Cum volumina ab 0.2 ad 5 µL pipetuntur, accuratio et praecisio pipettionis maximi momenti sunt; bona ars pipettionis necessaria est, quia errores tractandi cum parvis voluminibus manifestiores fiunt.
Cum maior cura in minuendis reagentibus et sumptibus ponatur, minores volumina magno in usu sunt, exempli gratia, ad praeparationem PCR Mastermix vel reactionum enzymaticarum. Sed pipetatio parvorum voluminum ab 0.2 ad 5 µL novas difficultates ad accuratam et praecisionem pipetationis ponit. Haec puncta necessaria sunt:
- Magnitudo pipettae et apex: Semper elige pipettam cum minimo volumine nominali et apice minimo ut pulvinar aereum quam minimum maneat. Cum pipettam 1 µL, exempli gratia, pipettam 0.25 – 2.5 µL et apice congruentem elige potius quam pipettam 1 – 10 µL.
- Calibratio et conservatio: Necesse est ut pipettae tuae rite calibrentur et conserventur. Parvae adaptationes et partes fractae in pipetta ad magnum augmentum in valoribus errorum systematicorum et fortuitorum ducunt. Calibratio secundum ISO 8655 semel in anno peragenda est.
- Pipettae positivae: Inspice num pipettam positivam cum volumine humili in laboratorio tuo habeas. In genere, usus huius generis pipettae ad meliorem exitum pipettationis, quoad accuratam et praecisionem, ducit quam cum pipettis classicis pulvinariis aereis.
- Conare uti voluminibus maioribus: Fortasse diluere specimen tuum cogitare potes ut volumina maiora eadem quantitate in reactione finali pipettentur. Hoc errores pipettationis cum voluminibus speciminis perparvis minuere potest.
Praeter bonum instrumentum, investigatori oportet optimam artem pipettandi habere. Diligenter his gradibus attende:
- Affixio apicis: Noli pipettam in apicem immittere, nam hoc extremum apicis tenuis laedere potest, ne fasciculus liquidi dirigatur, aut orificium laedere. Levissima tantum pressione utere cum apicem affixis, et pipettam cum cono apicis elastico utere.
- Tenendo pipettam: Noli pipettam in manu tenere dum centrifugam, cyclatorem, etc. exspectas. Interius pipettae calefiet et pulvinar aereum dilatabitur, quod efficiet ut a volumine statuto dum pipettas deviationes fiant.
- Prae-humectatio: Humidificatio aeris intra apicem et pipettam apicem ad exemplum praeparat et evaporationem vitat dum volumen transferendum aspiratur.
- Aspiratio verticalis: Hoc magni momenti est cum volumina parva tractantur, ne effectus capillaris fiat, qui accidit cum pipetta oblique tenetur.
- Profunditas immersionis: Apicem quam minimum immerge ne liquor propter effectum capillarem in apicem ingrediatur. Regula generalis: Quo minor apex et volumen, eo minor profunditas immersionis. Maximum 2 mm commendamus cum parva volumina pipettant.
- Dispensatio ad angulum 45°: Optimus effusio liquidi praestatur cum pipetta ad angulum 45° tenetur.
- Contactus cum pariete vasis vel superficie liquidi: Parva volumina recte dispensari possunt tantum cum apex contra parietem vasis tenetur, vel in liquidum immergitur. Etiam ultima gutta ex apice accurate dispensari potest.
- Sufflatio: Sufflatio necessaria est post dispensationem parvarum voluminum ut etiam ultima gutta liquidi in apice praesentis dispensetur. Sufflatio etiam contra parietem vasis perficienda est. Cave ne bullae aeris in specimen inducantur cum sufflationem in superficie liquidi facis.
Tempus publicationis: XVIII Kalendas Februarias, MMXXI