Հաջող ուժեղացման ռեակցիաների համար անհրաժեշտ է, որ առանձին ռեակցիայի բաղադրիչները յուրաքանչյուր պատրաստուկում առկա լինեն ճիշտ կոնցենտրացիայով: Բացի այդ, կարևոր է, որ աղտոտում տեղի չունենա:
Հատկապես, երբ անհրաժեշտ է կազմակերպել բազմաթիվ ռեակցիաներ, սահմանվել է պատրաստել այսպես կոչված գլխավոր խառնուրդ՝ յուրաքանչյուր ռեակտիվը առանձին-առանձին յուրաքանչյուր անոթի մեջ պիպետով լցնելու փոխարեն: Առևտրային առումով հասանելի են նախապես կարգավորված խառնուրդներ, որոնց ավելացվում են միայն նմուշին հատուկ բաղադրիչներ (պրայմեր) և ջուր: Այլընտրանքորեն, գլխավոր խառնուրդը կարող եք պատրաստել ինքներդ: Երկու տարբերակներում էլ խառնուրդը բաշխվում է յուրաքանչյուր ՊՇՌ անոթի մեջ առանց ձևանմուշի, և առանձին ԴՆԹ նմուշը ավելացվում է առանձին վերջում:
Գլխավոր խառնուրդի օգտագործումը մի քանի առավելություն ունի. Նախ, կրճատվում է մեկ պիպետավորման քայլերի քանակը: Այս կերպ նվազագույնի են հասցվում ինչպես օգտագործողի սխալների ռիսկը պիպետավորման ընթացքում, այնպես էլ աղտոտման ռիսկը և, իհարկե, խնայվում է ժամանակ: Սկզբունքորեն, պիպետավորման ճշգրտությունը նույնպես ավելի բարձր է, քանի որ դեղաչափվում են ավելի մեծ ծավալներ: Սա հեշտ է հասկանալ պիպետների տեխնիկական տվյալները ստուգելիս. Որքան փոքր է դեղաչափված ծավալը, այնքան մեծ կարող են լինել շեղումները: Այն փաստը, որ բոլոր պատրաստուկները ստացվում են նույն անոթից, դրական ազդեցություն ունի միատարրության վրա (եթե լավ խառնվեն): Սա նաև բարելավում է փորձերի վերարտադրելիությունը:
Գլխավոր խառնուրդը պատրաստելիս պետք է ավելացնել առնվազն 10% լրացուցիչ ծավալ (օրինակ՝ եթե անհրաժեշտ է 10 պատրաստուկ, հաշվարկեք 11-ի հիման վրա), որպեսզի նույնիսկ վերջին տարան պատշաճ կերպով լցվի։ Այս կերպ կարելի է փոխհատուցել (աննշան) պիպետավորման անճշտությունները և նմուշի կորստի ազդեցությունը լվացող միջոց պարունակող լուծույթների չափաբաժնման ժամանակ։ Լվացքի միջոցները պարունակվում են ֆերմենտային լուծույթներում, ինչպիսիք են պոլիմերազները և գլխավոր խառնուրդները, ինչը հանգեցնում է փրփուրի առաջացման և մնացորդների առաջացման նորմալ ներքին մակերեսին։պիպետի ծայրեր.
Կախված կիրառությունից և ներարկվող հեղուկի տեսակից, պետք է ընտրել ճիշտ պիպետավորման տեխնիկան (1) և համապատասխան սարքավորումները: Լվացող միջոցներ պարունակող լուծույթների համար, որպես օդային բարձիկով պիպետների այլընտրանք, խորհուրդ է տրվում օգտագործել ուղղակի տեղաշարժման համակարգ կամ այսպես կոչված «ցածր պահպանման» պիպետի ծայրեր:ACE PIPETTE ծայրհիմնված է հատկապես հիդրոֆոբ մակերեսի վրա: Լվացող միջոցներ պարունակող հեղուկները ներսից և դրսից չեն թողնում մնացորդային թաղանթ, այնպես որ լուծույթի կորուստը կարող է նվազագույնի հասցվել:
Բացի բոլոր բաղադրիչների ճշգրիտ չափաբաժնից, կարևոր է նաև, որ պատրաստուկները չաղտոտվեն: Բարձր մաքրության սպառվող նյութերի օգտագործումը բավարար չէ, քանի որ օդային բարձիկով պիպետում պիպետի միջոցով կարող են առաջանալ աէրոզոլներ, որոնք մնում են պիպետում: Աէրոզոլում պարունակվող ԴՆԹ-ն կարող է մեկ նմուշից մյուսը փոխանցվել հաջորդ պիպետի միջոցով և այդպիսով հանգեցնել աղտոտման: Վերը նշված ուղղակի տեղահանման համակարգերը նույնպես կարող են նվազագույնի հասցնել այս ռիսկը: Օդային բարձիկով պիպետների համար իմաստ ունի օգտագործել ֆիլտրի ծայրեր՝ պիպետի կոնը պաշտպանելու համար՝ ցայտքերը, աէրոզոլները և կենսամոլեկուլները պահելով:
Հրապարակման ժամանակը. Դեկտեմբերի 06-2022