Introduksjon
PCR plater, en stift i laboratoriet i mange år, blir enda mer utbredt i moderne omgivelser ettersom laboratorier skalerer opp sin gjennomstrømning og i økende grad bruker automatisering i arbeidsflytene sine.Det kan være vanskelig å oppnå disse målene og samtidig bevare nøyaktigheten og integriteten til eksperimenter.Et av fellesområdene hvor feil kan snike seg inn er ved tetting avPCR plater, med dårlig teknikk som tillater fordampning av prøver, endrer pH og derfor forstyrrer enzymatiske funksjoner, og inviterer til forurensning.Lære å forsegle enPCR plateeliminerer disse risikoene på riktig måte og sikrer reproduserbare resultater.
Finn riktig forsegling for PCR-platen
Platelokk vs. filmforseglinger vs. lokk
Capser en god måte å forsegle tallerkenen din med en tett forsegling, samtidig som den gir deg fleksibiliteten til å enkelt løsne og forsegle tallerkenen etter behov uten avfall.Caps har imidlertid et par viktige ulemper.
For det første må du kjøpe den spesifikke hetten som er kompatibel, noe som gjør dem ikke allsidige.Du må sørge for at hetten du velger passer til platen, som er avhengig av produsenten, og velge enten kuppelformet eller flat basert på termosykleren du bruker.
For det andre kan det å påføre hettene på platen være svært repeterende og kjedelig, med fare for krysskontaminering hvis du setter feil hette på feil brønn.
Selv om filmforseglinger er mindre fleksible når det gjelder fjerning og utskifting, er de svært allsidige ettersom de passer til alle typer PCR-plater, uten hensyn til hvem produsenten er.De kan ganske enkelt kuttes til, noe som gjør dem svært effektive.
Et annet alternativ er et platelokk.Disse gir mindre beskyttelse enn hetter og tetninger, og brukes hovedsakelig kun til kortsiktig dekning for å forhindre forurensning.
Optiske vs. folieforseglinger
Enten du trenger en optisk, klar forsegling eller enaluminiumsfolie filmå forsegle tallerkenen din bestemmes av ditt eksperimentelle format.Optiske tetningsfilmerer gjennomsiktige slik at du kan observere prøver, samtidig som de beskytter dem og forhindrer fordampning.De er også spesielt nyttige i qPCR-eksperimenter som innebærer å gjøre svært presise målinger av fluorescens direkte fra platen, i så fall trenger du en forseglingsfilm som filtrerer ut så lite fluorescens som mulig.Det er viktig å sørge for at forseglingen eller hetten du bruker har et høyt nok nivå av optisk klarhet til å sikre at avlesningene er nøyaktige.
Foliefilmer er passende for alle prøver som er lysfølsomme eller som skal lagres ved under 80°C.Av denne grunn vil de fleste prøver som er bestemt for langtidslagring kreve en foliefilm.Foliefilmer er også gjennomstikkbare, noe som er nyttig for enten å undersøke individuelle brønner, eller for overføring av prøver med nåler.Dette kan skje manuelt eller som en del av en robotplattform.
Tenk også på at aggressive stoffer som inkluderer syrer, baser eller løsemidler vil kreve en forsegling som tåler dem, i så fall er en folieforsegling sannsynligvis mer passende.
Selvklebende vs. varmeforseglingsfilm
Selvklebende filmforseglingerer veldig enkle og enkle å påføre.Alt du trenger er at en bruker påfører forseglingen på platen, og bruker et enkelt applikatorverktøy for å trykke ned og danne en tett forsegling.
Varmeforseglinger er mer avanserte, og gir en lengre varig forsegling som har reduserte fordampningshastigheter sammenlignet med en konvensjonell limforsegling.Dette alternativet er passende hvis du ønsker å lagre prøver på lang sikt, selv om dette kommer med et tilleggskrav for plateforseglingsutstyr.
Hvordan forsegle en PCR-plate
Plateforseglingsmetode
Selvklebende
1. Sørg for at du arbeider på en flat og stabil arbeidsflate
2. Ta filmen ut av emballasjen, og fjern baksiden
3. Plasser forseglingen forsiktig på platen, mens du sørger for at alle brønnene er dekket
4. Bruk et applikatorverktøy for å legge press over platen.Start fra den ene enden og jobb deg over til den andre, press jevnt
5. Gjenta dette flere ganger
6. Kjør applikatoren rundt de ytre brønnene for å sikre at disse også er ordentlig forseglet.
Varmeforseglinger
Varmforseglinger fungerer ved å smelte filmen til kanten av hver brønn, ved hjelp av en plateforsegler.For å bruke en varmeforsegler, se instruksjonene fra produsenten av utstyret.Sørg for at produsenten du henter utstyret ditt fra er anerkjent, da det er svært viktig at forseglingen er riktig, effektiv og vanntett.
Plateforsegling toppspisser
en.Når du trykker på tetningen, gå i både horisontal og vertikal retning for å sikre en skikkelig tetning
b.Det er alltid god praksis å kjøre en testkjøring av hva du enn gjør, og dette er ikke annerledes med plateforsegling.Test med en tom plate før du bruker en med prøver.
c.Når du tester, ta av forseglingen og se etter at limet festet seg ordentlig, uten mellomrom.Det er en visuell fremstilling av dette i det første referansedokumentet.Hvis du ikke har forseglet platen ordentlig, når du fjerner forseglingen vil det være hull der limet ikke har festet seg helt til platen.
d.For frakt og transport av prøver kan det være nyttig å påføre en plastforsegling på toppen av folieforseglingen for ekstra beskyttelse (spesielt mot piercing).
e.Pass alltid på at det ikke er ujevnheter eller rynker når du legger på filmen – dette vil føre til lekkasjer og fordampning
Innleggstid: 23. november 2022