0.2-ից մինչև 5 մկլ ծավալներ պիպետացնելիս չափազանց կարևոր է պիպետացման ճշգրտությունը և ճշգրտությունը։ Լավ պիպետացման տեխնիկան կարևոր է, քանի որ կառավարման սխալներն ավելի ակնհայտ են փոքր ծավալների դեպքում։
Քանի որ ավելի շատ ուշադրություն է դարձվում ռեակտիվների և ծախսերի կրճատմանը, փոքր ծավալները մեծ պահանջարկ ունեն, օրինակ՝ ՊՇՌ մաստերմիքսի կամ ֆերմենտային ռեակցիաների պատրաստման համար: Սակայն 0.2-5 մկլ փոքր ծավալների պիպետավորումը նոր մարտահրավերներ է առաջացնում պիպետավորման ճշգրտության և ճշգրտության համար: Հետևյալ կետերը կարևոր են.
- Պիպետի և ծայրակալի չափս. Միշտ ընտրեք հնարավորինս ամենացածր անվանական ծավալով և ամենափոքր ծայրակալով պիպետը՝ օդային բարձիկը հնարավորինս փոքր պահելու համար: Օրինակ՝ 1 մկլ պիպետի դեպքում ընտրեք 0.25 – 2.5 մկլ պիպետ և համապատասխան ծայրակալ 1 – 10 մկլ պիպետի փոխարեն:
- Կալիբրացիա և սպասարկում. Կարևոր է, որ ձեր պիպետները պատշաճ կերպով կարգավորված և սպասարկվեն: Պիպետի վրա փոքր ճշգրտումները և կոտրված մասերը հանգեցնում են համակարգված և պատահական սխալների արժեքների զգալի աճի: ISO 8655 ստանդարտի համաձայն կարգաբերումը պետք է իրականացվի տարին մեկ անգամ:
- Դրական տեղաշարժի պիպետներ. Ստուգեք, թե արդյոք ձեր լաբորատորիայում ունեք ցածր ծավալի տիրույթով դրական տեղաշարժի պիպետ: Ընդհանուր առմամբ, այս տեսակի պիպետի օգտագործումը հանգեցնում է ավելի լավ արդյունքի՝ ճշգրտության և ճշգրտության առումով, քան դասական օդային բարձիկով պիպետների դեպքում:
- Փորձեք օգտագործել ավելի մեծ ծավալներ. կարող եք դիտարկել ձեր նմուշը նոսրացնելու հնարավորությունը, որպեսզի վերջնական ռեակցիայի մեջ նույն քանակով ավելի մեծ ծավալներ պիպետացնեք։ Սա կարող է նվազեցնել պիպետացիայի սխալները շատ փոքր նմուշների ծավալների դեպքում։
Բացի լավ գործիքից, հետազոտողը պետք է ունենա շատ լավ պիպետացման տեխնիկա։ Հատուկ ուշադրություն դարձրեք հետևյալ քայլերին.
- Ծայրակալի ամրացում. Մի՛ խցկեք պիպետը ծայրակալին, քանի որ դա կարող է վնասել բարակ ծայրակալը, ինչը կարող է հանգեցնել հեղուկի փնջի վերաուղղորդմանը կամ վնասել անցքը: Ծայրակալը ամրացնելիս կիրառեք միայն թեթև ճնշում և օգտագործեք զսպանակավոր ծայրակալով կոնաձև պիպետ:
- Պիպետը բռնելը. Մի՛ պահեք պիպետը ձեռքում, մինչ սպասում եք ցենտրիֆուգին, ցիկլերատորին և այլն: Պիպետի ներսը կտաքանա և կհանգեցնի օդային բարձիկի ընդարձակմանը, ինչը կհանգեցնի սահմանված ծավալից շեղումների պիպետի բաշխման ժամանակ:
- Նախնական թրջում. ծայրի և պիպետի ներսում օդի խոնավացումը նախապատրաստում է ծայրը նմուշի համար և կանխում գոլորշիացումը փոխանցման ծավալը ներծծելիս։
- Ուղղահայաց ասպիրացիա. Սա շատ կարևոր է փոքր ծավալների հետ աշխատելիս՝ խուսափելու համար մազանոթային էֆեկտից, որն առաջանում է, երբ պիպետը պահվում է անկյան տակ:
- Ընկղմման խորություն. Հնարավորինս քիչ ընկղմեք ծայրը՝ մազանոթային էֆեկտի պատճառով հեղուկի ծայր մտնելը կանխելու համար: Հիմնական կանոն. Որքան փոքր է ծայրը և ծավալը, այնքան փոքր է ընկղմման խորությունը: Փոքր ծավալների պիպետավորման ժամանակ խորհուրդ ենք տալիս օգտագործել առավելագույնը 2 մմ:
- 45° անկյան տակ ներարկում. Հեղուկի օպտիմալ հոսքը երաշխավորված է, երբ պիպետը պահվում է 45° անկյան տակ։
- Անոթի պատին կամ հեղուկի մակերեսին շփում. Փոքր ծավալները կարող են պատշաճ կերպով բաշխվել միայն այն դեպքում, երբ ծայրը հպված է անոթի պատին կամ ընկղմված է հեղուկի մեջ: Նույնիսկ ծայրից վերջին կաթիլը կարող է ճշգրիտ բաշխվել:
- Փչում. Փոքր ծավալներ ներարկելուց հետո փչումը պարտադիր է՝ ծայրում առկա հեղուկի նույնիսկ վերջին կաթիլը ներարկելու համար: Փչումը պետք է իրականացվի նաև անոթի պատին մոտ: Հեղուկի մակերեսին փչում կատարելիս զգույշ եղեք, որ օդային պղպջակները չմտնեն նմուշի մեջ:
Հրապարակման ժամանակը. Փետրվարի 18-2021