Kif Tippipetta Volumi Żgħar b'Pipetti Manwali li Jinġarru fl-Idejn

Hekk kif qed tingħata aktar attenzjoni lit-tnaqqis tar-reaġenti u l-ispejjeż, volumi iżgħar qed ikunu fid-domanda kbira, eż., għall-preparazzjoni ta' PCR Mastermix jew reazzjonijiet enżimatiċi. Iżda l-pipettar ta' volumi żgħar minn 0.2 – 5 µL joħloq sfidi ġodda għall-eżattezza u l-preċiżjoni tal-pipettar. Il-punti li ġejjin huma essenzjali:

1. Daqs tal-pipetta u l-ponta: Dejjem agħżel il-pipetta bl-inqas volum nominali possibbli u l-iżgħar ponta biex iżżomm il-kuxxin tal-arja żgħir kemm jista' jkun. Meta tippetta 1 µL eż., agħżel pipetta ta' 0.25 – 2.5 µL u ponta li taqbel minflok pipetta ta' 1 – 10 µL.
2. Kalibrazzjoni u manutenzjoni: Huwa essenzjali li l-pipetti tiegħek ikunu kalibrati u miżmuma sew. Aġġustamenti żgħar u partijiet imkissra fuq pipetta jwasslu għal żieda massiva fil-valuri ta' żbalji sistematiċi u każwali. Kalibrazzjoni skont l-ISO 8655 għandha titwettaq darba fis-sena.
3. Pipetti ta' spostament pożittiv: Iċċekkja jekk għandekx pipetta ta' spostament pożittiv b'firxa ta' volum baxx fil-laboratorju tiegħek. B'mod ġenerali, l-użu ta' dan it-tip ta' pipetta jwassal għal riżultat aħjar tal-pipettar f'termini ta' preċiżjoni u eżattezza milli bil-pipetti klassiċi b'kuxxin tal-arja.
4. Ipprova uża volumi akbar: Tista' tikkunsidra li tiddilwixxi l-kampjun tiegħek biex tippetta volumi akbar bl-istess kwantità fir-reazzjoni finali. Dan jista' jnaqqas l-iżbalji tal-pipettar b'volumi żgħar ħafna tal-kampjun.

Minbarra għodda tajba, ir-riċerkatur irid ikollu teknika tajba ħafna tal-pipettar. Oqgħod attent b'mod speċjali għall-passi li ġejjin:

1. Twaħħil tal-ponta: Twaħħalx il-pipetta mal-ponta għax dan jista' jagħmel ħsara lit-tarf fin tal-ponta u jikkawża li r-raġġ tal-likwidu jiġi ridirett jew jagħmel ħsara lill-orifiċju. Applika biss pressjoni ħafifa meta twaħħal ponta u uża pipetta b'kon tal-ponta mgħobbi b'molla.
2. Żamma tal-pipetta: Tżommx il-pipetta f'idejk waqt li tistenna ċ-ċentrifuga, iċ-ċiklatur, eċċ. Il-parti ta' ġewwa tal-pipetta se tisħon u twassal biex il-kuxxin tal-arja jespandi u dan jirriżulta f'devjazzjonijiet mill-volum issettjat meta tippipetta.
3. Tixrib minn qabel: L-umidifikazzjoni tal-arja ġewwa l-ponta u l-pipetta tipprepara l-ponta għall-kampjun u tevita l-evaporazzjoni meta jiġi aspirat il-volum tat-trasferiment.
4. Aspirazzjoni vertikali: Dan huwa importanti ħafna meta timmaniġġja volumi żgħar biex tevita l-effett kapillari li jseħħ meta l-pipetta tinżamm f'angolu.
5. Fond ta' immersjoni: Għaddas il-ponta kemm jista' jkun ftit biex tevita li l-likwidu jidħol fil-ponta minħabba l-effett kapillari. Regola ġenerali: Iktar ma tkun żgħira l-ponta u l-volum, inqas ikun il-fond ta' immersjoni. Nirrakkomandaw massimu ta' 2 mm meta tippipetta volumi żgħar.
6. Tqassam f'angolu ta' 45°: Il-ħruġ ottimali tal-likwidu huwa garantit meta l-pipetta tinżamm f'angolu ta' 45°.
7. Kuntatt mal-ħajt tal-kontenitur jew mal-wiċċ tal-likwidu: Volumi żgħar jistgħu jiġu dispensati kif suppost biss meta l-ponta tinżamm mal-ħajt tal-kontenitur, jew mgħaddsa fil-likwidu. Anke l-aħħar qatra mill-ponta tista' tiġi dispensata b'mod preċiż.
8. Blow-out: Blow-out huwa obbligatorju wara li jitqassmu volumi baxxi biex titqassam anke l-aħħar qatra ta' likwidu preżenti fil-ponta. Il-blow-out għandu jsir ukoll kontra l-ħajt tal-kontenitur. Oqgħod attent li ma ddaħħalx bżieżaq tal-arja fil-kampjun meta twettaq blow-out fuq il-wiċċ tal-likwidu.