हाताने हाताळलेल्या हाताने बनवलेल्या पिपेट्सने लहान आकारमानाचे पिपेट्स कसे काढायचे

अभिकर्मक आणि खर्च कमी करण्यावर अधिक लक्ष केंद्रित केले जात असल्याने, लहान आकारमानांना जास्त मागणी आहे, उदा. पीसीआर मास्टरमिक्स किंवा एन्झाइम अभिक्रिया तयार करण्यासाठी. परंतु ०.२ - ५ µL पासून लहान आकारमानाचे पाईपेटिंग केल्याने पाईपेटिंगची अचूकता आणि अचूकतेसाठी नवीन आव्हाने निर्माण होतात. खालील मुद्दे आवश्यक आहेत:

1. पिपेट आणि टिप आकार: नेहमी शक्य तितक्या कमीत कमी नाममात्र आकारमानाचा आणि एअर कुशन शक्य तितक्या लहान ठेवण्यासाठी सर्वात लहान टिप असलेला पिपेट निवडा. उदाहरणार्थ, १ µL पाईपेट करताना, १ - १० µL पाईपेटऐवजी ०.२५ - २.५ µL पाईपेट आणि जुळणारा टिप निवडा.
2. कॅलिब्रेशन आणि देखभाल: तुमचे पिपेट्स योग्यरित्या कॅलिब्रेट केलेले आणि देखभाल केलेले असणे आवश्यक आहे. पिपेट्सवरील लहान समायोजने आणि तुटलेले भाग यामुळे पद्धतशीर आणि यादृच्छिक त्रुटी मूल्यांमध्ये मोठी वाढ होते. ISO 8655 नुसार कॅलिब्रेशन वर्षातून एकदा केले पाहिजे.
3. पॉझिटिव्ह डिस्प्लेसमेंट पिपेट्स: तुमच्या प्रयोगशाळेत कमी व्हॉल्यूम रेंज असलेले पॉझिटिव्ह डिस्प्लेसमेंट पिपेट्स आहेत का ते तपासा. सर्वसाधारणपणे, या प्रकारच्या पिपेट्स वापरल्याने क्लासिक एअर-कुशन पिपेट्सपेक्षा अचूकता आणि अचूकतेच्या बाबतीत चांगले पाईपेटिंग परिणाम मिळतात.
4. मोठ्या आकारमानाचा वापर करण्याचा प्रयत्न करा: अंतिम अभिक्रियेत तुम्ही तुमच्या नमुन्याला पातळ करून त्याच प्रमाणात मोठ्या आकारमानाचे पिपेट बनवण्याचा विचार करू शकता. यामुळे खूप कमी आकारमानाच्या नमुन्यात पिपेट करण्याच्या चुका कमी होऊ शकतात.

एका चांगल्या साधनाव्यतिरिक्त, संशोधकाकडे खूप चांगले पाईपेटिंग तंत्र असणे आवश्यक आहे. खालील चरणांकडे विशेष लक्ष द्या:

1. टिप जोडणी: टिपवर पिपेट अडकवू नका कारण यामुळे टिपच्या बारीक टोकाला नुकसान होऊ शकते ज्यामुळे द्रव बीम पुनर्निर्देशित होऊ शकतो किंवा छिद्राला नुकसान होऊ शकते. टिप जोडताना फक्त हलका दाब द्या आणि स्प्रिंग-लोडेड टिप कोन असलेला पिपेट वापरा.
2. पिपेट धरून ठेवणे: सेंट्रीफ्यूज, सायकलर इत्यादींची वाट पाहत असताना पिपेट हातात धरू नका. पिपेटचा आतील भाग गरम होईल आणि हवेच्या कुशनला विस्तारित करेल ज्यामुळे पिपेट करताना सेट व्हॉल्यूमपेक्षा विचलन होईल.
3. पूर्व-ओले करणे: टिप आणि पिपेटमधील हवेचे आर्द्रीकरण नमुना घेण्यासाठी टिप तयार करते आणि ट्रान्सफर व्हॉल्यूम एस्पिरेशन करताना बाष्पीभवन टाळते.
4. उभ्या आकांक्षा: लहान आकारमान हाताळताना हे खूप महत्वाचे आहे जेणेकरून पिपेट एका कोनात धरल्यावर होणारा केशिका परिणाम टाळता येईल.
5. विसर्जन खोली: केशिका परिणामामुळे द्रव टोकात जाऊ नये म्हणून टोक शक्य तितके कमी बुडवा. नियम: टोक आणि आकारमान जितके लहान असेल तितकी विसर्जन खोली कमी असेल. लहान आकारमानात पाईप टाकताना आम्ही जास्तीत जास्त २ मिमीची शिफारस करतो.
6. ४५° कोनात वितरित करणे: जेव्हा विंदुक ४५° कोनात धरला जातो तेव्हा द्रवाचा इष्टतम प्रवाह-बाहेर पडण्याची हमी दिली जाते.
7. पात्राच्या भिंतीशी किंवा द्रव पृष्ठभागाशी संपर्क: जेव्हा टोकाला पात्राच्या भिंतीशी धरले जाते किंवा द्रवात बुडवले जाते तेव्हाच लहान आकारमान योग्यरित्या वितरित केले जाऊ शकते. टोकाचा शेवटचा थेंब देखील अचूकपणे वितरित केला जाऊ शकतो.
8. ब्लो-आउट: कमी प्रमाणात द्रव टाकल्यानंतर ब्लो-आउट करणे अनिवार्य आहे जेणेकरून टोकामध्ये असलेल्या द्रवाचा शेवटचा थेंबही बाहेर पडेल. ब्लो-आउट भांड्याच्या भिंतीवर देखील केले पाहिजे. द्रव पृष्ठभागावर ब्लो-आउट करताना नमुन्यात हवेचे फुगे येणार नाहीत याची काळजी घ्या.