Einführung
PCR-Platten, seit vielen Jahren ein fester Bestandteil des Labors, gewinnen in der modernen Umgebung immer mehr an Bedeutung, da Labore ihren Durchsatz steigern und in ihren Arbeitsabläufen zunehmend Automatisierung einsetzen.Es kann schwierig sein, diese Ziele zu erreichen und gleichzeitig die Genauigkeit und Integrität der Experimente zu wahren.Einer der häufigsten Bereiche, in denen sich Fehler einschleichen können, ist die Versiegelung vonPCR-Platten, mit schlechter Technik, die das Verdampfen von Proben ermöglicht, den pH-Wert verändert und dadurch enzymatische Funktionen stört und zu Kontaminationen führt.Lernen, wie man a versiegeltPCR-Plattebeseitigt diese Risiken korrekt und sorgt für reproduzierbare Ergebnisse.
Finden Sie die richtige Dichtung für Ihre PCR-Platte
Plattenkappen vs. Foliensiegel vs. Deckel
Kappensind eine gute Möglichkeit, Ihre Platte dicht zu verschließen und Ihnen gleichzeitig die Flexibilität zu geben, die Platte je nach Bedarf ganz einfach zu öffnen und wieder zu verschließen, ohne dass Abfall entsteht.Allerdings haben Kappen einige wesentliche Nachteile.
Erstens müssen Sie die spezifische kompatible Kappe kaufen, was sie nicht vielseitig einsetzbar macht.Sie müssen sicherstellen, dass die von Ihnen gewählte Kappe auf die Platte passt, was vom Hersteller abhängt, und je nach verwendetem Thermocycler entweder gewölbt oder flach wählen.
Zweitens kann das Anbringen der Kappen auf der Platte sehr eintönig und mühsam sein, wobei das Risiko einer Kreuzkontamination besteht, wenn Sie die falsche Kappe auf die falsche Vertiefung setzen.
Während sich Folienversiegelungen weniger flexibel entfernen und ersetzen lassen, sind sie sehr vielseitig, da sie auf jede Art von PCR-Platte passen, unabhängig vom Hersteller.Sie können einfach zugeschnitten werden und sind daher sehr effektiv.
Eine weitere Option ist ein Tellerdeckel.Diese bieten weniger Schutz als Kappen und Siegel und werden hauptsächlich nur zur kurzfristigen Abdeckung verwendet, um eine Kontamination zu verhindern.
Optische vs. Folienfoliensiegel
Ob Sie eine optische, klare Versiegelung oder eine benötigenAluminiumfolieWie Sie Ihre Platte versiegeln, hängt von Ihrem experimentellen Format ab.Optische Versiegelungsfoliensind transparent, um die Beobachtung der Proben zu ermöglichen und sie gleichzeitig zu schützen und Verdunstung zu verhindern.Sie sind auch besonders nützlich bei qPCR-Experimenten, bei denen hochpräzise Fluoreszenzmessungen direkt von der Platte durchgeführt werden. In diesem Fall benötigen Sie eine Dichtungsfolie, die möglichst wenig Fluoreszenz herausfiltert.Es ist wichtig sicherzustellen, dass die von Ihnen verwendete Dichtung oder Kappe über eine ausreichend hohe optische Klarheit verfügt, um genaue Messwerte zu gewährleisten.
Folienfilme eignen sich für alle Proben, die lichtempfindlich sind oder bei unter 80 °C gelagert werden sollen.Aus diesem Grund benötigen die meisten Proben, die zur Langzeitlagerung bestimmt sind, eine Folienfolie.Folienfolien sind außerdem durchstechbar, was entweder für die Untersuchung einzelner Vertiefungen oder für den Probentransfer mit Nadeln nützlich ist.Dies kann manuell oder als Teil einer Roboterplattform erfolgen.
Bedenken Sie auch, dass aggressive Substanzen wie Säuren, Basen oder Lösungsmittel eine Versiegelung erfordern, die ihnen standhält. In diesem Fall ist eine Folienversiegelung wahrscheinlich besser geeignet.
Klebstoff vs. Heißsiegelfolie
Klebefoliendichtungensind sehr unkompliziert und einfach anzuwenden.Alles, was Sie brauchen, ist, dass ein Benutzer die Versiegelung auf die Platte aufträgt und mit einem einfachen Applikatorwerkzeug nach unten drückt und eine dichte Versiegelung bildet.
Heißsiegelungen sind fortschrittlicher und bieten eine länger anhaltende Versiegelung mit geringeren Verdunstungsraten im Vergleich zu einer herkömmlichen Klebeversiegelung.Diese Option eignet sich, wenn Sie Proben langfristig lagern möchten, allerdings sind hierfür zusätzliche Geräte zur Plattenversiegelung erforderlich.
So versiegeln Sie eine PCR-Platte
Plattenversiegelungsmethode
Selbstklebend
1. Stellen Sie sicher, dass Sie auf einer ebenen und stabilen Arbeitsfläche arbeiten
2. Nehmen Sie die Folie aus der Verpackung und entfernen Sie die Schutzfolie
3. Platzieren Sie die Dichtung vorsichtig auf der Platte und achten Sie dabei darauf, dass alle Vertiefungen abgedeckt sind
4. Verwenden Sie ein Applikatorwerkzeug, um Druck auf die Platte auszuüben.Beginnen Sie an einem Ende und arbeiten Sie sich mit gleichmäßigem Druck zum anderen vor
5. Wiederholen Sie dies mehrmals
6. Führen Sie Ihren Applikator um die äußeren Vertiefungen herum, um sicherzustellen, dass diese ebenfalls ordnungsgemäß abgedichtet sind.
Heißsiegel
Beim Heißsiegeln wird die Folie mit Hilfe eines Plattenversiegelers am Rand jeder Vertiefung angeschmolzen.Informationen zum Betrieb eines Heißsiegelgeräts finden Sie in den Anweisungen des Herstellers des Geräts.Stellen Sie sicher, dass der Hersteller, von dem Sie Ihre Ausrüstung beziehen, seriös ist, da es sehr wichtig ist, dass die Versiegelung ordnungsgemäß, wirksam und wasserdicht ist.
Top-Tipps zur Plattenversiegelung
A.Wenn Sie Druck auf die Dichtung ausüben, gehen Sie sowohl in horizontaler als auch in vertikaler Richtung vor, um eine ordnungsgemäße Abdichtung zu gewährleisten
B.Es empfiehlt sich immer, einen Testlauf Ihrer Arbeit durchzuführen, und das ist bei der Plattenversiegelung nicht anders.Testen Sie mit einer leeren Platte, bevor Sie eine mit Proben verwenden.
C.Nehmen Sie beim Testen die Dichtung ab und prüfen Sie, ob der Kleber richtig und ohne Lücken haftet.Eine visuelle Darstellung hierzu finden Sie im ersten Referenzdokument.Wenn Sie die Platte nicht ordnungsgemäß versiegelt haben, entstehen beim Entfernen der Versiegelung Lücken, in denen der Klebstoff nicht vollständig mit der Platte verbunden ist.
D.Für den Versand und Transport von Proben kann es hilfreich sein, für zusätzlichen Schutz (insbesondere vor Durchstechen) eine Kunststoffversiegelung über der Folienversiegelung anzubringen.
e.Achten Sie stets darauf, dass beim Anbringen der Folie keine Unebenheiten oder Falten entstehen – diese führen zu Undichtigkeiten und Verdunstung
Zeitpunkt der Veröffentlichung: 23. November 2022