5 jednostavnih savjeta za sprječavanje grešaka pri radu s PCR pločama

Lančana reakcija polimeraze (PCR) je jedna od široko poznatih metoda koje se koriste u laboratorijama za biološke nauke.

PCR ploče su proizvedene od prvoklasne plastike za odličnu obradu i analizu prikupljenih uzoraka ili rezultata.

Imaju tanke i homogene zidove kako bi se osigurao precizan prijenos topline.

U pripremi za primjene u stvarnom vremenu, minijaturni dijelovi DNK ili RNK se izdvajaju i pohranjuju na PCR ploče.

PCR ploče su veoma efikasne u termičkom zatvaranju i ograničavaju protok toplote.

Međutim, koliko god PCR ploče bile efikasne i pouzdane, greške i netačnosti se lako mogu pojaviti tokom obrade uzoraka.

Stoga, ako ste zainteresirani za dobijanje dobrog i visokokvalitetnogPCR ploče.Idealno je kontaktirati pouzdanog proizvođača PCR ploča. Na taj način ste sigurni da ćete dobiti najbolju ponudu.

Evo nekoliko mjera opreza koje treba slijediti kako biste izbjegli kontaminaciju reagensa ili uzoraka i spriječili da se netačnosti uvuku u rezultate.

Sterilizacija okoline
Netačni pozitivni ili negativni rezultati nastaju zbog prisustva nečistoća, što vas navodi na sumnju u rezultate.

Nečistoće i kontaminanti se javljaju u različitim oblicima kao što su nepovezana DNK ili hemijski aditivi koji na kraju smanjuju efikasnost i efektivnost reakcije.

Postoje brojni načini da se značajno smanji stopa kontaminacije PCR ploče.

Korištenje steriliziranih filter vrhova je još jedan koristan način za sprječavanje ulaska nečistoća u uzorke kroz pipete.

Namijenite potpuno čist set opreme, koji se sastoji od pipeta i stalaka, isključivo za upotrebu PCR-a. Ovo će garantovati zanemariv prenos nečistoća ili kontaminanata po laboratoriji.

Koristite izbjeljivače i etanol na pipetama, stalcima i radnim stolovima kako biste obrisali nečistoće.

Odredite rezervirani prostor za sve vaše PCR reakcije kako biste dodatno smanjili kontaminaciju česticama.

Koristite čiste rukavice na svakom koraku i često ih mijenjajte.

PCR ploče
Provjerite koncentraciju i čistoću šablona.
Prilikom analize uzoraka PCR-om potrebno je održavati čistoću radne površine i opreme. Neophodno je provjeriti stepen čistoće uzoraka prije analize i obrade.

Generalno, analizatori uzimaju u obzir koncentraciju i nivo čistoće uzoraka DNK.

Nastojte da odnos apsorbancije za 260 nm/280 nm ne bude manji od 1,8. Dok se talasne dužine između 230 nm i 320 nm koriste za identifikaciju nečistoća.

Na primjer, haotropne soli i drugi organski spojevi se detektuju pri brzini apsorbancije od 230 nm. Dok se zamućenost u uzorcima DNK također detektuje i provjerava pri brzini apsorbancije od 320 nm.

Izbjegavajte preopterećenje PCR ploča proizvodom
Koliko god je poželjno istovremeno koristiti više proizvoda, to dovodi do unakrsne kontaminacije PCR ploča.

Preopterećenje PCR ploča različitim proizvodima dovodi do rasipanja i izuzetno otežava utvrđivanje tačnosti uzoraka.

Vodite evidenciju o alikvotnim PCR reagensima
Kontinuirani ciklusi zamrzavanja/odmrzavanja i česta upotreba alikvota mogu oštetiti PCR reagense, enzime i DNTP-ove putem rekristalizacije.

Uvijek nastojte pratiti brzinu korištenog alikvota dok pripremate uzorke za analizu.

Poželjni LIMS je prikladniji za kontrolu inventara i količine reagensa i uzoraka koji su zamrznuti ili odmrznuti.

Odaberite najbolju temperaturu žarenja.
Odabir i korištenje pogrešne temperature žarenja je još jedna metoda zbog koje PCR rezultati sadrže greške.

Ponekad reakcija ne ide po planu. Poželjno je smanjiti temperaturu žarenja kako bi se olakšala uspješna reakcija.

Međutim, snižavanje temperature povećava vjerovatnoću lažno pozitivnih rezultata i pojave dimera primera.

Važno je potvrditi analizu krivulje topljenja pri korištenju PCR ploča jer je to dobar pokazatelj odabira ispravne temperature žarenja.

Softver za dizajn primera pomaže pri dizajniranju, obezbjeđujući pravu temperaturu žarenja direktno smanjujući greške u PCR pločama.

Trebate visokokvalitetnu PCR ploču?
U slučaju da ste razmišljali gdje pronaći pouzdanog proizvođačaPCR pločeNe tražite više jer ste na pravom mjestu.

Ljubaznokliknite ovdje da nas kontaktirateza visokokvalitetne proizvode i usluge po cijeni koja neće isprazniti vaš novčanik.


Vrijeme objave: 30. oktobar 2021.