Sådan forsegles en PCR-plade

Introduktion

PCR plader, en fast bestanddel af laboratoriet i mange år, bliver endnu mere udbredt i moderne omgivelser, efterhånden som laboratorier opskalerer deres gennemløb og i stigende grad anvender automatisering i deres arbejdsgange.Det kan være svært at nå disse mål, samtidig med at eksperimenternes nøjagtighed og integritet bevares.Et af de fælles områder, hvor fejl kan snige sig ind, er ved tætning afPCR plader, med dårlig teknik, der tillader fordampning af prøver, ændrer pH og derfor forstyrrer enzymatiske funktioner og inviterer til kontaminering.At lære at forsegle enPCR pladeeliminerer disse risici korrekt og sikrer reproducerbare resultater.

Find den rigtige tætning til din PCR-plade

Pladehætter vs. filmforseglinger vs. låg
Kasketterer en god måde at forsegle din tallerken med en tæt forsegling, samtidig med at du stadig giver dig fleksibiliteten til meget nemt at aflukke og genforsegle pladen, som du har brug for uden spild.Caps har dog et par vigtige ulemper.

For det første skal du købe den specifikke kasket, der er kompatibel, hvilket gør dem ikke alsidige.Du skal sørge for, at den hætte, du vælger, passer til pladen, som er afhængig af dens producent, og vælge enten kuppelformet eller flad baseret på den termocykler, du bruger.

For det andet kan det være meget gentagende og kedeligt at påføre hætterne på pladen, med risiko for krydskontaminering, hvis du sætter den forkerte hætte på den forkerte brønd.

Selvom filmtætninger er mindre fleksible med hensyn til at fjerne og udskifte, er de meget alsidige, da de passer til enhver type PCR-plade, uden hensyntagen til, hvem producenten er.De kan simpelthen klippes til, hvilket gør dem meget effektive.

En anden mulighed er et tallerkenlåg.Disse giver mindre beskyttelse end hætter og forseglinger og bruges hovedsageligt kun til kortvarig dækning for at forhindre kontaminering.

Optiske vs. foliefilmtætninger

Uanset om du har brug for en optisk, klar forsegling eller enaluminiumsfolie filmat forsegle din tallerken bestemmes af dit eksperimentelle format.Optiske tætningsfilmer gennemsigtige, så du kan observere prøver, samtidig med at de beskytter dem og forhindrer fordampning.De er også særligt nyttige i qPCR-eksperimenter, som involverer at lave meget præcise målinger af fluorescens direkte fra pladen, i hvilket tilfælde du skal bruge en forseglingsfilm, der filtrerer så lidt fluorescens fra som muligt.Det er vigtigt at sikre, at den forsegling eller hætte, du bruger, har et højt nok niveau af optisk klarhed til at sikre, at aflæsningerne er nøjagtige.

Foliefilm er passende til alle prøver, der er lysfølsomme eller skal opbevares ved under 80°C.Af denne grund vil de fleste prøver bestemt til langtidsopbevaring kræve en foliefilm.Foliefilm kan også gennembores, hvilket er nyttigt til enten at undersøge individuelle brønde eller til overførsel af prøver med nåle.Dette kan ske manuelt eller som en del af en robotplatform.

Overvej også, at aggressive stoffer, der inkluderer syrer, baser eller opløsningsmidler, vil kræve en forsegling, der kan modstå dem, i hvilket tilfælde en folieforsegling sandsynligvis er mere passende.

Klæbende vs. varmeforseglingsfilm
Klæbende filmtætningerer meget ligetil og lette at anvende.Alt du behøver er, at en bruger påfører forseglingen på pladen og bruger et simpelt applikatorværktøj til at trykke ned og danne en tæt forsegling.

Varmeforseglinger er mere avancerede, hvilket giver en længerevarende forsegling, der har reduceret fordampningshastigheden sammenlignet med en konventionel klæbende forsegling.Denne mulighed er passende, hvis du ønsker at opbevare prøver på lang sigt, selvom dette kommer med et yderligere krav til pladeforseglingsudstyr.

Sådan forsegles en PCR-plade

Pladeforseglingsmetode

Selvklæbende

1. Sørg for, at du arbejder på en flad og stabil arbejdsflade

2. Tag filmen ud af emballagen, og fjern bagsiden

3. Anbring forsigtigt forseglingen på pladen, mens du sørger for, at alle brøndene er dækket

4. Brug et applikatorværktøj til at påføre tryk hen over pladen.Start fra den ene ende og arbejd dig over til den anden, og tryk jævnt

5. Gentag dette adskillige gange

6. Kør din applikator rundt om de udvendige brønde for at sikre, at disse også er ordentligt forseglet.

Varmeforseglinger

Varmeforseglinger virker ved at smelte filmen til kanten af ​​hver brønd ved hjælp af en pladeforsegler.For at betjene en varmeforsegler, se instruktionerne fra producenten af ​​udstyret.Sørg for, at producenten, du køber dit udstyr fra, er velrenommeret, da det er meget vigtigt, at tætningen er korrekt, effektiv og vandtæt.

Pladeforsegling Topspidser

en.Når du lægger pres på tætningen, skal du gå i både vandret og lodret retning for at sikre en ordentlig tætning

b.Det er altid god praksis at køre en testkørsel af, hvad end du laver, og det er ikke anderledes med pladeforsegling.Test med en tom plade, før du bruger en med prøver.

c.Når du tester, skal du tage forseglingen af ​​og se, om klæbemidlet satte sig ordentligt fast uden mellemrum.Der er en visuel fremstilling af dette i det første referencedokument.Hvis du ikke har forseglet pladen ordentligt, vil der, når du fjerner forseglingen, være huller, hvor klæberen ikke har sat sig helt fast på pladen.

d.Til forsendelse og transport af prøver kan det være nyttigt at påføre en plastikforsegling oven på folieforseglingen for ekstra beskyttelse (især mod piercing).

e.Sørg altid for, at der ikke er ujævnheder eller rynker, når du påfører filmen – disse vil forårsage utætheder og fordampning