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Il kit di preparazione della libreria RNA-seq VAHTS Universal V8 per Illumina viene utilizzato per preparare librerie di trascrittomi per piattaforme Illumina. Il kit è versatile e adatto per la costruzione di librerie di RNA di RNA ottenute mediante arricchimento di mRNA basato su Poly (A) o deplezione di rRNA.
Il kit contiene due tipi di buffer di sintesi del cDNA 2nd Strand. I buffer possono essere selezionati per costruire librerie per l'analisi del trascrittoma RNA-Seq filamentato o non filamentato. Il kit integra la sintesi del cDNA del 2nd Strand, il dA-Tailing e la riparazione finale senza purificazione, che semplifica la processo di costruzione della biblioteca e riduce i tempi operativi.
Il sistema di reazione ottimizzato migliora l'efficienza della costruzione della libreria, fornisce una copertura uniforme per diverse quantità di RNA di input ed è compatibile con RNA di input inferiori. Dopo aver selezionato una dimensione utilizzando biglie magnetiche, è possibile ottenere una libreria personalizzata di una dimensione specifica. i tamponi sono soggetti a rigorosi controlli di qualità e test funzionali per stabilità e riproducibilità ottimali.
Il kit di preparazione della libreria VAHTS Universal V8 RNA-seq per Illumina può essere utilizzato per costruire RNA totale arricchito con poli(A) (per RNA di buona integrità da eucarioti come piante, animali e funghi) o costruzione di librerie di RNA con deplezione di rRNA. Poiché il contenuto di mRNA dell'RNA totale in diversi campioni varia notevolmente, è necessario immettere una quantità sufficiente di RNA totale per garantire una quantità sufficiente di mRNA per la costruzione della libreria.
Kit di deplezione dell'rRNA Ribo-off (uomo/topo/ratto) (Vazyme #N406): 0,01–1 g;Perline di cattura dell'mRNA VAHTS (Vazyme #N401): 0,01–4 g;Ribo-off rRNA Depletion Kit (batteri) (Vazyme #N407): 0,01–5 g;Ribo-off rRNA Depletion Kit (pianta) (Vazyme #N409): 1–5 g;Ribo-off Globin & rRNA Depletion Kit (umano/topo/ratto) (Vazyme #N408): 0,01–1 g;mRNA purificato o RNA impoverito di ribosomi: 0,5–100 ng.
È preferibile utilizzare il bioanalizzatore Agilent 2100 per studiare l'integrità dell'RNA totale. L'mRNA integrato con le microsfere di cattura dell'mRNA VAHTS (Vazyme #N401) deve essere RNA di alta qualità (RIN 7), poiché l'RNA totale degradato utilizzato per la costruzione della libreria può causare 3 ′ bias in RNA-seq. Per i campioni di RNA con valori RIN <7, il metodo Ribo-off (Vazyme #N406/407/408/409) è adatto per la rimozione dell'rRNA.
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Tempo di pubblicazione: maggio-06-2022