Si të vulosni një pllakë PCR

Hyrje


Pllaka PCR, një element bazë i laboratorit për shumë vite, po bëhen edhe më të përhapura në mjedisin modern, ndërsa laboratorët rrisin rendimentin e tyre dhe përdorin gjithnjë e më shumë automatizim brenda rrjedhave të tyre të punës. Arritja e këtyre objektivave duke ruajtur saktësinë dhe integritetin e eksperimenteve mund të jetë e vështirë. Një nga fushat e zakonshme ku mund të shfaqen gabime është vulosja ePllaka PCR, me teknikë të dobët që lejon avullimin e mostrave, duke ndryshuar pH-in dhe për këtë arsye duke prishur funksionet enzimatike, dhe duke nxitur kontaminimin. Të mësuarit se si të vulosni njëPllakë PCReliminon saktë këto rreziqe dhe siguron rezultate të riprodhueshme.

 

Gjeni vulën e duhur për pllakën tuaj PCR


Kapakët e pllakave kundrejt vulave të filmit kundrejt kapakëve
Kapitujjanë një mënyrë e mirë për të mbyllur pjatën tuaj fort, ndërkohë që ju japin fleksibilitetin për ta hapur dhe mbyllur shumë lehtë pjatën sipas nevojës pa asnjë humbje. Megjithatë, kapakët kanë disa të meta kryesore.

Së pari, do të duhet të blini kapakun specifik që është i pajtueshëm, gjë që i bën ato jo shumëfunksionale. Do të duhet të siguroheni që kapaku që zgjidhni i përshtatet pllakës, gjë që varet nga prodhuesi i saj, dhe të zgjidhni ose në formë kupole ose të sheshtë bazuar në termociklizuesin që po përdorni.

Së dyti, vendosja e kapakëve në pllakë mund të jetë shumë e përsëritur dhe e lodhshme, me rrezikun e kontaminimit të kryqëzuar nëse vendosni kapakun e gabuar në pusin e gabuar.

Ndërkohë që guarnicionet prej filmi janë më pak fleksibile për sa i përket heqjes dhe zëvendësimit, ato janë shumë të gjithanshme pasi mund të përshtaten me çdo lloj pllake PCR, pavarësisht se kush është prodhuesi. Ato mund të priten thjesht sipas madhësisë, duke i bërë shumë efektive.

Një tjetër mundësi është një kapak pjate. Këto ofrojnë më pak mbrojtje sesa kapakët dhe vulat, dhe përdoren kryesisht vetëm për mbulim afatshkurtër për të parandaluar kontaminimin.

 

Vulosje optike kundrejt filmit prej fletë metalike


Nëse keni nevojë për një vulë optike, transparente apo njëfilm aluminiMbyllja e pllakës suaj vendoset nga formati juaj eksperimental.Filma vulosës optikjanë transparente për t'ju lejuar të vëzhgoni mostrat, ndërkohë që i mbrojnë ato dhe parandalojnë avullimin. Ato janë gjithashtu veçanërisht të dobishme në eksperimentet qPCR të cilat përfshijnë kryerjen e matjeve shumë të sakta të fluoreshencës direkt nga pllaka, në të cilin rast do t'ju duhet një film vulosës që filtron sa më pak fluoreshencë të jetë e mundur. Është e rëndësishme të siguroheni që vula ose kapaku që po përdorni të ketë një nivel mjaft të lartë të qartësisë optike për të siguruar që leximet të jenë të sakta.

Fletët prej alumini janë të përshtatshëm për çdo mostër që është e ndjeshme ndaj dritës ose që do të ruhet nën 80°C. Për këtë arsye, shumica e mostrave të destinuara për ruajtje afatgjatë do të kërkojnë një fletë alumini. Fletët prej alumini janë gjithashtu të shpueshme, gjë që është e dobishme ose për ekzaminimin e pusetave individuale, ose për transferimin e mostrave me gjilpëra. Kjo mund të ndodhë manualisht ose si pjesë e një platforme robotike.

Gjithashtu, merrni parasysh se substancat agresive që përfshijnë acide, baza ose tretës do të kërkojnë një guarnicion që mund t'i përballojë ato, në të cilin rast një guarnicion prej folie është ndoshta më i përshtatshëm.

 

Ngjitës kundrejt filmit të vulosjes me nxehtësi
Vulosje filmi ngjitësJanë shumë të thjeshta dhe aplikohen lehtë. E tëra çfarë ju nevojitet është që përdoruesi të vendosë vulën në pllakë dhe të përdorë një mjet të thjeshtë aplikues për të shtypur poshtë dhe për të formuar një vulë të ngushtë.

Vulosjet termike janë më të përparuara, duke siguruar një vulë më jetëgjatë që ka shpejtësi avullimi më të ulëta krahasuar me një vulë ngjitëse konvencionale. Ky opsion është i përshtatshëm nëse doni të ruani mostrat për një kohë të gjatë, megjithëse kjo vjen me një kërkesë shtesë për pajisjet e vulosjes së pllakave.

 

Si të vulosni një pllakë PCR

 

Metoda e Vulosjes së Pllakës


Vetëngjitës

1. Sigurohuni që po punoni në një sipërfaqe pune të sheshtë dhe të qëndrueshme

2. Hiqeni filmin nga paketimi i tij dhe hiqni mbulesën mbrojtëse

3. Vendosni me kujdes vulën në pllakë, duke u siguruar që të gjitha gropat të jenë të mbuluara.

4. Përdorni një mjet aplikues për të ushtruar presion në të gjithë pllakën. Filloni nga njëri skaj dhe vazhdoni drejt tjetrit, duke shtypur në mënyrë të barabartë.

5. Përsëriteni këtë disa herë

6. Lëvizni aplikuesin rreth vrimave të jashtme, për t'u siguruar që edhe këto janë të mbyllura siç duhet.

 

Vulosje termike

Vulosjet termike funksionojnë duke shkrirë filmin në buzën e secilës gropë, me ndihmën e një vulosësi pllakash. Për të përdorur një vulosës termik, referojuni udhëzimeve të dhëna nga prodhuesi i pajisjeve. Sigurohuni që prodhuesi nga i cili furnizoheni me pajisjen tuaj të jetë i mirënjohur, pasi është shumë e rëndësishme që vulosja të jetë e saktë, efektive dhe e papërshkueshme nga uji.

 

Këshilla kryesore për vulosjen e pllakave


a. Kur ushtroni presion mbi guarnicionin, veproni si në drejtimin horizontal ashtu edhe në atë vertikal për të siguruar një guarnicion të duhur.

b. Është gjithmonë praktikë e mirë të kryeni një provë të çdo gjëje që po bëni, dhe kjo nuk është ndryshe me vulosjen e pllakave. Testojeni me një pjatë bosh përpara se të përdorni një me mostra.

c. Gjatë testimit, hiqeni vulën dhe shikoni që ngjitësi të jetë ngjitur siç duhet, pa boshllëqe. Ekziston një paraqitje vizuale e kësaj në dokumentin e parë të referencës. Nëse nuk e keni vulosur pllakën siç duhet, kur ta hiqni vulën do të ketë boshllëqe aty ku ngjitësi nuk është ngjitur plotësisht në pllakën.

d. Për transportimin dhe transportimin e mostrave, mund ta gjeni të dobishme të vendosni një vulë plastike sipër vulës prej folie për mbrojtje shtesë (veçanërisht nga shpimi).

e. Sigurohuni gjithmonë që të mos ketë gunga ose rrudha kur aplikoni filmin - këto do të shkaktojnë rrjedhje dhe avullim.


Koha e postimit: 23 nëntor 2022