ハンドヘルド手動ピペットを使用して少量をピペッティングする方法

試薬とコストの削減に重点が置かれているため、PCR Mastermix や酵素反応の調製などで、より少量の需要が高まっています。しかし、0.2 ～ 5 µL の少量のピペッティングでは、ピペッティングの精度と精度に関して新たな課題が生じます。次の点が重要です。

1. ピペットとチップのサイズ: エアクッションをできるだけ小さく保つために、常に可能な限り最小の公称容量と最小のチップを備えたピペットを選択してください。たとえば、1 µL をピペッティングする場合は、1 ～ 10 µL のピペットではなく、0.25 ～ 2.5 µL のピペットとそれに適合するチップを選択してください。
2. 校正とメンテナンス: ピペットを適切に校正し、メンテナンスすることが重要です。ピペットの小さな調整や部品の破損により、系統的およびランダムな誤差値が大幅に増加します。 ISO 8655 に準拠した校正は年に 1 回実行する必要があります。
3. 容積式ピペット: 研究室に低容量範囲の容積式ピペットがあるかどうかを確認してください。一般に、このタイプのピペットを使用すると、従来のエアクッション ピペットよりも精度と精度の点で優れたピペッティング結果が得られます。
4. より大きな容量を使用してみてください。最終反応で同じ量のより大きな容量をピペッティングするために、サンプルを希釈することを検討することもできます。これにより、サンプル量が非常に少ない場合のピペッティングエラーを減らすことができます。

研究者は優れたツールに加えて、非常に優れたピペッティング技術を持っている必要があります。次の手順に特に注意してください。

1. チップの取り付け: ピペットをチップに押し付けないでください。細いチップの端が損傷し、液体ビームの向きが変わったり、オリフィスが損傷したりする可能性があります。チップを取り付けるときは軽い圧力のみを加え、バネ仕掛けのチップ コーンを備えたピペットを使用してください。
2. ピペットの保持: 遠心分離機やサイクラーなどを待っている間はピペットを手で持たないでください。ピペットの内部が加熱してエアクッションが膨張し、ピペッティング時に設定容量からのずれが生じます。
3. プレウェット: チップとピペット内の空気を加湿することで、チップをサンプルに向けて準備し、移送量を吸引する際の蒸発を防ぎます。
4. 垂直吸引: これは、ピペットを斜めに保持したときに発生する毛細管効果を避けるために、少量を取り扱う場合に非常に重要です。
5. 浸漬深さ: 毛細管効果によって液体がチップに入るのを防ぐために、チップをできるだけ浅く浸します。経験則: チップと体積が小さいほど、浸漬深さは低くなります。少量をピペッティングする場合は最大 2 mm を推奨します。
6. 45° の角度での分注: ピペットを 45° の角度で保持すると、液体の最適な流出が保証されます。
7. 容器壁または液体表面への接触: 少量は、チップが容器壁に押し付けられている場合、または液体に浸されている場合にのみ適切に分注できます。先端の最後の一滴まで正確に分注できます。
8. ブローアウト: チップ内の液体の最後の一滴まで吐出するために、少量を吐出した後はブローアウトが必須です。吹き出しは容器壁に対しても行う必要があります。液面でブローアウトを行う場合には、サンプル中に気泡が入らないように注意してください。