Ҳангоми аз 0,2 то 5 мкл пошидани питатсия, дақиқӣ ва дақиқии пиптинг муҳим аст, техникаи хуби пиптинг муҳим аст, зеро хатогиҳои коркард бо ҳаҷми хурд равшантаранд.
Азбаски таваҷҷӯҳи бештар ба кам кардани реагентҳо ва хароҷот равона карда мешавад, ҳаҷми хурдтар талабот зиёд аст, масалан, барои тайёр кардани PCR Mastermix ё реаксияҳои фермент.Аммо трубакашӣ кардани ҳаҷми хурд аз 0,2 – 5 мкл барои дақиқӣ ва дақиқии пиптинг мушкилоти нав мегузорад.Нуқтаҳои зерин муҳиманд:
- Андозаи пипетка ва нӯги: Ҳамеша пипеткаро бо ҳаҷми камтарин номиналии имконпазир ва нӯги хурдтарин интихоб кунед, то болишти ҳаво то ҳадди имкон хурд бошад.Ҳангоми пипеткаи 1 мкл, масалан, пипеткаи 0,25 – 2,5 мкл ва нӯги мувофиқро интихоб кунед, на пипетаи 1 – 10 мкл.
- Калибрченкунӣ ва нигоҳдорӣ: Муҳим аст, ки пипеткаҳои шумо дуруст калибр карда ва нигоҳ дошта шаванд.Тасҳеҳи хурд ва қисмҳои шикаста дар пипетка боиси афзоиши назарраси арзишҳои хатогиҳои систематикӣ ва тасодуфӣ мегардад.Калибрченкунӣ тибқи стандарти ISO 8655 бояд дар як сол як маротиба гузаронида шавад.
- Пипеткаҳои мусбати ҷойгузинӣ: Санҷед, ки дар лабораторияи шумо пипеткаи мусбати ҷобаҷокунанда бо диапазони пасти ҳаҷм дошта бошед.Умуман, истифодаи ин навъи пипеткаҳо ба натиҷаи беҳтари пипеткаҳо аз нуқтаи назари дақиқ ва дақиқ нисбат ба пипеткаҳои классикии ҳавоӣ оварда мерасонад.
- Кӯшиш кунед, ки ҳаҷмҳои калонтарро истифода баред: Шумо метавонед фикр кунед, ки намунаи худро дар реаксияи ниҳоӣ бо пипетка ҳаҷми калонтар бо ҳамон миқдор ҳал кунед.Ин метавонад хатогиҳои пиптингро бо ҳаҷми хеле хурди намуна кам кунад.
Ба гайр аз асбоби хуб, тадкикотчй бояд техникаи хеле хуби пипетинг дошта бошад.Ба қадамҳои зерин диққати махсус диҳед:
- Замимаи нӯги: Пипеткаро ба нӯг нагузоред, зеро ин метавонад ба нӯги ҷарима осеб расонад, ки нури моеъро аз нав равона кунад ё сӯрохиро вайрон кунад.Ҳангоми васл кардани нӯг танҳо фишори сабукро истифода баред ва пипеткаи конуси нӯги пружинаро истифода баред.
- Нигоҳ доштани пипетка: Ҳангоми интизории центрифуга, циклер ва ғ. пипеткаро дар дасти худ нигоҳ надоред. Даруни пипетка гарм мешавад ва болишти ҳаворо васеъ мекунад, ки дар натиҷа ҳангоми пипетка аз ҳаҷми муқарраршуда дурӣ мекашад.
- Пеш аз тар кардан: Нам кардани ҳаво дар дохили нӯг ва пипетка нӯгро барои намуна омода мекунад ва ҳангоми аспиратсияи ҳаҷми интиқол аз бухоршавӣ пешгирӣ мекунад.
- Аспиратсияи амудӣ: Ин ҳангоми коркарди ҳаҷми хурд хеле муҳим аст, то аз таъсири капиллярӣ, ки ҳангоми дар кунҷ нигоҳ доштани пипетка рух медиҳад, пешгирӣ карда шавад.
- Чуқурии таъмид: Нӯгро то ҳадди имкон камтар ғӯтонед, то аз сабаби таъсири капиллярӣ моеъ ба нӯг ворид нашавад.Қоидаи асосӣ: Чӣ қадаре ки нӯг ва ҳаҷм хурдтар бошад, умқи обкашӣ ҳамон қадар камтар аст.Мо тавсия медиҳем, ки ҳадди аксар 2 мм ҳангоми найча кардани ҳаҷми хурд.
- Дохилшавӣ дар кунҷи 45°: Маҷрои оптималии моеъ ҳангоми нигоҳ доштани пипетка дар кунҷи 45° кафолат дода мешавад.
- Тамос бо девори зарф ё сатҳи моеъ: Ҳаҷми хурдро танҳо вақте дуруст тақсим кардан мумкин аст, вақте ки нӯг ба девори зарф нигоҳ дошта мешавад ё ба моеъ ғарқ карда мешавад.Ҳатто қатраи охирини нӯги онро дақиқ тақсим кардан мумкин аст.
- Таркиш: Пардохт пас аз пошидани ҳаҷми кам ҳатмист, то ҳатто қатраи охирини моеъи дар нӯг мавҷудбуда пошида шавад.Таркиш инчунин бояд бар зидди девори зарф анҷом дода шавад.Эҳтиёт бошед, ки ҳангоми таркиш дар сатҳи моеъ футурҳои ҳаворо ба намуна наоред.
Вақти фиристодан: 18 феврали 2021