پېژندنه
د نیوکلیک اسید استخراج څه شی دی؟
په خورا ساده اصطلاحاتو کې، د نیوکلیک اسید استخراج د نمونې څخه د RNA او/یا DNA لرې کول او ټول هغه اضافي چې اړین ندي. د استخراج پروسه د نمونې څخه نیوکلیک اسیدونه جلا کوي او دوی د متمرکز ایلیویټ په بڼه تولیدوي، د کمزورو او ککړونکو موادو څخه پاک دي چې کولی شي د جریان هر ډول غوښتنلیکونه اغیزمن کړي.
د نیوکلیک اسید استخراج غوښتنلیکونه
پاک شوي نیوکلیک اسیدونه په ډیری مختلفو صنعتونو کې کارول کیږي. روغتیا پاملرنه شاید هغه ساحه وي چیرې چې دا تر ټولو ډیر کارول کیږي، د پاک شوي RNA او DNA سره د ډیری مختلف ازموینې موخو لپاره اړین دي.
په روغتیا پاملرنې کې د نیوکلیک اسید استخراج کارول په لاندې ډول دي:
- د راتلونکي نسل ترتیب (NGS)
- د امپلیفیکیشن پر بنسټ د SNP جینوټایپ کول
- د صف پر بنسټ جینوټایپ کول
- د انزایمونو هضم محدودول
- د تعدیل کوونکي انزایمونو په کارولو سره تحلیلونه (د بیلګې په توګه لیګیشن او کلونینګ)
د روغتیا پاملرنې هاخوا نورې برخې هم شتون لري چیرې چې د نیوکلیک اسید استخراج کارول کیږي، په شمول د پلارتوب ازموینې، عدلي طب او جینومیک پورې محدود نه دي.
د نیوکلیک اسید استخراج لنډ تاریخ
د ډي این اې استخراجدا ډېر پخوا زمانه لري، چې لومړی پېژندل شوی جلاوالی یې په ۱۸۶۹ کال کې د سویس د ډاکټر فریدریش میشر لخوا ترسره شو. میشر هیله درلوده چې د حجرو د کیمیاوي جوړښت په ټاکلو سره د ژوند اساسي اصول حل کړي. د لیمفوسایټس سره د ناکامۍ وروسته، هغه وکولی شو چې د رد شوي بندونو په پیپ کې موندل شوي د لیوکوسایټونو څخه د DNA خام ذرات ترلاسه کړي. هغه دا کار د حجرو سایټوپلازم څخه د وتلو لپاره حجرو ته اسید او بیا الکلي اضافه کولو سره وکړ، او بیا یې د نورو پروټینونو څخه DNA جلا کولو لپاره یو پروتوکول رامینځته کړ.
د میشر د مهمې څیړنې وروسته، ډیری نورو ساینس پوهانو د DNA جلا کولو او پاکولو لپاره تخنیکونو ته وده ورکړې او پرمختګ یې کړی دی. اډون جوزف کوهن، د پروټین ساینس پوه د دوهمې نړیوالې جګړې په جریان کې د پروټین پاکولو لپاره ډیری تخنیکونه رامینځته کړل. هغه د وینې پلازما د سیرم البومین برخې جلا کولو مسؤلیت درلود، کوم چې د وینې رګونو کې د اوسموټیک فشار ساتلو لپاره مهم دی. دا د سرتیرو د ژوندي ساتلو لپاره خورا مهم و.
په ۱۹۵۳ کال کې فرانسس کریک، د روزالینډ فرانکلین او جیمز واټسن سره یوځای، د DNA جوړښت وټاکه، او وښودله چې دا د نیوکلیک اسید نیوکلیوټایډونو د اوږدو زنځیرونو دوه تارونو څخه جوړ شوی دی. دې پرمختګ موندنه د میسلسن او سټال لپاره لاره هواره کړه، چې وکولی شول د کثافت تدریجي سنټرفیوګیشن پروتوکول رامینځته کړي ترڅو د E. Coli باکتریا څخه DNA جلا کړي ځکه چې دوی د ۱۹۵۸ کال د تجربې په جریان کې د DNA نیمه محافظه کار نقل ښودلی و.
د نیوکلیک اسید استخراج تخنیکونه
د DNA استخراج څلور مرحلې کومې دي؟
د استخراج ټولې طریقې ورته بنسټیزو مرحلو ته رسیږي.
د حجرو ګډوډيدا مرحله، چې د حجرو د تحلیل په نوم هم پیژندل کیږي، د حجرو دیوال او/یا د حجرو غشا ماتول شامل دي، ترڅو د حجرو دننه مایعات خوشې کړي چې د پام وړ نیوکلیک اسیدونه لري.
د ناغوښتل شویو کثافاتو لرې کول. پدې کې د غشا لیپیدونه، پروټینونه او نور ناغوښتل شوي نیوکلیک اسیدونه شامل دي کوم چې کولی شي د جریان په جریان کې مداخله وکړي.
جلا کول. د هغه پاک شوي لایسیټ څخه چې تاسو یې رامینځته کړی د ګټو نیوکلیک اسیدونو جلا کولو لپاره ډیری مختلفې لارې شتون لري، کوم چې د دوو اصلي کټګوریو ترمنځ راځي: د محلول پر بنسټ یا جامد حالت (راتلونکې برخه وګورئ).
غلظت. وروسته له دې چې نیوکلیک اسیدونه د نورو ټولو ککړونکو او کمزورو موادو څخه جلا شي، دوی په ډیر متمرکز ایلیوټ کې وړاندې کیږي.
د استخراج دوه ډولونه
د نیوکلیک اسید استخراج دوه ډوله دي - د محلول پر بنسټ میتودونه او د جامد حالت میتودونه. د محلول پر بنسټ میتود د کیمیاوي استخراج میتود په نوم هم پیژندل کیږي، ځکه چې پدې کې د حجرو ماتولو او نیوکلیک موادو ته د لاسرسي لپاره د کیمیاوي موادو کارول شامل دي. دا کیدی شي یا د عضوي مرکباتو لکه فینول او کلوروفورم کارول وي، یا د لږ زیان رسونکي او له همدې امله ډیر وړاندیز شوي غیر عضوي مرکبات لکه پروټینیز K یا سیلیکا جیل.
د حجرو د ماتولو لپاره د مختلفو کیمیاوي استخراج میتودونو مثالونه په لاندې ډول دي:
- د غشا د اوسموټیک څیریدل
- د حجروي دیوال انزایماتیک هضم
- د غشا محلول کول
- د صابون سره
- د القلي درملنې سره
د جامدو حالت تخنیکونه، چې د میخانیکي میتودونو په نوم هم پیژندل کیږي، د دې څخه ګټه پورته کول شامل دي چې DNA څنګه د جامدو سبسټریټ سره تعامل کوي. د هغه مڼې یا مالیکول په غوره کولو سره چې DNA به ورسره وصل شي مګر تحلیل کونکی به ورسره ونلري، دا ممکنه ده چې دواړه جلا کړئ. د جامدو مرحلې استخراج تخنیکونو مثالونه د سیلیکا او مقناطیسي مڼو کارول شامل دي.
د مقناطیسي مڼو استخراج تشریح شوی
د مقناطیسي مڼو د استخراج طریقه
د مقناطیسي مڼو په کارولو سره د استخراج وړتیا لومړی ځل د وایټ هیډ انسټیټیوټ د څیړنې ادارې لپاره د ټریور هاکنز لخوا ثبت شوي امریکایی پیټینټ کې پیژندل شوې وه. دې پیټینټ ومنله چې دا ممکنه وه چې جینیاتي مواد د یو قوي ملاتړ کونکي سره تړلو سره استخراج شي، کوم چې ممکن مقناطیسي مڼې وي. اصل دا دی چې تاسو یو لوړ فعال مقناطیسي مڼې کاروئ چې جینیاتي مواد به ورسره وصل شي، کوم چې بیا د نمونه لرونکي برتن بهر ته د مقناطیسي ځواک پلي کولو سره د سپرنټینټ څخه جلا کیدی شي.
ولې د مقناطیسي مڼو استخراج وکاروئ؟
د مقناطیسي مڼو د استخراج ټیکنالوژي په زیاتیدونکې توګه عام کیږي، ځکه چې دا د چټکو او اغیزمنو استخراج پروسیجرونو لپاره وړتیا لري. په دې وروستیو کې د مناسب بفر سیسټمونو سره د لوړ فعالیت لرونکي مقناطیسي مڼو پرمختګونه شوي، کوم چې د نیوکلیک اسید استخراج اتومات کول او د کار جریان چې خورا سپک او ارزانه دی ممکن کړی دی. همدارنګه، د مقناطیسي مڼو د استخراج میتودونه د سینټرفیوګیشن مرحلې نه شاملوي چې کولی شي د شین ځواک لامل شي چې د DNA اوږدې ټوټې ماتوي. دا پدې مانا ده چې د DNA اوږدې تارونه روغ پاتې کیږي، کوم چې د جینومیک ازموینې کې مهم دی.
د پوسټ وخت: نومبر-۲۵-۲۰۲۲