5 نصائح بسيطة لتجنب الأخطاء عند العمل مع ألواح تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)

تعتبر تفاعلات البوليميراز المتسلسل (PCR) واحدة من الطرق المعروفة على نطاق واسع والمستخدمة في مختبرات علوم الحياة.

يتم إنتاج ألواح PCR من بلاستيك عالي الجودة لمعالجة وتحليل العينات أو النتائج التي تم جمعها بشكل ممتاز.

إنها تمتلك جدرانًا رقيقة ومتجانسة لتوفير نقل حراري دقيق.

استعدادًا للتطبيقات في الوقت الفعلي، يتم عزل قسم صغير من الحمض النووي أو الحمض النووي الريبي وتخزينه في أطباق تفاعل البوليميراز المتسلسل.

تتمتع ألواح PCR بكفاءة عالية في الختم الحراري وتقييد تدفق الحرارة أيضًا.

ومع ذلك، على الرغم من فعالية وموثوقية لوحات تفاعل البوليميراز المتسلسل، فإن الأخطاء وعدم الدقة قد تظهر بسهولة أثناء معالجة العينات.

لذلك، إذا كنت مهتمًا بالحصول على منتج جيد وعالي الجودةأطباق PCR.من الأفضل التواصل مع مُصنِّع موثوق لألواح PCR. بهذا تضمن الحصول على أفضل صفقة.

وفيما يلي بعض الاحتياطات التي يجب اتباعها لتجنب تلوث الكواشف أو العينات ومنع الأخطاء من التسلل إلى النتائج.

تعقيم البيئة المحيطة
تحدث نتائج إيجابية أو سلبية غير صحيحة بسبب وجود شوائب، مما يجعلك تشك في النتائج.

تحدث الشوائب والمواد الملوثة في أشكال مختلفة مثل الحمض النووي غير ذي الصلة أو المواد الكيميائية المضافة والتي تؤدي في النهاية إلى تقليل كفاءة وفعالية التفاعل.

هناك العديد من الطرق لتقليل معدل تلوث لوحة PCR بشكل كبير.

يعد استخدام أطراف الفلتر المعقمة طريقة مفيدة أخرى لمنع الشوائب من التسلل إلى عيناتك من خلال الماصات.

خصّص مجموعةً من المعدات النظيفة تمامًا، من ماصات ورفوف، مخصصةً حصريًا لاختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). سيضمن ذلك نقلًا ضئيلًا للشوائب والملوثات في المختبر.

استخدم المبيضات والإيثانول على القطارات والأرفف والمقاعد لإزالة الملوثات.

خصص مساحة مخصصة لجميع تفاعلات PCR الخاصة بك لتقليل تلوث الجسيمات بشكل أكبر.

استخدم قفازات نظيفة في كل خطوة واستبدلها بشكل متكرر.

لوحات تفاعل البوليميراز المتسلسل
فحص تركيز ونقاء القالب.
يجب الحفاظ على نظافة المختبر والمعدات المستخدمة لتحليل العينات بتقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). ومن الضروري التحقق من درجة نقاء العينات قبل تحليلها ومعالجتها.

بشكل عام، يأخذ المحللون في الاعتبار تركيز ومستوى نقاء عينات الحمض النووي.

يُراعى ألا تقل نسبة الامتصاصية لأطوال الموجات ٢٦٠/٢٨٠ نانومتر عن ١.٨. ويُستخدم طول موجي لاحق بين ٢٣٠ و٣٢٠ نانومتر لتحديد الشوائب.

على سبيل المثال، يتم الكشف عن الأملاح الفوضوية والمركبات العضوية الأخرى عند معدل امتصاص يبلغ 230 نانومتر. كما يتم الكشف عن العكارة في عينات الحمض النووي والتحقق منها عند معدل امتصاص يبلغ 320 نانومتر.

تجنب التحميل الزائد لألواح PCR بالمنتج
على الرغم من أنه من المرغوب فيه تشغيل منتجات متعددة في وقت واحد، إلا أن ذلك يؤدي إلى التلوث المتبادل لألواح تفاعل البوليميراز المتسلسل.

يؤدي تحميل أطباق تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) بمنتجات مختلفة إلى إهدار الكثير من الموارد ويجعل من الصعب للغاية التأكد من العينات.

احتفظ بسجلات كواشف تفاعل البوليميراز المتسلسل Aliquot
قد تؤدي دورات التجميد/الذوبان المستمرة والاستخدام المتكرر للعينات إلى إتلاف كواشف تفاعل البوليميراز المتسلسل والإنزيمات وDNTP من خلال إعادة التبلور.

احرص دائمًا على مراقبة معدل الكمية المستخدمة أثناء تحضير العينات المراد تحليلها.

يفضل استخدام نظام LIMS للتحكم في المخزون وكمية الكواشف والعينات المجمدة أو المذابة.

اختر أفضل درجة حرارة التلدين.
إن اختيار واستخدام درجة حرارة التلدين الخاطئة هو طريقة أخرى تحتوي على خطأ في نتائج تفاعل البوليميراز المتسلسل.

أحيانًا لا تسير عملية التفاعل كما هو مخطط لها. يُفضّل خفض درجة حرارة التلدين لضمان نجاح التفاعل.

ومع ذلك، فإن خفض درجة الحرارة يزيد من فرص ظهور نتائج إيجابية كاذبة وثنائيات البادئ.

من المهم التأكد من تحليل منحنى الانصهار عند استخدام ألواح PCR لأنه مؤشر جيد لاختيار درجة حرارة التلدين الصحيحة.

يساعد برنامج تصميم التمهيدي في التصميم وتوفير درجة حرارة التلدين الصحيحة مع تقليل الخطأ في ألواح PCR بشكل مباشر.

هل تحتاج إلى لوحة PCR عالية الجودة؟
في حال كنت تفكر في مكان العثور على مصنع موثوق بهلوحات تفاعل البوليميراز المتسلسللا تبحث أكثر لأنك في المكان الصحيح.

بلطفانقر هنا للتواصل معناللحصول على منتجات وخدمات عالية الجودة بسعر لن يكلفك الكثير.


وقت النشر: 30 أكتوبر 2021