Ako uzavrieť PCR platňu

Úvod

PCR platne, ktoré sú už mnoho rokov základom laboratórií, sa v modernom prostredí stávajú ešte rozšírenejšími, keďže laboratóriá zvyšujú svoju priepustnosť a čoraz viac využívajú automatizáciu vo svojich pracovných postupoch. Dosiahnutie týchto cieľov pri zachovaní presnosti a integrity experimentov môže byť náročné. Jednou z bežných oblastí, kde sa môžu vyskytnúť chyby, je utesňovaniePCR platne, pričom nesprávna technika umožňuje odparovanie vzoriek, mení pH a tým narúša enzymatické funkcie a priláka kontamináciu. Naučiť sa, ako uzavrieťPCR platňasprávne eliminuje tieto riziká a zabezpečuje reprodukovateľné výsledky.

Nájdite si správnu plombu pre vašu PCR platňu

Uzávery dosiek vs. fóliové tesnenia vs. viečka
Čiapkysú dobrým spôsobom, ako pevne uzavrieť tanier a zároveň vám poskytujú flexibilitu veľmi ľahko ho otvoriť a znova uzavrieť podľa potreby bez akéhokoľvek odpadu. Vrchnáky však majú niekoľko kľúčových nevýhod.

Po prvé, budete si musieť kúpiť špecifický kompatibilný uzáver, čo ich robí nie všestrannými. Budete sa musieť uistiť, že uzáver, ktorý si vyberiete, pasuje na platňu, čo závisí od jej výrobcu, a vybrať si buď klenutý, alebo plochý tvar v závislosti od používaného termocykléra.

Po druhé, nasadzovanie uzáverov na platňu môže byť veľmi opakujúce sa a zdĺhavé, s rizikom krížovej kontaminácie, ak nasadíte nesprávny uzáver na nesprávnu jamku.

Hoci sú fóliové tesnenia menej flexibilné, čo sa týka odstraňovania a výmeny, sú veľmi všestranné, pretože sa hodia na akýkoľvek typ PCR platne bez ohľadu na výrobcu. Dajú sa jednoducho narezať na požadovanú veľkosť, vďaka čomu sú veľmi účinné.

Ďalšou možnosťou je veko v tvare dosky. Tieto ponúkajú menšiu ochranu ako uzávery a tesnenia a používajú sa hlavne na krátkodobé zakrytie, aby sa zabránilo kontaminácii.

Optické vs. fóliové fóliové tesnenia

Či už potrebujete optické, priehľadné tesnenie alebohliníková fóliaZapečatenie vášho taniera závisí od vášho experimentálneho formátu.Optické tesniace fóliesú priehľadné, aby ste mohli pozorovať vzorky a zároveň ich chránili a zabránili odparovaniu. Sú tiež obzvlášť užitočné v experimentoch qPCR, ktoré zahŕňajú vykonávanie vysoko presných meraní fluorescencie priamo z platne, v takom prípade budete potrebovať tesniacu fóliu, ktorá filtruje čo najmenej fluorescencie. Je dôležité uistiť sa, že tesnenie alebo uzáver, ktorý používate, má dostatočne vysokú úroveň optickej čistoty, aby sa zabezpečila presnosť údajov.

Fóliové fólie sú vhodné pre všetky vzorky, ktoré sú citlivé na svetlo alebo sa majú skladovať pri teplote pod 80 °C. Z tohto dôvodu väčšina vzoriek určených na dlhodobé skladovanie vyžaduje fóliovú fóliu. Fóliové fólie sú tiež prepichnuteľné, čo je užitočné buď na skúmanie jednotlivých jamiek, alebo na prenos vzoriek pomocou ihiel. To sa môže diať manuálne alebo ako súčasť robotickej platformy.

Zvážte tiež, že agresívne látky, ktoré zahŕňajú kyseliny, zásady alebo rozpúšťadlá, si budú vyžadovať tesnenie, ktoré im odolá, v takom prípade je pravdepodobne vhodnejšie fóliové tesnenie.

Lepiaca vs. tepelne tesniaca fólia
Lepiace fóliové tesneniasú veľmi priamočiare a ľahko sa nanášajú. Všetko, čo potrebujete, je naniesť tesnenie na platňu a pomocou jednoduchého aplikátora ho pritlačiť a vytvoriť tesné tesnenie.

Tepelné zváranie je pokročilejšie a poskytuje dlhšie trvajúce zváranie s nižšou rýchlosťou odparovania v porovnaní s konvenčným lepiacim zváraním. Táto možnosť je vhodná, ak chcete vzorky dlhodobo skladovať, hoci to so sebou prináša dodatočné požiadavky na zariadenie na zváranie platní.

Ako uzavrieť PCR platňu

Metóda utesňovania dosiek

Samolepiace

1. Uistite sa, že pracujete na rovnom a stabilnom pracovnom povrchu

2. Vyberte fóliu z obalu a odstráňte podkladovú vrstvu

3. Opatrne umiestnite tesnenie na platňu a uistite sa, že sú všetky jamky zakryté.

4. Pomocou aplikátora vyvíjajte tlak na platničku. Začnite od jedného konca a rovnomerne tlačte na druhý.

5. Opakujte to niekoľkokrát

6. Prejdite aplikátorom okolo vonkajších jamiek, aby ste sa uistili, že sú aj tieto správne utesnené.

Tepelné tesnenia

Tepelné uzávery fungujú tak, že sa fólia nataví na okraj každej jamky pomocou tesniaceho zariadenia na platne. Pri obsluhe tepelného tesniaceho zariadenia sa riaďte pokynmi výrobcu zariadenia. Uistite sa, že výrobca, od ktorého zariadenie kupujete, je renomovaný, pretože je veľmi dôležité, aby bolo uzáver správne, účinný a vodotesný.

Horné hroty na utesnenie dosiek

a. Pri vyvíjaní tlaku na tesnenie postupujte v horizontálnom aj vertikálnom smere, aby ste zabezpečili správne utesnenie.

b. Vždy je dobrým zvykom vykonať skúšobnú prevádzku čohokoľvek, čo robíte, a to nie je inak ani pri zatavovaní platní. Pred použitím platne so vzorkami otestujte s prázdnou platňou.

c. Pri testovaní odstráňte tesnenie a skontrolujte, či lepidlo správne priľnulo bez medzier. Vizuálne znázornenie je uvedené v prvom referenčnom dokumente. Ak ste platňu správne neutesnili, po odstránení tesnenia zostanú medzery tam, kde sa lepidlo úplne neprilepilo k platni.

d. Pri preprave a preprave vzoriek môže byť užitočné naniesť na fóliovú plombu plastovú plombu, aby sa zabezpečila dodatočná ochrana (najmä pred prepichnutím).

e. Pri aplikácii fólie sa vždy uistite, že nie sú žiadne hrbole alebo vrásky – spôsobili by úniky a odparovanie