וואָס זאָל מען באַטראַכטן ווען מען פּיפּעטירט PCR מיקסטשערז?

פֿאַר געראָטענע אַמפּליפיקאַציע רעאַקציעס, איז עס נייטיק אַז די יחידישע רעאַקציע קאָמפּאָנענטן זאָלן זיין פאַראַן אין דער ריכטיקער קאָנצענטראַציע אין יעדער צוגרייטונג. דערצו איז עס וויכטיק אַז קיין קאָנטאַמינאַציע זאָל נישט פּאַסירן.

ספּעציעל ווען מען דאַרף אויפשטעלן אַ סך רעאַקציעס, איז מען איינגעשטעלט צו צוגרייטן אַן אַזוי גערופענעם מאַסטער מיקס אַנשטאָט פּיפּעטירן יעדן רעאַגענט באַזונדער אין יעדן געפֿעס. פֿאָר-קאָנפֿיגורירטע מיקסעס זענען קאמערציעל פֿאַרפֿיגבאר, אין וועלכע מען לייגט צו נאָר מוסטער-ספּעציפֿישע קאָמפּאָנענטן (פּריימער) און וואַסער. אַלטערנאַטיוו, קען מען צוגרייטן דעם מאַסטער מיקס אַליין. אין ביידע וואַריאַנטן, ווערט די מישונג פֿאַרטיילט צו יעדן PCR געפֿעס אָן אַ טעמפּלאַט און דער יחידישער דנאַ מוסטער ווערט צוגעגעבן באַזונדער אין סוף.

ניצן אַ מאַסטער מיקס האט עטלעכע מעלות: ערשטנס, ווערט די צאָל פון איין פּיפּעטינג טריט רעדוצירט. אויף דעם וועג ווערט סיי דער ריזיקאָ פון באַניצער טעותים בעת פּיפּעטינג און סיי דער ריזיקאָ פון קאַנטאַמאַניישאַן מינימיזירט און, פֿאַרשטייט זיך, ווערט צייט געשפּאָרט. אין פּרינציפּ, איז די פּיפּעטינג אַקיעראַסי אויך העכער, ווייל גרעסערע וואַליומז ווערן דאָזירט. דאָס איז גרינג צו פֿאַרשטיין ווען מען קאָנטראָלירט די טעכנישע דאַטן פון פּיפּעטן: ווי קלענער דער דאָזירטער באַנד, אַלץ העכער קענען די אָפּנייגונגען זיין. דער פֿאַקט אַז אַלע פּרעפּעריישאַנז קומען פֿון דעם זעלבן געפֿעס האט אַ positive ווירקונג אויף האָמאָגעניטי (אויב גוט געמישט). דאָס פֿאַרבעסערט אויך די רעפּראָדוצירבאַרקייט פֿון די עקספּערימענטן.

ביים צוגרייטן דעם הויפט מיקס, זאָל מען צולייגן לפּחות 10% עקסטרע וואָלומען (למשל, אויב מען דאַרף 10 צוגרייטונגען, רעכנט מען אויס אויף דער באַזע פון ​​11), אַזוי אַז אפילו דער לעצטער געפֿעס זאָל זיך ריכטיק אָנפֿילן. אויף דעם אופֿן קען מען קאָמפּענסירן (קליינע) פּיפּעטיר-אומפּינקטלעכקייטן, און דער עפֿעקט פֿון מוסטער-פֿאַרלוסט ביים דאָזירן דיטערדזשענט-האַלטיקע לייזונגען. דיטערדזשענטן געפֿינען זיך אין ענזיים-לייזונגען ווי פּאָלימעראַזעס און הויפט מיקסעס, וואָס פֿאַראורזאַכן שאָום-פֿאָרמאַציע און רעשטלעך אויף דער אינעווייניקסטער ייבערפֿלאַך פֿון נאָרמאַלן...פּיפּעט עצות.

דעפּענדינג אויף דער אַפּליקאַציע און דעם טיפּ פליסיקייט וואָס מען דאַרף דיספּענסירן, זאָל מען אויסקלייבן די ריכטיקע פּיפּעטינג טעכניק (1) און אויסקלייבן די פּאַסיקע עקוויפּמענט. פֿאַר לייזונגען וואָס אַנטהאַלטן דיטערדזשענץ, ווערט רעקאָמענדירט אַ דירעקט דיספּלייסמאַנט סיסטעם אָדער די אַזוי גערופענע "נידעריק ריטענשאַן" פּיפּעט שפּיץ ווי אַן אַלטערנאַטיוו פֿאַר לופט-קישן פּיפּעטן. דער ווירקונג פוןACE פּיפּעט שפּיץאיז באַזירט אויף אַ באַזונדער הידראָפאָביש ייבערפלאַך. פליסיקייטן וואָס אַנטהאַלטן דיטערדזשאַנץ לאָזן נישט קיין רעשטלעך פילם אויף דער אינעווייניק און אַרויסווייניק, אַזוי אַז דער פארלוסט פון לייזונג קען זיין מינימיזירט.

חוץ די גענויע דאָזירונג פון אַלע קאָמפּאָנענטן, איז עס אויך וויכטיק אַז קיין קאָנטאַמינאַציע פון ​​די פּרעפּעריישאַנז זאָל נישט פּאַסירן. עס איז נישט גענוג צו נוצן קאָנסומאַבלעס פון הויך ריינקייט, ווייַל דער פּיפּעטינג פּראָצעס אין אַ לופט קישן פּיפּעט קען פּראָדוצירן אַעראָסאָלס וואָס בלייבן אין דער פּיפּעט. די דנאַ וואָס קען זיין קאַנטיינד אין דעם אַעראָסאָל קען זיין טראַנספערד פון איין מוסטער צו דער ווייַטער אין די פאלגענדע פּיפּעטינג שריט און אַזוי פירן צו קאָנטאַמינאַציע. די דירעקט דיספּלייסמאַנט סיסטעמען דערמאנט אויבן קענען אויך מינאַמייז דעם ריזיקירן. פֿאַר לופט-קישן פּיפּעטץ איז עס זינען צו נוצן פילטער שפּיץ צו באַשיצן די פּיפּעט קאָון דורך ריטענינג שפּריץ, אַעראָסאָלס און ביאָמאָלעקולעס.


פּאָסט צייט: דעצעמבער-06-2022