Introductio
Quid est Acidum nuclei extractionis?
In simplicissimis vocabulis acidum nucleicum extractio RNA et/vel DNA amotio est et omnis excessus qui non est necessarius.Processus extrahendi acida nucleica ab exemplo segregat et reddit ea in modum eluatae contractae, a diluentibus et contaminantium immunis, quae nullis amni applicationibus afficere possunt.
Applicationes nuclei Acidi extractionis
Acida nucleica purificata in plethora diversarum applicationum adhibentur, per varias industrias varias discurrentes.Cura fortassis area in qua maxime adhibetur, purificatis RNA et DNA pro diversarum probationum proposita multitudine requiruntur.
Applicationes acidi nuclei extrahendi in curis curis include:
- De Generatione Sequencing (NGS)
- amplificatio-fundatur SNP Genotyping
- Ordinare-fundatur Genotyping
- Restrictio Enzyme Digestum
- Analyses per modum Enzymes (eg Ligation et Cloning)
Sunt etiam alii campi ultra sollicitudinem ubi acidum nucleicum extrahendum adhibetur, non excepta sed non limitata ad paternitatem probationis, causarum et genomicorum.
Brevis historia nuclei Acidi extractionis
DNA extractionemLongum iter redit, cum prima nota solitudo facta a medico Helvetico nomine Friderico Miescher 1869. Miescher sperabat principia fundamentalia vitae solvere per compositionem chemicam cellularum determinando.Cum lymphocytis defecisset, crudam festinationem DNA e leucocytis invenit in pus demissis fasciis.Hoc fecit, acido addito et alcali ad cellam, ut cytoplasmum cella excederet, et deinde protocollum evolvit ad DNA ab aliis servo separandum.
Post Miescher investigationis humi-fractionis, multae aliae phisicae artes progredi et explicandi sunt ad segregandi et purificandi DNA.Edwin Joseph Cohn, dapibus physicus, multas artes evolvit dapibus purificationis in WW2.Auctor erat serum albumin fractione plasmatis sanguinis segregandi, quod magni momenti est in pressione osmotica in vasis sanguineis conservandis.Hoc crucialus fuit de custodia militum vivorum.
Anno 1953 Franciscus Crick, una cum Rosalind Franklin et James Watson structuram DNA statuerunt, ostendens eam ex duabus filis longis catenis nucleotidis acidi nucleitici constare.Haec inventio interruptio viam patefecit Meselson et Stahl, qui densitatem gradientem protocolli centrifugationis evolvere poterant ab E. Coli bacteria DNA segregandi, sicut demonstraverunt replicationem semi-conservativam DNA durante experimento suo 1958.
Technicae nuclei acidorum extractionis
What are the 4 stages of DNA extraction?
Omnes extrahendi methodi ad eosdem gradus fundamentales coquere.
Cell Disruption.Haec scaena, etiam lysis cellula nota, murum cellae et/vel membranam cellulae involvit, ut liquores intra-cellulares emittunt continentes acida nuclei de faenore.
Remotio Invitis Debris.Haec includit membrana lipidorum, servorum et acidarum nucleicorum inutilerum, quae applicationes amni impedire possunt.
Separatio.Plures diversi modi sunt ut acida nucleica secernant usurae a lysate purgato creatae, quae cadunt inter duo genera principalia: solutionem vel statum solidi fundatum (vide sectionem sequentem).
Coniunctis.Postquam acida nucleica ab omnibus aliis contaminantibus et diluentibus separata sunt, in valde coacto eluate sistuntur.
Duo genera extractionis
Duo genera extractionis acidi nucleici sunt - solutionis methodi fundatae et modi status solidi.Solutio methodi fundatae notus est etiam methodus extrahendi chemica, prout involvit chemicis utens cellam destruendi et materiam nucleicam accedere.Hoc adhiberi potest vel compositis organicis ut phenol et chloroformibus, vel minus noxiis et ideo magis commendatur in mixtis inorganicis ut Proteinase K vel gel silica.
Exempla diversorum methodorum chemicorum extractionis cellam destruendi includendi:
- Ruptura membranae osmoticae
- Concoctio enzymatica muri cellulae
- Solubilisatio membranae
- Cum purgat
- Cum alcali curatio
Artes publicae solidae, etiam methodi mechanicae notae, implicant abutendi quomodo DNA inter se cohaereant cum subiecto solido.Eligendo granam vel moleculum quem DNA ligabit, sed analytus non vult, duo separare potest.Exempla extrahendi artificii solidi phase inter grana silica et magnetica utentes.
Magnetic Bead Extraction Explicata
Magnetic Bead Extrahendi Methodo
Potentia ad extrahendi grana magnetica utens primum agnita est in patentibus US Trevor Hawkins interposita, pro institutione investigandi Institutum Whitehead.Patentes hoc agnoverunt posse materiam geneticam extrahi ligando eas ad ferebat solidam sustentationem, quae posset esse capita magnetica.Principium est, quod uteris globo magnetico admodum officiato, in quem materies genetica adstringet, quae tunc a supernatante separari potest applicando vim magneticam extra vas specimen tenentem.
Quid utere Bead extractionem magneticam?
Magnetica capita extractio technologiae magis magisque invalescit, ob vim quam vim habet processuum extractionem celeris et efficientis.Recentioribus temporibus progressae sunt globuli magnetici magni officiati cum systematibus quiddam congruis, quae automationem nuclei acidi extractionis et laboris possibilis effecit, quae res levis et sumptus efficens admodum est.Item, magnetica capita extractionis methodi centrifugationis gradus non involvunt quae vires tondere possunt, quae partes DNA longiores diducere possunt.Hoc significat longiores fila DNA integra manere, quod in experimentis genomicis interest.
Post tempus: Nov-25-2022