હેન્ડહેલ્ડ મેન્યુઅલ પાઇપેટ્સ વડે નાના વોલ્યુમમાં પાઇપેટ કેવી રીતે કરવું

રીએજન્ટ્સ અને ખર્ચ ઘટાડવા પર વધુ ધ્યાન કેન્દ્રિત કરવામાં આવી રહ્યું હોવાથી, નાના વોલ્યુમોની માંગ વધુ છે, દા.ત., પીસીઆર માસ્ટરમિક્સ અથવા એન્ઝાઇમ પ્રતિક્રિયાઓની તૈયારી માટે. પરંતુ 0.2 - 5 µL થી નાના વોલ્યુમનું પાઇપિંગ પાઇપિંગ ચોકસાઈ અને ચોકસાઇ માટે નવા પડકારો ઉભા કરે છે. નીચેના મુદ્દાઓ મહત્વપૂર્ણ છે:

1. પાઇપેટ અને ટીપનું કદ: હંમેશા શક્ય તેટલું ઓછું નોમિનલ વોલ્યુમ અને સૌથી નાની ટીપવાળી પાઇપેટ પસંદ કરો જેથી એર કુશન શક્ય તેટલું નાનું રહે. ઉદાહરણ તરીકે, 1 µL પાઇપેટ કરતી વખતે, 1 - 10 µL પાઇપેટને બદલે 0.25 - 2.5 µL પાઇપેટ અને મેચિંગ ટીપ પસંદ કરો.
2. માપાંકન અને જાળવણી: તમારા પાઈપેટ્સ યોગ્ય રીતે માપાંકિત અને જાળવણી કરેલા હોય તે ખૂબ જ જરૂરી છે. પાઈપેટ પર નાના ગોઠવણો અને તૂટેલા ભાગો વ્યવસ્થિત અને રેન્ડમ ભૂલ મૂલ્યોમાં મોટા પ્રમાણમાં વધારો તરફ દોરી જાય છે. ISO 8655 અનુસાર માપાંકન વર્ષમાં એકવાર કરવું આવશ્યક છે.
3. પોઝિટિવ ડિસ્પ્લેસમેન્ટ પિપેટ્સ: તમારી લેબમાં ઓછી વોલ્યુમ રેન્જ સાથે પોઝિટિવ ડિસ્પ્લેસમેન્ટ પિપેટ છે કે નહીં તે તપાસો. સામાન્ય રીતે, આ પ્રકારના પિપેટનો ઉપયોગ ક્લાસિક એર-કુશન પિપેટ્સ કરતાં ચોકસાઈ અને ચોકસાઈની દ્રષ્ટિએ વધુ સારા પાઇપેટિંગ પરિણામ તરફ દોરી જાય છે.
4. મોટા જથ્થાનો ઉપયોગ કરવાનો પ્રયાસ કરો: અંતિમ પ્રતિક્રિયામાં તમે તમારા નમૂનાને પાતળા કરીને સમાન જથ્થા સાથે મોટા જથ્થામાં પાઇપેટ બનાવવાનું વિચારી શકો છો. આ ખૂબ જ નાના નમૂના વોલ્યુમ સાથે પાઇપેટિંગ ભૂલો ઘટાડી શકે છે.

સારા સાધન ઉપરાંત, સંશોધક પાસે ખૂબ જ સારી પાઇપિંગ તકનીક હોવી જોઈએ. નીચેના પગલાંઓ પર ખાસ ધ્યાન આપો:

1. ટીપ જોડાણ: પીપેટને ટીપ પર જામ કરશો નહીં કારણ કે આનાથી ઝીણા ટીપના છેડાને નુકસાન થઈ શકે છે જેના કારણે પ્રવાહી બીમ રીડાયરેક્ટ થઈ શકે છે અથવા છિદ્રને નુકસાન થઈ શકે છે. ટીપ જોડતી વખતે ફક્ત હળવું દબાણ કરો અને સ્પ્રિંગ-લોડેડ ટીપ શંકુવાળા પીપેટનો ઉપયોગ કરો.
2. પાઇપેટ પકડી રાખવું: સેન્ટ્રીફ્યુજ, સાયકલર વગેરેની રાહ જોતી વખતે પાઇપેટને હાથમાં ન રાખો. પાઇપેટનો અંદરનો ભાગ ગરમ થશે અને હવાના ગાદીને વિસ્તૃત કરશે જેના પરિણામે પાઇપેટ કરતી વખતે સેટ વોલ્યુમથી વિચલનો થશે.
3. ભીનાશ પહેલાં: ટીપ અને પીપેટની અંદર હવાનું ભેજીકરણ ટીપને નમૂના માટે તૈયાર કરે છે અને ટ્રાન્સફર વોલ્યુમને એસ્પિરેટ કરતી વખતે બાષ્પીભવન ટાળે છે.
4. વર્ટિકલ એસ્પિરેશન: નાના વોલ્યુમોને હેન્ડલ કરતી વખતે આ ખૂબ જ મહત્વપૂર્ણ છે જેથી જ્યારે પાઇપેટને ખૂણા પર રાખવામાં આવે ત્યારે થતી કેશિલરી અસર ટાળી શકાય.
5. નિમજ્જનની ઊંડાઈ: કેશિલરી અસરને કારણે પ્રવાહીને ટીપમાં પ્રવેશતા અટકાવવા માટે ટીપને શક્ય તેટલું ઓછું ડૂબાડો. અંગૂઠાનો નિયમ: ટીપ અને વોલ્યુમ જેટલું નાનું હશે, નિમજ્જનની ઊંડાઈ ઓછી હશે. નાના જથ્થામાં પાઇપિંગ કરતી વખતે અમે મહત્તમ 2 મીમીની ભલામણ કરીએ છીએ.
6. ૪૫° ના ખૂણા પર વિતરણ: જ્યારે પીપેટને ૪૫° ના ખૂણા પર રાખવામાં આવે છે ત્યારે પ્રવાહીનો શ્રેષ્ઠ પ્રવાહ બહાર નીકળવાની ખાતરી આપવામાં આવે છે.
7. વાસણની દિવાલ અથવા પ્રવાહી સપાટીનો સંપર્ક: નાના જથ્થાને ફક્ત ત્યારે જ યોગ્ય રીતે વિતરિત કરી શકાય છે જ્યારે ટીપને વાસણની દિવાલ સામે રાખવામાં આવે છે, અથવા પ્રવાહીમાં ડૂબાડવામાં આવે છે. ટીપમાંથી છેલ્લું ટીપું પણ સચોટ રીતે વિતરિત કરી શકાય છે.
8. બ્લો-આઉટ: ટીપમાં રહેલા પ્રવાહીના છેલ્લા ટીપાને પણ દૂર કરવા માટે ઓછા જથ્થામાં વિસર્જન કર્યા પછી બ્લો-આઉટ ફરજિયાત છે. બ્લો-આઉટ વાસણની દિવાલ સામે પણ થવું જોઈએ. પ્રવાહી સપાટી પર બ્લો-આઉટ કરતી વખતે નમૂનામાં હવાના પરપોટા ન આવે તેનું ધ્યાન રાખો.