핸드헬드 수동 피펫으로 소량 피펫팅하는 방법

시약 및 비용 절감에 더욱 중점을 두면서, PCR 마스터믹스 제조나 효소 반응 등 소량 피펫팅에 대한 수요가 증가하고 있습니다. 그러나 0.2~5 µL의 소량 피펫팅은 정확도와 정밀도 측면에서 새로운 과제를 안겨줍니다. 다음과 같은 사항들이 필수적입니다.

1. 피펫 및 팁 크기: 항상 가능한 한 공칭 용량이 가장 낮은 피펫과 팁 크기가 가장 작은 피펫을 선택하여 에어 쿠션을 최대한 작게 유지하십시오. 예를 들어 1µL를 피펫팅할 때는 1~10µL 피펫 대신 0.25~2.5µL 피펫과 그에 맞는 팁을 선택하십시오.
2. 교정 및 유지관리: 피펫은 반드시 적절하게 교정하고 유지관리해야 합니다. 피펫의 작은 조정이나 부품 파손은 계통적 및 무작위적 오차를 크게 증가시킵니다. ISO 8655에 따른 교정은 1년에 한 번 수행해야 합니다.
3. 직접 변위식 피펫: 실험실에 용량 범위가 낮은 직접 변위식 피펫이 있는지 확인하세요. 일반적으로 이러한 유형의 피펫을 사용하면 기존 에어쿠션 피펫보다 정확도와 정밀도 측면에서 더 나은 피펫팅 결과를 얻을 수 있습니다.
4. 더 많은 양을 사용해 보세요. 최종 반응에서 같은 양의 시료를 더 많은 양으로 피펫팅하기 위해 시료를 희석하는 것을 고려해 보세요. 이렇게 하면 매우 적은 양의 시료를 사용할 때 발생하는 피펫팅 오류를 줄일 수 있습니다.

연구자는 좋은 도구 외에도 매우 뛰어난 피펫팅 기술을 보유해야 합니다. 다음 단계에 특히 유의하십시오.

1. 팁 부착: 피펫을 팁에 끼우지 마십시오. 미세한 팁 끝이 손상되어 액체 빔이 다른 방향으로 흐르거나 구멍이 손상될 수 있습니다. 팁을 부착할 때는 가볍게 눌러야 하며, 스프링이 장착된 팁 콘이 있는 피펫을 사용하십시오.
2. 피펫 잡기: 원심분리기, 사이클러 등을 기다리는 동안 피펫을 손에 잡지 마십시오. 피펫 내부가 가열되어 공기 쿠션이 팽창하여 피펫팅 시 설정된 용량에서 편차가 발생할 수 있습니다.
3. 사전 습윤: 팁과 피펫 내부의 공기를 가습하여 팁을 샘플에 맞게 준비하고 이송 볼륨을 흡입할 때 증발을 방지합니다.
4. 수직 흡입: 피펫을 비스듬히 잡았을 때 발생하는 모세관 현상을 피하기 위해 소량을 다룰 때 수직 흡입이 매우 중요합니다.
5. 침지 깊이: 모세관 현상으로 인해 액체가 팁으로 들어가는 것을 방지하기 위해 팁을 최대한 적게 담그십시오. 경험상 팁과 용량이 작을수록 침지 깊이는 얕아집니다. 소량을 피펫팅할 때는 최대 2mm를 권장합니다.
6. 45° 각도로 분사: 피펫을 45° 각도로 잡으면 액체가 최적으로 흘러나옵니다.
7. 용기 벽 또는 액체 표면에 닿는 경우: 소량의 액체는 팁을 용기 ​​벽에 대거나 액체에 담갔을 때만 정확하게 분주할 수 있습니다. 팁의 마지막 한 방울까지도 정확하게 분주할 수 있습니다.
8. 블로우아웃: 소량을 분주한 후에는 팁에 남아 있는 마지막 한 방울까지 분주하기 위해 반드시 블로우아웃을 해야 합니다. 용기 벽면에도 블로우아웃을 해야 합니다. 액체 표면에서 블로우아웃을 할 때는 샘플에 기포가 들어가지 않도록 주의하십시오.