0.2 నుండి 5 µL వరకు పైపెట్టింగ్ వాల్యూమ్లలో, పైపెట్టింగ్ ఖచ్చితత్వం మరియు ఖచ్చితత్వం చాలా ముఖ్యమైనవి, మంచి పైపెట్టింగ్ టెక్నిక్ అవసరం ఎందుకంటే చిన్న వాల్యూమ్లతో తప్పులను నిర్వహించడం మరింత స్పష్టంగా కనిపిస్తుంది.
కారకాలు మరియు ఖర్చులను తగ్గించడంపై ఎక్కువ దృష్టి పెడుతున్నందున, చిన్న వాల్యూమ్లకు అధిక డిమాండ్ ఉంది, ఉదా., PCR మాస్టర్మిక్స్ లేదా ఎంజైమ్ ప్రతిచర్యల తయారీకి. కానీ 0.2 - 5 µL నుండి చిన్న వాల్యూమ్లను పైప్ చేయడం వల్ల పైప్టింగ్ ఖచ్చితత్వం మరియు ఖచ్చితత్వం కోసం కొత్త సవాళ్లు ఎదురవుతాయి. ఈ క్రింది అంశాలు చాలా ముఖ్యమైనవి:
- పైపెట్ మరియు టిప్ సైజు: ఎయిర్ కుషన్ను వీలైనంత చిన్నగా ఉంచడానికి ఎల్లప్పుడూ సాధ్యమైనంత తక్కువ నామమాత్రపు వాల్యూమ్ మరియు అతి చిన్న టిప్ ఉన్న పైపెట్ను ఎంచుకోండి. 1 µL పైపెట్ చేస్తున్నప్పుడు ఉదా., 1 – 10 µL పైపెట్ కాకుండా 0.25 – 2.5 µL పైపెట్ మరియు సరిపోలే టిప్ను ఎంచుకోండి.
- క్రమాంకనం మరియు నిర్వహణ: మీ పైపెట్లను సరిగ్గా క్రమాంకనం చేయడం మరియు నిర్వహించడం చాలా అవసరం. పైపెట్పై చిన్న సర్దుబాట్లు మరియు విరిగిన భాగాలు క్రమబద్ధమైన మరియు యాదృచ్ఛిక దోష విలువలలో భారీ పెరుగుదలకు దారితీస్తాయి. ISO 8655 ప్రకారం క్రమాంకనం సంవత్సరానికి ఒకసారి నిర్వహించబడాలి.
- పాజిటివ్ డిస్ప్లేస్మెంట్ పైపెట్లు: మీ ల్యాబ్లో తక్కువ వాల్యూమ్ రేంజ్తో పాజిటివ్ డిస్ప్లేస్మెంట్ పైపెట్ ఉందో లేదో తనిఖీ చేయండి. సాధారణంగా, ఈ రకమైన పైపెట్ను ఉపయోగించడం వల్ల క్లాసిక్ ఎయిర్-కుషన్ పైపెట్ల కంటే ఖచ్చితత్వం మరియు ఖచ్చితత్వం పరంగా మెరుగైన పైపెటింగ్ ఫలితం లభిస్తుంది.
- పెద్ద వాల్యూమ్లను ఉపయోగించడానికి ప్రయత్నించండి: తుది ప్రతిచర్యలో అదే పరిమాణంతో పెద్ద వాల్యూమ్లను పైపెట్ చేయడానికి మీ నమూనాను పలుచన చేయడాన్ని మీరు పరిగణించవచ్చు. ఇది చాలా చిన్న నమూనా వాల్యూమ్లతో పైపెటింగ్ లోపాలను తగ్గించవచ్చు.
మంచి సాధనంతో పాటు, పరిశోధకుడికి చాలా మంచి పైపెట్టింగ్ టెక్నిక్ కూడా ఉండాలి. ఈ క్రింది దశలపై ప్రత్యేక శ్రద్ధ వహించండి:
- చిట్కా అటాచ్మెంట్: పైపెట్ను చిట్కాపైకి జామ్ చేయవద్దు ఎందుకంటే ఇది సన్నని చిట్కా చివరను దెబ్బతీస్తుంది, దీనివల్ల ద్రవ పుంజం దారి మళ్లించబడుతుంది లేదా రంధ్రం దెబ్బతింటుంది. చిట్కాను అటాచ్ చేసేటప్పుడు తేలికపాటి ఒత్తిడిని మాత్రమే వర్తింపజేయండి మరియు స్ప్రింగ్-లోడెడ్ టిప్ కోన్తో పైపెట్ను ఉపయోగించండి.
- పైపెట్ పట్టుకోవడం: సెంట్రిఫ్యూజ్, సైక్లర్ మొదలైన వాటి కోసం వేచి ఉన్నప్పుడు పైపెట్ను మీ చేతిలో పట్టుకోకండి. పైపెట్ లోపలి భాగం వేడెక్కుతుంది మరియు గాలి కుషన్ విస్తరించడానికి దారితీస్తుంది, ఫలితంగా పైపెట్ వేసేటప్పుడు సెట్ వాల్యూమ్ నుండి విచలనాలు ఏర్పడతాయి.
- ముందుగా తడి చేయడం: చిట్కా మరియు పైపెట్ లోపల గాలిని తేమ చేయడం వలన నమూనా కోసం చిట్కా సిద్ధం అవుతుంది మరియు బదిలీ వాల్యూమ్ను పీల్చేటప్పుడు బాష్పీభవనం జరగకుండా చేస్తుంది.
- నిలువు ఆకాంక్ష: పైపెట్ను కోణంలో పట్టుకున్నప్పుడు ఏర్పడే కేశనాళిక ప్రభావాన్ని నివారించడానికి చిన్న వాల్యూమ్లను నిర్వహించేటప్పుడు ఇది చాలా ముఖ్యం.
- ఇమ్మర్షన్ డెప్త్: కేశనాళిక ప్రభావం కారణంగా ద్రవం చిట్కాలోకి ప్రవేశించకుండా నిరోధించడానికి చిట్కాను వీలైనంత తక్కువగా ముంచండి. ముఖ్య నియమం: చిట్కా మరియు వాల్యూమ్ చిన్నగా ఉంటే, ఇమ్మర్షన్ డెప్త్ తక్కువగా ఉంటుంది. చిన్న వాల్యూమ్లను పైప్ వేసేటప్పుడు మేము గరిష్టంగా 2 మి.మీ. సిఫార్సు చేస్తున్నాము.
- 45° కోణంలో పంపిణీ: పైపెట్ను 45° కోణంలో పట్టుకున్నప్పుడు ద్రవం యొక్క సరైన ప్రవాహం హామీ ఇవ్వబడుతుంది.
- పాత్ర గోడ లేదా ద్రవ ఉపరితలంతో సంబంధం: చిన్న పరిమాణంలో ఉన్న నీటిని పాత్ర గోడకు వ్యతిరేకంగా పట్టుకున్నప్పుడు లేదా ద్రవంలో ముంచినప్పుడు మాత్రమే సరిగ్గా విడుదల చేయవచ్చు. చిట్కా నుండి చివరి చుక్కను కూడా ఖచ్చితంగా విడుదల చేయవచ్చు.
- బ్లో-అవుట్: తక్కువ పరిమాణంలో ద్రవాన్ని విడుదల చేసిన తర్వాత, చివరి చుక్క ద్రవాన్ని కూడా విడుదల చేయడానికి బ్లో-అవుట్ తప్పనిసరి. పాత్ర గోడకు వ్యతిరేకంగా కూడా బ్లో-అవుట్ చేయాలి. ద్రవ ఉపరితలం వద్ద బ్లో-అవుట్ చేసేటప్పుడు నమూనాలోకి గాలి బుడగలు రాకుండా జాగ్రత్త వహించండి.
పోస్ట్ సమయం: ఫిబ్రవరి-18-2021