Kiel Pipeti Malgrandajn Volumojn per Manaj Manaj Pipetoj

Ĉar pli da fokuso estas metita sur reduktado de reakciiloj kaj kostoj, pli malgrandaj volumoj estas en alta postulo, ekz, por la preparado de PCR Mastermix aŭ enzimreagoj.Sed pipetado de malgrandaj volumoj de 0,2 - 5 µL starigas novajn defiojn por pipetado de precizeco kaj precizeco.La sekvaj punktoj estas esencaj:

1. Grandeco de pipeto kaj pinto: Ĉiam elektu la pipeton kun la plej malalta nominala volumo ebla kaj la plej malgranda pinto por konservi la aerkusenon kiel eble plej malgranda.Pipetante 1 µL ekz. elektu 0,25 – 2,5 µL pipeton kaj kongruan pinton prefere ol 1 – 10 µL pipeton.
2. Kalibrado kaj prizorgado: Estas esence, ke viaj pipetoj estas taŭge kalibritaj kaj prizorgataj.Malgrandaj alĝustigoj kaj rompitaj partoj sur pipeto kondukas al amasa pliiĝo de sistemaj kaj hazardaj erarvaloroj.Kalibrado laŭ ISO 8655 devas esti farita unufoje jare.
3. Pozitivaj movopipetoj: Kontrolu ĉu vi havas pozitivan movopipeton kun malalta volumo en via laboratorio.Ĝenerale, uzi ĉi tiun tipon de pipeto kondukas al pli bona pipeta rezulto laŭ precizeco kaj precizeco ol kun klasikaj aerkusenaj pipetoj.
4. Provu uzi pli grandajn volumojn: Vi povas konsideri dilui vian specimenon por pipeti pli grandajn volumojn kun la sama kvanto en la fina reago.Tio povas redukti pipeterarojn kun tre malgrandaj provaĵvolumoj.

Krom bona ilo, la esploristo devas havi tre bonan pipetteknikon.Atentu speciale la sekvajn paŝojn:

1. Konsilfiksaĵo: Ne bloku la pipeton sur la pinton, ĉar ĉi tio povas damaĝi la fajnan pinton, kaŭzi la likvan trabon esti redirektita aŭ damaĝi la orificion.Nur apliku malpezan premon dum alkroĉado de pinto kaj uzu pipeton kun risorta pintokonuso.
2. Tenante la pipeton: Ne tenu la pipeton en via mano atendante la centrifugilon, cikloron, ktp. La interno de la pipeto varmiĝos kaj kondukos la aerkusenon pligrandigi rezultigante deviojn de la fiksita volumo dum pipetado.
3. Antaŭ-malsekigado: La humidigado de la aero ene de la pinto kaj pipeto preparas la pinton por la specimeno kaj evitas vaporiĝon dum aspirado de la transiga volumeno.
4. Vertikala aspiro: Ĉi tio estas tre grava dum manipulado de malgrandaj volumoj por eviti la kapilaran efikon kiu okazas kiam la pipeto estas tenita laŭ angulo.
5. Merga profundo: Mergu la pinton kiel eble plej malmulte por malhelpi likvaĵon eniri la pinton pro la kapilara efiko.Fingra regulo: Ju pli malgrandaj estas la pinto kaj volumeno, des pli malalta estas la merga profundo.Ni rekomendas maksimume 2 mm dum pipetado de malgrandaj volumoj.
6. Dispensado laŭ angulo de 45°: Optimuma elfluo de la likvaĵo estas garantiita kiam la pipeto estas tenita laŭ angulo de 45°.
7. Kontakto al ŝipomuro aŭ likva surfaco: Malgrandaj volumoj povas nur esti konvene disdonitaj kiam la pinto estas tenita kontraŭ la ŝipmuro, aŭ mergita en likvaĵon.Eĉ la lasta guto de la pinto povas esti elsendita precize.
8. Eksplodo: Eksplodo estas deviga post disdonado de malaltaj volumoj por disdoni eĉ la lastan guton de likvaĵo ĉeestanta en la pinto.La eksplodo ankaŭ devas esti farita kontraŭ la vazmuro.Atentu ne enporti aervezikojn en la specimenon dum elfarado de eksplodo ĉe la likva surfaco.