Sissejuhatus
PCR plaadid, mis on labori põhiosa olnud aastaid, muutuvad tänapäevases keskkonnas veelgi levinumaks, kuna laborid suurendavad oma läbilaskevõimet ja kasutavad oma töövoogudes üha enam automatiseerimist.Nende eesmärkide saavutamine, säilitades samal ajal katsete täpsuse ja terviklikkuse, võib olla keeruline.Üks levinumaid kohti, kuhu võivad vead sisse hiilida, on tihendaminePCR plaadid, halva tehnikaga, mis võimaldab proovide aurustumist, muudab pH-d ja häirib seetõttu ensümaatilisi funktsioone ning kutsub esile saastumist.Õppimine pitseerima aPCR plaatkõrvaldab need riskid õigesti ja tagab reprodutseeritavad tulemused.
Leidke oma PCR-plaadile õige tihend
Plaadikorgid vs kiletihendid vs kaaned
Capson hea viis plaadi tihendamiseks tiheda tihendiga, pakkudes samas paindlikkust plaadi väga hõlpsaks lahtivõtmiseks ja uuesti sulgemiseks ilma jäätmeteta.Korkidel on siiski paar peamist puudust.
Esiteks peate ostma konkreetse ühilduva korgi, mis muudab need mitte mitmekülgseks.Peate veenduma, et valitud kork sobiks plaadiga, mis sõltub selle tootjast, ja valima kas kuplikujulise või tasapinnalise vastavalt kasutatavale termotsüklerile.
Teiseks võib korkide plaadile panemine olla väga korduv ja tüütu ning sellega kaasneb ristsaastumise oht, kui panete vale korgi valele süvendile.
Kuigi kiletihendid on eemaldamisel ja asendamisel vähem paindlikud, on need väga mitmekülgsed, kuna need sobivad igat tüüpi PCR-plaatidega, sõltumata tootjast.Neid saab lihtsalt mõõtu lõigata, muutes need väga tõhusaks.
Teine võimalus on plaadi kaas.Need pakuvad vähem kaitset kui korgid ja tihendid ning neid kasutatakse peamiselt ainult lühiajaliseks katmiseks, et vältida saastumist.
Optilised vs fooliumkile tihendid
Kas vajate optilist, läbipaistvat tihendit võialumiiniumfooliumkileplaadi pitseerimise otsustab teie katsevorm.Optilised tihenduskiledon läbipaistvad, et saaksite proove jälgida, kaitstes neid ja vältides samal ajal aurustumist.Need on eriti kasulikud ka qPCR-katsetes, mis hõlmavad fluorestsentsi ülitäpseid mõõtmisi otse plaadilt. Sel juhul vajate tihenduskilet, mis filtreerib välja võimalikult vähe fluorestsentsi.Oluline on veenduda, et kasutataval tihendil või korgil on piisavalt kõrge optilise selguse tase, et tagada näitude täpsus.
Fooliumkiled sobivad kõikidele proovidele, mis on valgustundlikud või mida tuleb hoida temperatuuril alla 80°C.Sel põhjusel vajab enamik pikaajaliseks säilitamiseks mõeldud proove fooliumkilet.Ka fooliumkiled on läbitavad, mis on kasulik kas üksikute süvendite uurimiseks või proovide nõelte abil ülekandmiseks.See võib toimuda käsitsi või robotplatvormi osana.
Arvestage ka sellega, et agressiivsed ained, mis sisaldavad happeid, aluseid või lahusteid, nõuavad tihendit, mis peab neile vastu. Sel juhul on fooliumiga tihend tõenäoliselt sobivam.
Liim vs kuumtihenduskile
Kleepkile tihendidon väga sirgjoonelised ja hõlpsasti rakendatavad.Kõik, mida vajate, on see, et kasutaja kinnitaks plaadile tihendi ja vajutaks lihtsa aplikaatori tööriistaga alla ja moodustaks tiheda tihendi.
Kuumtihendid on täiustatud, pakkudes kauem kestvat tihendit, millel on tavapärase kleepuva tihendiga võrreldes väiksem aurustumiskiirus.See valik on asjakohane, kui soovite proove pikaajaliselt säilitada, kuigi sellega kaasneb täiendav nõue plaatide sulgemisseadmetele.
Kuidas PCR-plaati pitseerida
Plaadi tihendamise meetod
Isekleepuv
1. Veenduge, et töötate tasasel ja stabiilsel tööpinnal
2. Eemaldage kile pakendist ja eemaldage kate
3. Asetage tihend ettevaatlikult plaadile, tagades samal ajal, et kõik süvendid on kaetud
4. Kasutage plaadile surve avaldamiseks aplikaatortööriista.Alustage ühest otsast ja liikuge ühtlaselt vajutades teise otsa
5. Korrake seda mitu korda
6. Käivitage aplikaator ümber välimiste süvendite, veendumaks, et need on korralikult suletud.
Kuumutihendid
Kuumtihendid sulavad kile iga süvendi servani plaaditihendaja abil.Kuumtihendaja kasutamiseks vaadake seadme tootja antud juhiseid.Veenduge, et tootja, kellelt seadme hankite, on hea mainega, sest on väga oluline, et tihend oleks korralik, tõhus ja veekindel.
Plaatide tihendamise ülaosad
a.Tihendile survet avaldades liikuge nii horisontaal- kui ka vertikaalsuunas, et tagada korralik tihend
b.Alati on hea tava katsetada kõike, mida teete, ja see ei erine plaaditihendiga.Enne proovidega plaadi kasutamist testige tühja plaadiga.
c.Katsetamisel eemaldage tihend ja vaadake, et liim oleks korralikult kinni jäänud, ilma tühikuteta.Esimeses viitedokumendis on see visuaalne kujutis.Kui te ei ole plaati korralikult tihendanud, tekivad tihendi eemaldamisel tühimikud, kus liim ei ole plaadiga täielikult nakkunud.
d.Proovide saatmisel ja transportimisel võib olla kasulik paigaldada fooliumitihendi peale plasttihend, et tagada täiendav kaitse (eriti läbitorkamise eest).
e.Alati veenduge, et kile pealekandmisel poleks muhke ega kortse – need põhjustavad lekkeid ja aurustumist
Postitusaeg: 23.11.2022