হ্যান্ডহেল্ড ম্যানুয়াল পাইপেট দিয়ে কীভাবে ছোট আয়তনের পাইপেট করবেন

যেহেতু রিএজেন্ট এবং খরচ কমানোর উপর বেশি জোর দেওয়া হচ্ছে, তাই পিসিআর মাস্টারমিক্স বা এনজাইম বিক্রিয়ার প্রস্তুতির জন্য ছোট ভলিউমের চাহিদা বেশি। কিন্তু ০.২ - ৫ µL থেকে ছোট ভলিউমের পাইপেটিং পাইপেটিং নির্ভুলতা এবং নির্ভুলতার জন্য নতুন চ্যালেঞ্জ তৈরি করে। নিম্নলিখিত বিষয়গুলি গুরুত্বপূর্ণ:

1. পাইপেট এবং টিপের আকার: সর্বদা সর্বনিম্ন নামমাত্র আয়তনের পাইপেট এবং এয়ার কুশন যতটা সম্ভব ছোট রাখার জন্য সবচেয়ে ছোট টিপ বেছে নিন। ১ µL পাইপেট করার সময়, ১ - ১০ µL পাইপেটের পরিবর্তে ০.২৫ - ২.৫ µL পাইপেট এবং ম্যাচিং টিপ বেছে নিন।
2. ক্রমাঙ্কন এবং রক্ষণাবেক্ষণ: আপনার পাইপেটগুলি সঠিকভাবে ক্রমাঙ্কন এবং রক্ষণাবেক্ষণ করা অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। পাইপেটের ছোটখাটো সমন্বয় এবং ভাঙা অংশগুলি নিয়মিত এবং এলোমেলো ত্রুটির মানগুলিতে ব্যাপক বৃদ্ধি ঘটায়। ISO 8655 অনুসারে বছরে একবার একটি ক্রমাঙ্কন করা আবশ্যক।
3. পজিটিভ ডিসপ্লেসমেন্ট পিপেট: আপনার ল্যাবে কম ভলিউম রেঞ্জের পজিটিভ ডিসপ্লেসমেন্ট পিপেট আছে কিনা তা পরীক্ষা করে দেখুন। সাধারণভাবে, এই ধরণের পিপেট ব্যবহার করলে ক্লাসিক এয়ার-কুশন পিপেটের তুলনায় নির্ভুলতা এবং নির্ভুলতার দিক থেকে ভালো পাইপেটিং ফলাফল পাওয়া যায়।
4. বৃহত্তর আয়তন ব্যবহার করার চেষ্টা করুন: চূড়ান্ত বিক্রিয়ায় একই পরিমাণে বৃহত্তর আয়তনের পাইপেট তৈরির জন্য আপনি আপনার নমুনা পাতলা করার কথা বিবেচনা করতে পারেন। এটি খুব কম নমুনা আয়তনের সাথে পাইপেটিং ত্রুটি কমাতে পারে।

একটি ভালো হাতিয়ারের পাশাপাশি, গবেষকের অবশ্যই খুব ভালো পাইপটিং কৌশল থাকতে হবে। নিম্নলিখিত ধাপগুলিতে বিশেষ মনোযোগ দিন:

1. টিপ সংযুক্তি: টিপের উপর পিপেট আটকে রাখবেন না কারণ এটি সূক্ষ্ম টিপের প্রান্তকে ক্ষতিগ্রস্ত করতে পারে যার ফলে তরল রশ্মিটি পুনঃনির্দেশিত হতে পারে বা ছিদ্রের ক্ষতি হতে পারে। টিপ সংযুক্ত করার সময় কেবল হালকা চাপ প্রয়োগ করুন এবং স্প্রিং-লোডেড টিপ শঙ্কু সহ একটি পাইপেট ব্যবহার করুন।
2. পিপেট ধরে রাখা: সেন্ট্রিফিউজ, সাইক্লার ইত্যাদির জন্য অপেক্ষা করার সময় পিপেটটি হাতে ধরে রাখবেন না। পিপেটের ভেতরের অংশ উত্তপ্ত হয়ে বাতাসের কুশনকে প্রসারিত করবে যার ফলে পাইপেটিং করার সময় নির্ধারিত আয়তন থেকে বিচ্যুতি ঘটবে।
3. প্রাক-ভেজা: ডগা এবং পাইপেটের ভিতরে বাতাসের আর্দ্রতা নমুনার জন্য ডগা প্রস্তুত করে এবং স্থানান্তর ভলিউমকে উচ্চাকাঙ্ক্ষী করার সময় বাষ্পীভবন এড়ায়।
4. উল্লম্ব অ্যাসপিরেশন: ছোট আয়তন পরিচালনা করার সময় এটি খুবই গুরুত্বপূর্ণ, যাতে পাইপেটটি একটি কোণে ধরে রাখলে কৈশিক প্রভাব এড়ানো যায়।
5. নিমজ্জনের গভীরতা: কৈশিক প্রভাবের কারণে তরল পদার্থ যাতে ডগায় প্রবেশ না করে, তার জন্য ডগা যতটা সম্ভব কম ডুবিয়ে রাখুন। নিয়ম: ডগা এবং আয়তন যত ছোট হবে, ডগা এবং আয়তন তত কম হবে। ছোট আয়তনের পাইপিংয়ের সময় আমরা সর্বোচ্চ 2 মিমি ডুবিয়ে রাখার পরামর্শ দিই।
6. ৪৫° কোণে তরল নির্গমন: পিপেটটি ৪৫° কোণে ধরে রাখলে তরলের সর্বোত্তম প্রবাহ নিশ্চিত করা হয়।
7. পাত্রের প্রাচীর বা তরল পৃষ্ঠের সাথে যোগাযোগ: ছোট আয়তন কেবল তখনই সঠিকভাবে নির্গত হতে পারে যখন অগ্রভাগটি পাত্রের প্রাচীরের সাথে ধরে রাখা হয়, অথবা তরলে ডুবানো হয়। এমনকি অগ্রভাগ থেকে শেষ ফোঁটাটিও নির্ভুলভাবে নির্গত হতে পারে।
8. ব্লো-আউট: কম পরিমাণে তরল পদার্থ বের করার পর ব্লো-আউট বাধ্যতামূলক যাতে ডগায় থাকা তরল পদার্থের শেষ ফোঁটাও বের হয়ে যায়। ব্লো-আউটটি পাত্রের দেয়ালের বিপরীতে করা উচিত। তরল পৃষ্ঠে ব্লো-আউট করার সময় নমুনায় বাতাসের বুদবুদ না আসার বিষয়ে সতর্ক থাকুন।