如何使用手持式手动移液器移液小体积

随着越来越多的注意力放在减少试剂和成本上，对较小体积的需求很高，例如，用于制备 PCR Mastermix 或酶反应。但 0.2 – 5 µL 的小体积移液对移液准确性和精度提出了新的挑战。以下几点是必不可少的：

1. 移液器和吸头尺寸：始终选择具有尽可能最低标称体积和最小吸头的移液器，以保持气垫尽可能小。例如，移液 1 µL 时，请选择 0.25 – 2.5 µL 移液器和配套吸头，而不是 1 – 10 µL 移液器。
2. 校准和维护：正确校准和维护移液器至关重要。移液器上的微小调整和损坏部件会导致系统和随机误差值大幅增加。根据 ISO 8655 必须每年进行一次校准。
3. 正排量移液器：检查您的实验室是否有低容量范围的正排量移液器。一般来说，与传统的气垫移液器相比，使用这种类型的移液器在准确度和精度方面可以获得更好的移液结果。
4. 尝试使用更大的体积：您可以考虑稀释样品，以便在最终反应中以相同的量移取更大的体积。这可以减少样品量非常小的移液错误。

除了好的工具之外，研究人员还必须拥有非常好的移液技术。请特别注意以下步骤：

1. 吸头附件：请勿将移液器卡在吸头上，因为这可能会损坏细吸头端，导致液束改变方向或损坏孔口。连接吸头时仅施加轻微压力，并使用带有弹簧加载吸头锥体的移液器。
2. 握持移液器：等待离心机、循环仪等时不要将移液器拿在手中，移液器内部会升温，导致气垫膨胀，导致移液时偏离设定体积。
3. 预润湿：吸头和移液器内的空气加湿，为吸头准备样品，并避免在吸取转移体积时蒸发。
4. 垂直吸取：这在处理小体积时非常重要，以避免以一定角度握住移液器时发生的毛细管效应。
5. 浸入深度：尽可能少地浸入吸头，以防止液体因毛细管效应进入吸头。经验法则：尖端和体积越小，浸入深度越低。当移液量较小时，我们建议最大距离为 2 mm。
6. 以 45° 角分液：当移液器保持在 45° 角时，可保证液体的最佳流出。
7. 接触容器壁或液体表面：只有当尖端靠在容器壁上或浸入液体中时，才能正确分配小体积。即使是尖端的最后一滴也可以准确分配。
8. 吹出：在分配少量液体后，必须进行吹出，以分配尖端中的最后一滴液体。吹扫也应靠着容器壁进行。在液体表面进行吹扫时，小心不要将气泡带入样品中。