Въведение
PCR плаки, основна част от лабораторията в продължение на много години, стават още по-разпространени в съвременната среда, тъй като лабораториите увеличават своята производителност и все повече използват автоматизация в своите работни процеси.Постигането на тези цели при запазване на точността и целостта на експериментите може да бъде трудно.Една от често срещаните области, в които могат да се промъкнат грешки, е запечатването наPCR плаки, с лоша техника, позволяваща изпаряване на пробите, променяйки рН и следователно нарушавайки ензимните функции и предизвиквайки замърсяване.Да се научите как да запечатвате aPCR плакаправилно елиминира тези рискове и гарантира възпроизводими резултати.
Намерете правилното уплътнение за вашата PCR плака
Капачки за плочи срещу филмови уплътнения срещу капаци
капачкиса добър начин да запечатате плочата си плътно, като същевременно ви дават гъвкавостта много лесно да разпечатвате и запечатвате отново плочата, както ви е необходимо, без никакви отпадъци.Капачките обаче имат няколко основни недостатъка.
Първо, ще трябва да закупите конкретната капачка, която е съвместима, което ги прави неуниверсални.Ще трябва да се уверите, че избраната от вас капачка пасва на плочата, което зависи от нейния производител, и изберете куполна или плоска въз основа на термоциклера, който използвате.
Второ, поставянето на капачките върху плаката може да бъде много повтарящо се и досадно, с риск от кръстосано замърсяване, ако поставите грешната капачка върху грешната ямка.
Въпреки че филмовите уплътнения са по-малко гъвкави по отношение на премахване и подмяна, те са много гъвкави, тъй като пасват на всеки тип PCR плака, независимо кой е производителят.Те могат просто да бъдат изрязани по размер, което ги прави много ефективни.
Друг вариант е капак за чиния.Те предлагат по-малка защита от капачките и уплътненията и се използват главно само за краткотрайно покритие за предотвратяване на замърсяване.
Оптични срещу фолиеви уплътнения
Независимо дали имате нужда от оптично, прозрачно уплътнение илифилм от алуминиево фолиода запечатате вашата чиния се определя от вашия експериментален формат.Оптично запечатващо фолиоса прозрачни, за да ви позволят да наблюдавате пробите, като същевременно ги предпазвате и предотвратявате изпарението.Те също така са особено полезни при qPCR експерименти, които включват извършване на много прецизни измервания на флуоресценцията директно от плаката, в който случай ще ви е необходим запечатващ филм, който филтрира възможно най-малко флуоресценция.Важно е да се уверите, че уплътнението или капачката, които използвате, има достатъчно високо ниво на оптична чистота, за да сте сигурни, че показанията са точни.
Фолиевите филми са подходящи за всякакви проби, които са чувствителни към светлина или трябва да се съхраняват при температура под 80°C.Поради тази причина повечето проби, предназначени за дългосрочно съхранение, ще изискват фолио.Фолиевите филми също могат да се пробият, което е полезно или за изследване на отделни ямки, или за прехвърляне на проби с игли.Това може да стане ръчно или като част от роботизирана платформа.
Имайте предвид също, че агресивните вещества, които включват киселини, основи или разтворители, ще изискват уплътнение, което може да ги издържи, в който случай уплътнението от фолио вероятно е по-подходящо.
Лепило срещу термозапечатващо фолио
Уплътнения с лепилоса много ясни и лесни за прилагане.Всичко, от което се нуждаете, е потребителят да постави уплътнението върху плочата и да използва прост апликатор, за да притисне надолу и да оформи плътно уплътнение.
Топлинните уплътнения са по-усъвършенствани, осигуряват по-дълготрайно уплътнение, което има намалени скорости на изпарение в сравнение с конвенционалното залепващо уплътнение.Тази опция е подходяща, ако искате да съхранявате проби в дългосрочен план, въпреки че това идва с допълнително изискване за оборудване за запечатване на плочи.
Как да запечатате PCR плака
Метод за запечатване на плоча
Самозалепващ
1. Уверете се, че работите върху равна и стабилна работна повърхност
2. Извадете фолиото от опаковката и отстранете подложката
3. Внимателно поставете уплътнението върху плаката, като се уверите, че всички ямки са покрити
4. Използвайте апликатор, за да приложите натиск върху плочата.Започнете от единия край и преминете към другия, като натискате равномерно
5. Повторете това много пъти
6. Прокарайте апликатора си около външните ямки, за да се уверите, че те също са правилно запечатани.
Топлинни уплътнения
Топлинните запечатвания работят чрез разтопяване на филма до ръба на всяка ямка с помощта на уплътнител за плочи.За да работите с термоуплътнител, вижте инструкциите, предоставени от производителя на оборудването.Уверете се, че производителят, от който доставяте вашето оборудване, е реномиран, тъй като е много важно уплътнението да е правилно, ефективно и водоустойчиво.
Горни съвети за запечатване на плочи
а.Когато прилагате натиск върху уплътнението, вървете както в хоризонтална, така и във вертикална посока, за да осигурите правилно уплътнение
b.Винаги е добра практика да пуснете пробно изпълнение на каквото и да правите и това не е по-различно при запечатването на плочата.Тествайте с празна чиния, преди да използвате такава с проби.
° С.Когато тествате, свалете уплътнението и вижте дали лепилото е залепнало правилно, без пропуски.Има визуално представяне на това в първия справочен документ.Ако не сте запечатали плочата правилно, когато премахнете уплътнението, ще има празнини, където лепилото не се е залепило напълно към плочата.
д.За изпращане и транспортиране на проби може да откриете, че е полезно да поставите пластмасово уплътнение върху уплътнението с фолио за допълнителна защита (особено от пробиване).
д.Винаги се уверявайте, че няма неравности или бръчки, когато нанасяте фолиото – те ще причинят течове и изпаряване
Време на публикуване: 23 ноември 2022 г