সফল পরিবর্ধন বিক্রিয়ার জন্য, প্রতিটি প্রস্তুতিতে পৃথক বিক্রিয়া উপাদানগুলি সঠিক ঘনত্বে উপস্থিত থাকা আবশ্যক। এছাড়াও, এটি গুরুত্বপূর্ণ যে কোনও দূষণ না ঘটে।
বিশেষ করে যখন অনেকগুলি বিক্রিয়া সেট-আপ করতে হয়, তখন প্রতিটি পাত্রে প্রতিটি বিকারককে আলাদাভাবে পাইপ করার পরিবর্তে একটি তথাকথিত মাস্টার মিক্স প্রস্তুত করার জন্য এটি প্রতিষ্ঠিত হয়েছে। পূর্ব-কনফিগার করা মিশ্রণগুলি বাণিজ্যিকভাবে পাওয়া যায়, যেখানে শুধুমাত্র নমুনা-নির্দিষ্ট উপাদান (প্রাইমার) এবং জল যোগ করা হয়। বিকল্পভাবে, মাস্টার মিক্সটি নিজে নিজে প্রস্তুত করা যেতে পারে। উভয় রূপেই, মিশ্রণটি প্রতিটি পিসিআর পাত্রে কোনও টেমপ্লেট ছাড়াই বিতরণ করা হয় এবং শেষে পৃথক ডিএনএ নমুনা আলাদাভাবে যোগ করা হয়।
মাস্টার মিক্স ব্যবহারের বেশ কিছু সুবিধা রয়েছে: প্রথমত, একক পাইপটিং ধাপের সংখ্যা হ্রাস পায়। এইভাবে, পাইপটিং করার সময় ব্যবহারকারীর ত্রুটির ঝুঁকি এবং দূষণের ঝুঁকি উভয়ই হ্রাস পায় এবং অবশ্যই, সময় সাশ্রয় হয়। নীতিগতভাবে, পাইপটিং নির্ভুলতাও বেশি হয়, কারণ বৃহত্তর আয়তনে ডোজ করা হয়। পাইপেটের প্রযুক্তিগত তথ্য পরীক্ষা করার সময় এটি বোঝা সহজ: ডোজ করা আয়তন যত কম হবে, বিচ্যুতি তত বেশি হতে পারে। সমস্ত প্রস্তুতি একই পাত্র থেকে আসা একজাতীয়তার উপর ইতিবাচক প্রভাব ফেলে (যদি ভালভাবে মিশ্রিত করা হয়)। এটি পরীক্ষাগুলির পুনরুৎপাদনযোগ্যতাও উন্নত করে।
মাস্টার মিক্স প্রস্তুত করার সময়, কমপক্ষে ১০% অতিরিক্ত আয়তন যোগ করা উচিত (যেমন যদি ১০টি প্রস্তুতির প্রয়োজন হয়, তাহলে ১১ এর ভিত্তিতে গণনা করুন), যাতে শেষ পাত্রটিও সঠিকভাবে ভরা হয়। এইভাবে, (সামান্য) পাইপটিং ত্রুটি এবং ডিটারজেন্ট-ধারণকারী দ্রবণ ডোজ করার সময় নমুনা ক্ষতির প্রভাব পূরণ করা যেতে পারে। ডিটারজেন্টগুলি পলিমারেজ এবং মাস্টার মিক্সের মতো এনজাইম দ্রবণে থাকে, যার ফলে ফেনা তৈরি হয় এবং স্বাভাবিকের অভ্যন্তরীণ পৃষ্ঠে অবশিষ্টাংশ তৈরি হয়।পাইপেট টিপস.
প্রয়োগ এবং তরলের ধরণের উপর নির্ভর করে, সঠিক পাইপেটিং কৌশল (1) নির্বাচন করা উচিত এবং উপযুক্ত সরঞ্জাম নির্বাচন করা উচিত। ডিটারজেন্ট ধারণকারী দ্রবণের জন্য, একটি সরাসরি স্থানচ্যুতি ব্যবস্থা বা এয়ার-কুশন পাইপেটের বিকল্প হিসাবে তথাকথিত "কম ধারণ" পাইপেট টিপস সুপারিশ করা হয়। এর প্রভাবACE PIPETTE টিপবিশেষ করে হাইড্রোফোবিক পৃষ্ঠের উপর ভিত্তি করে তৈরি। ডিটারজেন্টযুক্ত তরল পদার্থ ভিতরে এবং বাইরে কোনও অবশিষ্টাংশের আবরণ ফেলে না, যাতে দ্রবণের ক্ষতি কমানো যায়।
সমস্ত উপাদানের সঠিক মাত্রা নির্ধারণের পাশাপাশি, প্রস্তুতির কোনও দূষণ না হওয়াও গুরুত্বপূর্ণ। উচ্চ বিশুদ্ধতার ভোগ্যপণ্য ব্যবহার করা যথেষ্ট নয়, কারণ একটি এয়ার কুশন পাইপেটে পাইপেটিং প্রক্রিয়া অ্যারোসল তৈরি করতে পারে যা পাইপেটে থেকে যায়। অ্যারোসলে থাকা ডিএনএ পরবর্তী পাইপেটিং ধাপে একটি নমুনা থেকে অন্য নমুনায় স্থানান্তরিত হতে পারে এবং এইভাবে দূষণের দিকে পরিচালিত করে। উপরে উল্লিখিত সরাসরি স্থানচ্যুতি ব্যবস্থাগুলিও এই ঝুঁকি কমাতে পারে। এয়ার-কুশন পাইপেটের জন্য স্প্ল্যাশ, অ্যারোসল এবং জৈব অণু ধরে রেখে পিপেট শঙ্কুকে রক্ষা করার জন্য ফিল্টার টিপস ব্যবহার করা বুদ্ধিমানের কাজ।
পোস্টের সময়: ডিসেম্বর-০৬-২০২২