Cách niêm phong một tấm PCR

Giới thiệu

Đĩa PCR, một mặt hàng chủ lực của phòng thí nghiệm trong nhiều năm, đang trở nên phổ biến hơn nữa trong bối cảnh hiện đại khi các phòng thí nghiệm mở rộng quy mô thông lượng và ngày càng sử dụng tự động hóa trong quy trình làm việc của họ. Đạt được các mục tiêu này trong khi vẫn bảo toàn được độ chính xác và tính toàn vẹn của các thí nghiệm có thể là điều khó khăn. Một trong những lĩnh vực phổ biến mà lỗi có thể xảy ra là với việc niêm phongĐĩa PCR, với kỹ thuật kém cho phép mẫu bốc hơi, thay đổi độ pH và do đó phá vỡ chức năng của enzym và gây ô nhiễm. Học cách niêm phongĐĩa PCRloại bỏ đúng những rủi ro này và đảm bảo kết quả có thể tái tạo được.

Tìm đúng loại Seal cho đĩa PCR của bạn

Nắp tấm so với Nắp phim so với Nắp đậy
Mũlà một cách tốt để niêm phong đĩa của bạn bằng một lớp niêm phong chặt chẽ, đồng thời vẫn mang lại cho bạn sự linh hoạt để dễ dàng tháo và niêm phong lại đĩa khi cần mà không lãng phí. Tuy nhiên, nắp đậy có một vài nhược điểm chính.

Đầu tiên, bạn sẽ phải mua loại nắp tương thích cụ thể, khiến chúng không đa năng. Bạn sẽ phải đảm bảo rằng nắp bạn chọn vừa với tấm, tùy thuộc vào nhà sản xuất và chọn loại có mái vòm hoặc phẳng dựa trên máy tuần hoàn nhiệt bạn đang sử dụng.

Thứ hai, việc lắp nắp vào đĩa có thể rất lặp đi lặp lại và tẻ nhạt, với nguy cơ lây nhiễm chéo nếu bạn lắp nhầm nắp vào giếng sai.

Trong khi màng niêm phong ít linh hoạt hơn về mặt tháo lắp và thay thế, chúng rất đa năng vì chúng sẽ phù hợp với bất kỳ loại đĩa PCR nào, bất kể nhà sản xuất là ai. Chúng có thể dễ dàng cắt theo kích thước, khiến chúng rất hiệu quả.

Một lựa chọn khác là nắp đĩa. Chúng bảo vệ kém hơn nắp và miếng đệm, và chủ yếu chỉ được sử dụng để che phủ tạm thời nhằm ngăn ngừa ô nhiễm.

Con dấu quang học so với con dấu màng mỏng

Cho dù bạn yêu cầu một con dấu quang học, rõ ràng hay mộtmàng nhômviệc niêm phong đĩa của bạn được quyết định bởi định dạng thử nghiệm của bạn.Phim niêm phong quang họctrong suốt để bạn có thể quan sát mẫu, đồng thời vẫn bảo vệ chúng và ngăn ngừa sự bay hơi. Chúng cũng đặc biệt hữu ích trong các thí nghiệm qPCR liên quan đến việc thực hiện các phép đo huỳnh quang cực kỳ chính xác trực tiếp từ đĩa, trong trường hợp đó, bạn sẽ cần một màng niêm phong lọc được càng ít huỳnh quang càng tốt. Điều quan trọng là phải đảm bảo rằng lớp niêm phong hoặc nắp bạn đang sử dụng có độ trong suốt quang học đủ cao để đảm bảo các phép đo chính xác.

Màng nhôm thích hợp cho bất kỳ mẫu nào nhạy cảm với ánh sáng hoặc được lưu trữ ở nhiệt độ dưới 80°C. Vì lý do này, hầu hết các mẫu được lưu trữ lâu dài sẽ cần màng nhôm. Màng nhôm cũng có thể đâm thủng, hữu ích cho việc kiểm tra từng giếng riêng lẻ hoặc để chuyển mẫu bằng kim. Điều này có thể thực hiện thủ công hoặc như một phần của nền tảng rô bốt.

Ngoài ra, hãy cân nhắc rằng các chất có tính ăn mòn như axit, bazơ hoặc dung môi sẽ cần một lớp phủ có thể chịu được chúng, trong trường hợp đó, lớp phủ bằng lá nhôm có thể phù hợp hơn.

Keo dán so với màng dán nhiệt
Màng keo dán kínrất đơn giản và dễ áp ​​dụng. Người dùng chỉ cần dán keo lên tấm và sử dụng dụng cụ bôi keo đơn giản để ấn xuống và tạo thành lớp keo dán chặt.

Niêm phong nhiệt tiên tiến hơn, cung cấp lớp niêm phong lâu dài hơn, giảm tỷ lệ bay hơi so với lớp niêm phong keo thông thường. Tùy chọn này phù hợp nếu bạn muốn lưu trữ mẫu trong thời gian dài, mặc dù điều này đi kèm với yêu cầu bổ sung về thiết bị niêm phong tấm.

Cách niêm phong một tấm PCR

Phương pháp niêm phong tấm

Tự dính

1. Đảm bảo bạn đang làm việc trên một bề mặt phẳng và ổn định

2. Tháo màng phim ra khỏi bao bì và tháo lớp lót

3. Cẩn thận đặt miếng niêm phong lên đĩa, đồng thời đảm bảo rằng tất cả các lỗ đều được che phủ

4. Sử dụng dụng cụ bôi để tạo áp lực lên tấm. Bắt đầu từ một đầu và di chuyển sang đầu kia, ấn đều

5. Lặp lại điều này nhiều lần

6. Di chuyển dụng cụ bôi thuốc xung quanh các lỗ bên ngoài để đảm bảo chúng cũng được bịt kín đúng cách.

Niêm phong nhiệt

Niêm phong nhiệt hoạt động bằng cách làm tan chảy lớp màng vào vành của mỗi giếng, với sự trợ giúp của máy hàn tấm. Để vận hành máy hàn nhiệt, hãy tham khảo hướng dẫn do nhà sản xuất thiết bị cung cấp. Đảm bảo rằng nhà sản xuất mà bạn lấy thiết bị từ đó có uy tín, vì điều rất quan trọng là lớp niêm phong phải phù hợp, hiệu quả và không thấm nước.

Mẹo hàng đầu về cách niêm phong tấm

a. Khi tạo áp lực lên miếng đệm, hãy thực hiện theo cả chiều ngang và chiều dọc để đảm bảo độ kín thích hợp

b. Luôn luôn là một thói quen tốt khi chạy thử bất cứ điều gì bạn đang làm, và điều này cũng không khác gì với việc niêm phong tấm. Hãy thử nghiệm với một tấm rỗng trước khi sử dụng một tấm có mẫu.

c. Khi thử nghiệm, hãy tháo lớp niêm phong và kiểm tra xem keo dán có bám chặt không, không có khoảng hở. Có hình ảnh minh họa về điều này trong tài liệu tham khảo đầu tiên. Nếu bạn chưa niêm phong tấm đúng cách, khi bạn tháo lớp niêm phong sẽ có những khoảng hở mà keo dán chưa bám chặt hoàn toàn vào tấm.

d. Khi vận chuyển và chuyên chở mẫu, bạn có thể thấy hữu ích khi phủ một lớp niêm phong nhựa lên trên lớp niêm phong bằng giấy bạc để bảo vệ thêm (đặc biệt là chống đâm thủng).

e. Luôn đảm bảo không có vết lồi hay nếp nhăn khi dán phim – những vết lồi hay nếp nhăn này sẽ gây rò rỉ và bay hơi