analitzar.
Un LIMS preferible és més adequat per controlar l'inventari i la quantitat de reactius i mostres congelades o descongelades.
Trieu la millor temperatura de recuit.
Escollir i utilitzar la temperatura de recuit incorrecta és un altre mètode en què els resultats de la PCR contenen errors.
De vegades, la reacció no va segons el previst. Es desitja reduir la temperatura de recuit per tal de facilitar una reacció reeixida.
Tanmateix, baixar la temperatura augmenta les possibilitats de falsos positius i d'aparició de dímers de primers.
És important confirmar l'anàlisi de la corba de fusió quan s'utilitzen plaques de PCR, ja que és un bon indicador de seleccionar la temperatura de recuit correcta.
El programari de disseny de primers ajuda amb el disseny, proporcionant la temperatura de recuit adequada amb la qual cosa redueix directament l'error a les plaques de PCR.
Necessiteu una placa PCR d'alta qualitat?
En cas que us hàgiu estat plantejant on trobar un fabricant fiable deplaques de PCRNo busquis més perquè ets al lloc correcte.
Amablementfeu clic aquí per contactar amb nosaltresper a productes i serveis d'alta qualitat a un preu que no us arruïnarà.
Data de publicació: 30 d'octubre de 2021