०.२ देखि ५ µL सम्मको भोल्युममा पाइपेट गर्दा, पाइपेटिङ शुद्धता र शुद्धता अत्यन्त महत्त्वपूर्ण हुन्छ। राम्रो पाइपेटिङ प्रविधि आवश्यक छ किनभने सानो भोल्युममा ह्यान्डलिंग गल्तीहरू बढी स्पष्ट हुन्छन्।
अभिकर्मक र लागत घटाउनमा बढी ध्यान केन्द्रित गरिँदै गर्दा, सानो मात्राको माग उच्च छ, उदाहरणका लागि, PCR मास्टरमिक्स वा इन्जाइम प्रतिक्रियाहरूको तयारीको लागि। तर ०.२ - ५ µL बाट सानो मात्रामा पाइपेटिङ गर्दा पाइपेटिङ शुद्धता र परिशुद्धताको लागि नयाँ चुनौतीहरू खडा हुन्छन्। निम्न बुँदाहरू आवश्यक छन्:
- पिपेट र टिपको आकार: हावा कुशनलाई सकेसम्म सानो राख्नको लागि सधैं सबैभन्दा कम नाममात्र भोल्युम भएको र सबैभन्दा सानो टिप भएको पिपेट छनौट गर्नुहोस्। १ µL पिपेट गर्दा, १ - १० µL पिपेटको सट्टा ०.२५ - २.५ µL पिपेट र मिल्दो टिप छनौट गर्नुहोस्।
- क्यालिब्रेसन र मर्मतसम्भार: तपाईंको पिपेटहरू राम्ररी क्यालिब्रेट र मर्मत गरिएको हुनु आवश्यक छ। पिपेटमा भएका साना समायोजन र भाँचिएका भागहरूले व्यवस्थित र अनियमित त्रुटि मानहरूमा ठूलो वृद्धि निम्त्याउँछ। ISO 8655 अनुसार क्यालिब्रेसन वर्षमा एक पटक गर्नुपर्छ।
- सकारात्मक विस्थापन पिपेट्स: तपाईंको प्रयोगशालामा कम भोल्युम दायरा भएको सकारात्मक विस्थापन पिपेट्स छ कि छैन जाँच गर्नुहोस्। सामान्यतया, यस प्रकारको पिपेट्स प्रयोग गर्नाले क्लासिक एयर-कुशन पिपेट्स भन्दा शुद्धता र परिशुद्धताको हिसाबले राम्रो पाइपेटिंग परिणाम प्राप्त हुन्छ।
- ठूलो मात्रामा प्रयोग गर्ने प्रयास गर्नुहोस्: तपाईंले अन्तिम प्रतिक्रियामा उही मात्रामा ठूलो मात्रामा पिपेट गर्न आफ्नो नमूनालाई पातलो पार्ने विचार गर्न सक्नुहुन्छ। यसले धेरै सानो नमूना भोल्युममा पाइपेटिङ त्रुटिहरू कम गर्न सक्छ।
राम्रो उपकरणको अतिरिक्त, अनुसन्धानकर्तासँग धेरै राम्रो पाइपेटिङ प्रविधि हुनुपर्छ। निम्न चरणहरूमा विशेष ध्यान दिनुहोस्:
- टिप एट्याचमेन्ट: पिपेटलाई टिपमा जाम नगर्नुहोस् किनकि यसले मसिनो टिपको छेउलाई क्षति पुर्याउन सक्छ जसले गर्दा तरल बीम रिडिरेक्ट हुन सक्छ वा छिद्रलाई क्षति पुर्याउन सक्छ। टिप जोड्दा हल्का दबाब मात्र दिनुहोस् र स्प्रिङ-लोड गरिएको टिप कोन भएको पिपेट प्रयोग गर्नुहोस्।
- पिपेट समात्नु: सेन्ट्रीफ्यूज, साइकलर, आदिको प्रतीक्षा गर्दा पिपेटलाई आफ्नो हातमा नराख्नुहोस्। पिपेटको भित्री भाग तातो हुनेछ र हावाको कुशनलाई विस्तार गर्न नेतृत्व गर्नेछ जसले गर्दा पिपेट गर्दा सेट भोल्युमबाट विचलन हुनेछ।
- भिजाउनु अघि: टिप र पिपेट भित्रको हावाको आर्द्रीकरणले टिपलाई नमूनाको लागि तयार पार्छ र स्थानान्तरण भोल्युमलाई एस्पिरेट गर्दा वाष्पीकरण हुनबाट जोगाउँछ।
- ठाडो आकांक्षा: पिपेटलाई कोणमा राख्दा हुने केशिका प्रभावबाट बच्नको लागि सानो मात्रा ह्यान्डल गर्दा यो धेरै महत्त्वपूर्ण छ।
- डुबाउने गहिराइ: केशिका प्रभावको कारणले गर्दा टुप्पोमा तरल पदार्थ प्रवेश गर्नबाट रोक्नको लागि टुप्पोलाई सकेसम्म कम डुबाउनुहोस्। नियम: टुप्पो र आयतन जति सानो हुन्छ, डुबाउने गहिराइ त्यति नै कम हुन्छ। सानो मात्रामा पाइप गर्दा हामी अधिकतम २ मिमी सिफारिस गर्छौं।
- ४५° कोणमा वितरण: पिपेटलाई ४५° कोणमा राख्दा तरल पदार्थको इष्टतम प्रवाह-आउटको ग्यारेन्टी गरिन्छ।
- भाँडाको भित्ता वा तरल सतहसँग सम्पर्क: सानो मात्रा तब मात्र ठीकसँग बाहिर निकाल्न सकिन्छ जब टुप्पोलाई भाँडाको भित्तामा राखिन्छ, वा तरल पदार्थमा डुबाइन्छ। टुप्पोबाट अन्तिम थोपा पनि सही रूपमा बाहिर निकाल्न सकिन्छ।
- ब्लो-आउट: टिपमा रहेको तरल पदार्थको अन्तिम थोपा पनि फैलाउन कम मात्रामा वितरण गरेपछि ब्लो-आउट अनिवार्य छ। ब्लो-आउट भाँडाको भित्तामा पनि गर्नुपर्छ। तरल सतहमा ब्लो-आउट गर्दा नमूनामा हावाका बुलबुले नआओस् भन्ने कुरामा ध्यान दिनुहोस्।
पोस्ट समय: फेब्रुअरी-१८-२०२१