ഹാൻഡ്‌ഹെൽഡ് മാനുവൽ പൈപ്പറ്റുകൾ ഉപയോഗിച്ച് ചെറിയ വോള്യങ്ങൾ എങ്ങനെ പൈപ്പറ്റ് ചെയ്യാം

റീഏജന്റുകളും ചെലവുകളും കുറയ്ക്കുന്നതിൽ കൂടുതൽ ശ്രദ്ധ കേന്ദ്രീകരിക്കുന്നതിനാൽ, ചെറിയ വോള്യങ്ങൾക്ക് ഉയർന്ന ഡിമാൻഡ് ഉണ്ട്, ഉദാഹരണത്തിന്, പിസിആർ മാസ്റ്റർമിക്സ് അല്ലെങ്കിൽ എൻസൈം പ്രതിപ്രവർത്തനങ്ങൾ തയ്യാറാക്കുന്നതിന്. എന്നാൽ 0.2 മുതൽ 5 µL വരെ ചെറിയ വോള്യങ്ങളിൽ പൈപ്പ് ചെയ്യുന്നത് പൈപ്പ് ചെയ്യൽ കൃത്യതയ്ക്കും കൃത്യതയ്ക്കും പുതിയ വെല്ലുവിളികൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നു. ഇനിപ്പറയുന്ന പോയിന്റുകൾ അത്യാവശ്യമാണ്:

1. പൈപ്പറ്റും ടിപ്പ് വലുപ്പവും: എയർ കുഷ്യൻ കഴിയുന്നത്ര ചെറുതായി നിലനിർത്താൻ എല്ലായ്പ്പോഴും സാധ്യമായ ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ നാമമാത്രമായ വോളിയവും ഏറ്റവും ചെറിയ ടിപ്പും ഉള്ള പൈപ്പറ്റ് തിരഞ്ഞെടുക്കുക. 1 µL പൈപ്പറ്റ് ചെയ്യുമ്പോൾ, ഉദാഹരണത്തിന്, 1 – 10 µL പൈപ്പറ്റിന് പകരം 0.25 – 2.5 µL പൈപ്പറ്റും പൊരുത്തപ്പെടുന്ന ടിപ്പും തിരഞ്ഞെടുക്കുക.
2. കാലിബ്രേഷനും അറ്റകുറ്റപ്പണിയും: നിങ്ങളുടെ പൈപ്പറ്റുകൾ ശരിയായി കാലിബ്രേറ്റ് ചെയ്യുകയും പരിപാലിക്കുകയും ചെയ്യേണ്ടത് അത്യാവശ്യമാണ്. പൈപ്പറ്റിലെ ചെറിയ ക്രമീകരണങ്ങളും തകർന്ന ഭാഗങ്ങളും സിസ്റ്റമാറ്റിക്, റാൻഡം പിശക് മൂല്യങ്ങളിൽ വൻ വർദ്ധനവിന് കാരണമാകുന്നു. ISO 8655 പ്രകാരമുള്ള ഒരു കാലിബ്രേഷൻ വർഷത്തിലൊരിക്കൽ നടത്തണം.
3. പോസിറ്റീവ് ഡിസ്‌പ്ലേസ്‌മെന്റ് പൈപ്പറ്റുകൾ: നിങ്ങളുടെ ലാബിൽ കുറഞ്ഞ വോളിയം ശ്രേണിയുള്ള ഒരു പോസിറ്റീവ് ഡിസ്‌പ്ലേസ്‌മെന്റ് പൈപ്പറ്റ് ഉണ്ടോയെന്ന് പരിശോധിക്കുക. പൊതുവേ, ഇത്തരത്തിലുള്ള പൈപ്പറ്റ് ഉപയോഗിക്കുന്നത് ക്ലാസിക് എയർ-കുഷൻ പൈപ്പറ്റുകളെ അപേക്ഷിച്ച് കൃത്യതയിലും കൃത്യതയിലും മികച്ച പൈപ്പറ്റിംഗ് ഫലത്തിലേക്ക് നയിക്കുന്നു.
4. വലിയ വ്യാപ്തം ഉപയോഗിക്കാൻ ശ്രമിക്കുക: അന്തിമ പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിൽ അതേ അളവിൽ വലിയ വ്യാപ്തം പൈപ്പറ്റ് ചെയ്യുന്ന തരത്തിൽ സാമ്പിൾ നേർപ്പിക്കുന്നത് നിങ്ങൾക്ക് പരിഗണിക്കാവുന്നതാണ്. വളരെ ചെറിയ സാമ്പിൾ വ്യാപ്തങ്ങളിൽ പൈപ്പറ്റിംഗ് പിശകുകൾ കുറയ്ക്കാൻ ഇത് സഹായിക്കും.

നല്ല ഒരു ഉപകരണത്തിന് പുറമേ, ഗവേഷകന് വളരെ നല്ല ഒരു പൈപ്പറ്റിംഗ് സാങ്കേതികതയും ഉണ്ടായിരിക്കണം. ഇനിപ്പറയുന്ന ഘട്ടങ്ങളിൽ പ്രത്യേക ശ്രദ്ധ നൽകുക:

1. ടിപ്പ് അറ്റാച്ച്മെന്റ്: പൈപ്പറ്റ് അഗ്രത്തിൽ ഒട്ടിക്കരുത്, കാരണം ഇത് സൂക്ഷ്മമായ ടിപ്പ് അറ്റത്തിന് കേടുപാടുകൾ വരുത്തുകയും ദ്രാവക ബീം വഴിതിരിച്ചുവിടുകയോ ദ്വാരത്തിന് കേടുപാടുകൾ വരുത്തുകയോ ചെയ്തേക്കാം. ഒരു ടിപ്പ് ഘടിപ്പിക്കുമ്പോൾ നേരിയ മർദ്ദം മാത്രം പ്രയോഗിക്കുക, സ്പ്രിംഗ്-ലോഡഡ് ടിപ്പ് കോൺ ഉള്ള ഒരു പൈപ്പറ്റ് ഉപയോഗിക്കുക.
2. പൈപ്പറ്റ് പിടിക്കുക: സെൻട്രിഫ്യൂജ്, സൈക്ലർ മുതലായവ കാത്തിരിക്കുമ്പോൾ പൈപ്പറ്റ് നിങ്ങളുടെ കൈയിൽ പിടിക്കരുത്. പൈപ്പറ്റിന്റെ ഉൾഭാഗം ചൂടാകുകയും എയർ കുഷ്യൻ വികസിക്കാൻ കാരണമാവുകയും പൈപ്പറ്റ് ചെയ്യുമ്പോൾ സെറ്റ് വോള്യത്തിൽ നിന്ന് വ്യതിയാനങ്ങൾ സംഭവിക്കുകയും ചെയ്യും.
3. നനയ്ക്കുന്നതിന് മുമ്പ്: ടിപ്പിനും പൈപ്പറ്റിനും ഉള്ളിലെ വായുവിന്റെ ഈർപ്പം സാമ്പിളിനായി ടിപ്പ് തയ്യാറാക്കുകയും ട്രാൻസ്ഫർ വോളിയം ആസ്പിറേറ്റ് ചെയ്യുമ്പോൾ ബാഷ്പീകരണം ഒഴിവാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.
4. ലംബ ആസ്പിറേഷൻ: പൈപ്പറ്റ് ഒരു കോണിൽ പിടിക്കുമ്പോൾ ഉണ്ടാകുന്ന കാപ്പിലറി പ്രഭാവം ഒഴിവാക്കാൻ ചെറിയ അളവുകൾ കൈകാര്യം ചെയ്യുമ്പോൾ ഇത് വളരെ പ്രധാനമാണ്.
5. ഇമ്മേഴ്‌ഷൻ ഡെപ്ത്: കാപ്പിലറി ഇഫക്റ്റ് കാരണം അഗ്രത്തിലേക്ക് ദ്രാവകം പ്രവേശിക്കുന്നത് തടയാൻ അഗ്രം കഴിയുന്നത്ര കുറച്ച് മുക്കുക. പ്രധാന നിയമം: അഗ്രവും വ്യാപ്തവും ചെറുതാകുമ്പോൾ, ഇമ്മേഴ്‌ഷൻ ഡെപ്ത് കുറയും. ചെറിയ അളവിൽ പൈപ്പ് ചെയ്യുമ്പോൾ പരമാവധി 2 മില്ലീമീറ്റർ വരെ ഞങ്ങൾ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.
6. 45° കോണിൽ ഡിസ്പെൻസിംഗ്: പൈപ്പറ്റ് 45° കോണിൽ പിടിക്കുമ്പോൾ ദ്രാവകത്തിന്റെ ഒപ്റ്റിമൽ ഒഴുക്ക് ഉറപ്പുനൽകുന്നു.
7. പാത്രത്തിന്റെ ഭിത്തിയിലോ ദ്രാവക പ്രതലത്തിലോ ഉള്ള സമ്പർക്കം: അഗ്രഭാഗം പാത്രത്തിന്റെ ഭിത്തിയിൽ പിടിച്ചിരിക്കുമ്പോഴോ ദ്രാവകത്തിൽ മുക്കിവയ്ക്കുമ്പോഴോ മാത്രമേ ചെറിയ അളവിൽ വെള്ളം ശരിയായി പുറത്തേക്ക് വിടാൻ കഴിയൂ. അഗ്രഭാഗത്ത് നിന്നുള്ള അവസാന തുള്ളി പോലും കൃത്യമായി പുറത്തേക്ക് വിടാൻ കഴിയും.
8. ബ്ലോ-ഔട്ട്: അഗ്രഭാഗത്തുള്ള ദ്രാവകത്തിന്റെ അവസാന തുള്ളി പോലും കുറഞ്ഞ അളവിൽ വിതരണം ചെയ്തതിനുശേഷം ഒരു ബ്ലോ-ഔട്ട് നിർബന്ധമാണ്. പാത്രത്തിന്റെ ഭിത്തിയിലും ബ്ലോ-ഔട്ട് നടത്തണം. ദ്രാവക പ്രതലത്തിൽ ബ്ലോ-ഔട്ട് നടത്തുമ്പോൾ സാമ്പിളിലേക്ക് വായു കുമിളകൾ വരാതിരിക്കാൻ ശ്രദ്ധിക്കുക.