విజయవంతమైన విస్తరణ ప్రతిచర్యల కోసం, ప్రతి తయారీలో వ్యక్తిగత ప్రతిచర్య భాగాలు సరైన సాంద్రతలో ఉండటం అవసరం. అదనంగా, ఎటువంటి కాలుష్యం జరగకపోవడం ముఖ్యం.
ముఖ్యంగా అనేక ప్రతిచర్యలను ఏర్పాటు చేయాల్సి వచ్చినప్పుడు, ప్రతి కారకంను విడిగా ప్రతి పాత్రలోకి పైప్ చేయడానికి బదులుగా మాస్టర్ మిక్స్ అని పిలవబడేదాన్ని తయారు చేయడం ఏర్పాటు చేయబడింది. ముందుగా కాన్ఫిగర్ చేయబడిన మిశ్రమాలు వాణిజ్యపరంగా అందుబాటులో ఉన్నాయి, వీటిలో నమూనా-నిర్దిష్ట భాగాలు (ప్రైమర్) మరియు నీరు మాత్రమే జోడించబడతాయి. ప్రత్యామ్నాయంగా, మాస్టర్ మిక్స్ను మీరే తయారు చేసుకోవచ్చు. రెండు రకాల్లోనూ, మిశ్రమాన్ని టెంప్లేట్ లేకుండా ప్రతి PCR పాత్రకు పంపిణీ చేస్తారు మరియు వ్యక్తిగత DNA నమూనా చివరిలో విడిగా జోడించబడుతుంది.
మాస్టర్ మిక్స్ ఉపయోగించడం వల్ల అనేక ప్రయోజనాలు ఉన్నాయి: మొదట, సింగిల్ పైపెటింగ్ దశల సంఖ్య తగ్గుతుంది. ఈ విధంగా, పైపెటింగ్ సమయంలో వినియోగదారు లోపాల ప్రమాదం మరియు కాలుష్య ప్రమాదం రెండూ తగ్గించబడతాయి మరియు, వాస్తవానికి, సమయం ఆదా అవుతుంది. సూత్రప్రాయంగా, పైపెటింగ్ ఖచ్చితత్వం కూడా ఎక్కువగా ఉంటుంది, ఎందుకంటే పెద్ద వాల్యూమ్లు డోస్ చేయబడతాయి. పైపెట్ల సాంకేతిక డేటాను తనిఖీ చేసేటప్పుడు ఇది అర్థం చేసుకోవడం సులభం: డోస్ చేయబడిన వాల్యూమ్ చిన్నది, విచలనాలు ఎక్కువగా ఉంటాయి. అన్ని సన్నాహాలు ఒకే పాత్ర నుండి వస్తాయనే వాస్తవం సజాతీయతపై సానుకూల ప్రభావాన్ని చూపుతుంది (బాగా కలిపి ఉంటే). ఇది ప్రయోగాల పునరుత్పత్తి సామర్థ్యాన్ని కూడా మెరుగుపరుస్తుంది.
మాస్టర్ మిశ్రమాన్ని తయారుచేసేటప్పుడు, కనీసం 10% అదనపు వాల్యూమ్ను జోడించాలి (ఉదా. 10 సన్నాహాలు అవసరమైతే, 11 ఆధారంగా లెక్కించండి), తద్వారా చివరి పాత్ర కూడా సరిగ్గా నిండి ఉంటుంది. ఈ విధంగా, (స్వల్పంగా) పైప్టింగ్ తప్పులు మరియు డిటర్జెంట్-కలిగిన ద్రావణాలను మోతాదు చేసేటప్పుడు నమూనా నష్టం యొక్క ప్రభావాన్ని భర్తీ చేయవచ్చు. డిటర్జెంట్లు పాలిమరేసెస్ మరియు మాస్టర్ మిశ్రమాలు వంటి ఎంజైమ్ ద్రావణాలలో ఉంటాయి, దీనివల్ల సాధారణ లోపలి ఉపరితలంపై నురుగు ఏర్పడటం మరియు అవశేషాలు ఏర్పడతాయి.పైపెట్ చిట్కాలు.
అప్లికేషన్ మరియు పంపిణీ చేయవలసిన ద్రవ రకాన్ని బట్టి, సరైన పైపెటింగ్ టెక్నిక్ (1) ఎంచుకోవాలి మరియు తగిన పరికరాలను ఎంచుకోవాలి. డిటర్జెంట్లు కలిగిన ద్రావణాల కోసం, డైరెక్ట్ డిస్ప్లేస్మెంట్ సిస్టమ్ లేదా ఎయిర్-కుషన్ పైపెట్లకు ప్రత్యామ్నాయంగా "తక్కువ నిలుపుదల" పైపెట్ చిట్కాలు అని పిలవబడేవి సిఫార్సు చేయబడ్డాయి. దీని ప్రభావంACE PIPETTE చిట్కాముఖ్యంగా హైడ్రోఫోబిక్ ఉపరితలం మీద ఆధారపడి ఉంటుంది. డిటర్జెంట్లు కలిగిన ద్రవాలు లోపల మరియు వెలుపల అవశేష పొరను వదిలివేయవు, తద్వారా ద్రావణం యొక్క నష్టాన్ని తగ్గించవచ్చు.
అన్ని భాగాల యొక్క ఖచ్చితమైన మోతాదుతో పాటు, తయారీలలో ఎటువంటి కాలుష్యం జరగకపోవడం కూడా ముఖ్యం. అధిక స్వచ్ఛత కలిగిన వినియోగ వస్తువులను ఉపయోగించడం సరిపోదు, ఎందుకంటే ఎయిర్ కుషన్ పైపెట్లోని పైపెట్టింగ్ ప్రక్రియ పైపెట్లో మిగిలి ఉన్న ఏరోసోల్లను ఉత్పత్తి చేస్తుంది. ఏరోసోల్లో ఉండే DNA ను తదుపరి పైపెట్టింగ్ దశలో ఒక నమూనా నుండి మరొక నమూనాకు బదిలీ చేయవచ్చు మరియు తద్వారా కాలుష్యానికి దారితీస్తుంది. పైన పేర్కొన్న ప్రత్యక్ష స్థానభ్రంశం వ్యవస్థలు కూడా ఈ ప్రమాదాన్ని తగ్గించవచ్చు. ఎయిర్-కుషన్ పైపెట్ల కోసం, స్ప్లాష్లు, ఏరోసోల్లు మరియు బయోమోలిక్యూల్లను నిలుపుకోవడం ద్వారా పైపెట్ కోన్ను రక్షించడానికి ఫిల్టర్ చిట్కాలను ఉపయోగించడం అర్ధమే.
పోస్ట్ సమయం: డిసెంబర్-06-2022