Dema ku Têkelên PCR-ê bi Pipetkirinê têne bikar anîn, Divê Çi Bê Berçavgirtin?

Ji bo reaksiyonên amplîfîkasyonê yên serkeftî, pêdivî ye ku pêkhateyên reaksiyonê yên ferdî di her amadekariyê de bi rêjeya rast hebin. Wekî din, girîng e ku qirêjî çênebe.

Bi taybetî dema ku gelek reaksiyon divê werin sazkirin, li şûna ku her reagentek bi awayekî cuda di her konteynerê de were pîpetkirin, hatiye destnîşankirin ku tevliheviyek bi navê master were amadekirin. Tevlihevên pêşwext-mîhengkirî li bazirganiyê hene, ku tê de tenê pêkhateyên taybetî yên nimûneyê (primer) û av têne zêdekirin. Wekî din, tevliheviya master dikare ji hêla we ve were amadekirin. Di her du guhertoyan de jî, tevlihev bêyî şablonek li her konteynera PCR-ê tê belavkirin û nimûneya DNA-ya takekesî di dawiyê de bi awayekî cuda tê zêdekirin.

Bikaranîna tevliheviyek master çend avantaj hene: Pêşî, hejmara gavên pîpetkirinê yên yekane kêm dibe. Bi vî rengî, hem xetera xeletiyên bikarhêner di dema pîpetkirinê de û hem jî xetera qirêjbûnê kêm dibe û bê guman, dem tê teserûfkirin. Di prensîbê de, rastbûna pîpetkirinê jî bilindtir e, ji ber ku qebareyên mezintir têne doz kirin. Ev yek dema ku daneyên teknîkî yên pîpetan têne kontrol kirin hêsan tê fêm kirin: Qebareya dozkirî çiqas piçûktir be, cûdahî dikarin ewqas bilindtir bibin. Rastiya ku hemî amadekarî ji heman keştîyê tên bandorek erênî li ser homojeniyê dike (eger baş werin tevlihev kirin). Ev di heman demê de dubarekirina ceribandinan jî baştir dike.

Dema amadekirina tevliheviya sereke, divê herî kêm %10 mîqdara zêde were zêdekirin (mînak, heke 10 amadekarî hewce bin, li ser bingeha 11-an hesab bikin), da ku heta konteynirê dawîn jî bi rêkûpêk were dagirtin. Bi vî rengî, nerastiyên (sivik) yên pîpetkirinê û bandora windabûna nimûneyê dema dozkirina çareseriyên ku deterjan dihewînin dikarin werin telafîkirin. Deterjan di çareseriyên enzîman de wekî polîmeraz û tevlihevên sereke hene, û dibin sedema çêbûna kef û bermayiyan li ser rûyê hundur ê normal.serên pîpetê.

Li gorî serîlêdanê û celebê şilava ku were belavkirin, divê teknîka rast a pîpetkirinê (1) û alavên guncaw werin hilbijartin. Ji bo çareseriyên ku deterjanan dihewînin, pergala cihguherîna rasterast an jî serên pîpetê yên bi navê "ragirtina kêm" wekî alternatîfek ji bo pîpetên balîfa hewayî têne pêşniyar kirin. BandoraSerê PÎPETA ACEli ser rûyekî bi taybetî hîdrofobîk hatiye avakirin. Şilekên ku deterjanan dihewînin li hundir û derve fîlmek bermayî nahêlin, ji ber vê yekê windabûna çareseriyê dikare were kêmkirin.

Ji bilî dozaja rast a hemû pêkhateyan, girîng e ku gemarîbûna amadekariyan çênebe. Bikaranîna madeyên xerckirinê yên bi paqijiya bilind têrê nake, ji ber ku pêvajoya pîpetkirinê di pîpeteke balîfê hewayî de dikare aerosolan çêbike ku di pîpetê de dimînin. DNAya ku dibe ku di aerosolê de hebe, dikare di gava pîpetkirinê ya din de ji nimûneyekê bo nimûneyeke din were veguheztin û bi vî rengî bibe sedema gemarîbûnê. Sîstemên cihguherîna rasterast ên ku li jor hatine behs kirin jî dikarin vê xetereyê kêm bikin. Ji bo pîpetên balîfê hewayî, bikaranîna serên fîlteran maqûl e da ku konê pîpetê bi ragirtina şilbûn, aerosol û biyomolekulan were parastin.


Dema weşandinê: Kanûn-06-2022