Mikropipeta je verjetno najpogosteje uporabljeno orodje v laboratoriju. Uporabljajo jo znanstveniki v najrazličnejših sektorjih, vključno z akademskimi krogi, bolnišnicami in forenzičnimi laboratoriji, pa tudi pri razvoju zdravil in cepiv za prenos natančnih, zelo majhnih količin tekočine.
Čeprav je lahko opazovanje zračnih mehurčkov v konici pipete za enkratno uporabo nadležno in frustrirajoče, če jih ne opazimo ali prezremo, lahko to močno vpliva na zanesljivost in ponovljivost rezultatov.
Dobra novica je, da obstaja nekaj preprostih ukrepov, s katerimi lahko preprečite nastanek zračnih mehurčkov in izboljšate učinkovitost laboratorija, zadovoljstvo operaterjev ter natančnost in preciznost rezultatov.
Spodaj bomo raziskali posledice zračnih mehurčkov v konici pipete in kaj morate storiti naprej.
Posledice mehurčkov vKonica pipete
Tudi če uporabljate najnatančnejše, vrhunske, dobro vzdrževane, servisirane in kalibrirane pipete, lahko laboratorijske napake vplivajo na zanesljivost vaših rezultatov. Ko v pipeto vstopijo mehurčki.napitninalahko ima več izidov.
● Ko uporabnik opazi zračni mehurček, mora porabiti nekaj časa za ustrezno doziranje vsesane tekočine, izvreči konico in znova začeti postopek.
● Nezaznani zračni mehurčki lahko povzročijo majhen prenos volumna, s čimer se spremeni koncentracija reakcijskih mešanic, kar vodi do neuspešnih poskusov in vprašljivih ali nezanesljivih rezultatov.
Ti izidi imajo lahko več posledic (1).
● Zmanjšana učinkovitost laboratorija – Teste in analize bo treba ponavljati, kar bo povzročilo precejšnje stroške dela in materiala.
● Vprašljivi ali napačni rezultati testov – Če so objavljeni napačni rezultati, lahko pride do resnejših posledic, vključno z napačno diagnozo in slabimi izidi zdravljenja bolnikov.
● Umik rokopisov iz revij – Če kolegi ne uspejo ponoviti vaših rezultatov zaradi zračnih mehurčkov, ki povzročajo netočne rezultate, se lahko članki umaknejo.
Najboljše prakse za preprečevanje zračnih mehurčkov
V večini primerov so zračni mehurčki v konicah pipet posledica napake operaterja. Osnovna težava je običajno slaba tehnika zaradi nezadostnega usposabljanja ali utrujenosti.
Pipetiranje je spretna operacija, ki zahteva 110-odstotno pozornost, ustrezno usposabljanje in prakso za doseganje doslednih in natančnih rezultatov.
Čeprav obstaja več stvari, ki jih lahko storite za zmanjšanje splošnih napak pri pipetiranju, smo spodaj izpostavili nekaj najboljših praks, ki jih lahko uporabite za preprečevanje zračnih mehurčkov vkonice pipet.
Izboljšajte uporabniško tehniko
Počasi pipetirajte
Če se bat pri sesanju prehitro sprosti, se lahko v konico vnesejo zračni mehurčki. To je lahko še posebej problematično pri prenosu viskoznih tekočin. Podoben učinek se lahko pojavi, če se bat po doziranju prehitro sprosti.
Da se pri aspiraciji izognete nastanku zračnih mehurčkov, pazite, da bat ročnih pipet premikate gladko in enakomerno ter pri tem uporabljate enakomerno silo.
Uporabite pravilno globino potopitve
Če konice pipete ne potopite dovolj globoko pod meniskus rezervoarja za tekočino, lahko pride do vsesavanja zraka in s tem do nastanka mehurčkov.
Vendar pa lahko pregloboko potopitev konice zaradi povečanega tlaka vsesa več tekočine ali pa se na zunanji strani konice pojavijo kapljice, zato je pomembno, da konico potopitekonica pipetedo pravilne globine.
Priporočena globina se razlikuje glede na velikost, vrsto in znamko pipete. Čeprav je treba upoštevati priporočila proizvajalca, je tukaj splošen vodnik, ki ga je pripravil Nacionalni fizikalni laboratorij.
Vodnik po globini potopitve konice
Prostornina pipete (µl) in globina potopitve (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
Predhodno mokroKonice pipet
Pri pipetiranju volumnov, večjih od 10 µlkonice pipetse običajno predhodno navlažijo tako, da se večkrat napolnijo s tekočino, ki se dozira, in jo nato iztisnejo v odpadke, da se izboljša natančnost.
Če jih ne navlažite predhodno, lahko pride do zračnih mehurčkov, zlasti pri uporabi viskoznih ali hidrofobnih tekočin. Da se izognete zračnim mehurčkom, konice pipetirajte z volumnom, večjim od 10 µl, in jih predhodno navlažite.
Po potrebi uporabite tehnike obratnega pipetiranja
Viskozne snovi: Pogosta težava pri pipetiranju viskoznih snovi, kot so raztopine beljakovin ali nukleinskih kislin, glicerol in Tween 20/40/60/80, je pogosto nastajanje mehurčkov pri uporabi tehnike pipetiranja naprej.
Počasno pipetiranje z uporabo tehnike obratnega pipetiranja zmanjša tveganje za nastanek mehurčkov pri prenosu viskoznih raztopin.
Tehnika ELISA
Obratno pipetiranje je priporočljivo tudi pri pipetiranju majhnih količin v96-jamične mikro testne ploščeza tehnike ELISA. Ko se pri dodajanju reagentov v pipeto vsesajo zračni mehurčki ali se v vdolbinice razporedijo, lahko to vpliva na vrednosti optične gostote in rezultate. Za zmanjšanje ali odpravo te težave je priporočljivo obratno pipetiranje.
Uporabite ergonomske pipete
Starejše pipete, ki niso bile zasnovane z mislijo na ergonomijo, zahtevajo več fizičnega napora, utrudite se in vaša tehnika pipetiranja postane površna in slaba. Zgoraj omenjene napake, kot je hitro sproščanje bata, se lahko pojavljajo pogosteje.
Z naložbo v bolj ergonomsko rešitev boste lahko ohranili odlično tehniko in preprečili nastajanje zračnih mehurčkov zaradi slabe tehnike.
Vzemite si čas za usposabljanje osebja
Redno usposabljanje in ocenjevanje osebja pri uporabi tehnik pipetiranja lahko zagotovi zmanjšanje napak operaterja in nastajanja zračnih mehurčkov.
Razmislite o bolj avtomatiziranih rešitvah
Kot je navedeno zgoraj, večino zračnih mehurčkov povzroči operater. Napake operaterja in udobje je mogoče zmanjšati z uporabo elektronskih pipet ali fleksibilne platforme za ravnanje s tekočinami, kot jeAgilent Bravo robot za ravnanje s tekočinami.
Uporabite dobro kakovostKonice pipet
Mikropipete se običajno kupujejo previdno, vendar se pogosto premalo pozornosti posveča kakovosti konice pipete za enkratno uporabo. Zaradi vpliva konice na rezultate pipetiranja standard ISO 8655 zahteva dodatno kalibracijo, če se uporabljajo pipete in konice različnih proizvajalcev.
To je lahko zato, ker so številne poceni konice na začetku videti v redu, a ko jih natančno preučite, imajo lahko udrtine, izbokline, praske in zračne mehurčke, so lahko upognjene ali vsebujejo nečistoče.
Nakup kakovostnih konic iz visokokakovostnega polipropilena lahko zmanjša nastanek zračnih mehurčkov.
Za zaključek
Pridobivanje zračnih mehurčkov v konici pipete vpliva na učinkovitost laboratorija ter na netočnost in nepreciznost rezultatov. Omenili smo več stvari, ki jih lahko storite, da preprečite vdor zračnih mehurčkov v...konica pipete.
Če pa je slaba kakovostkonice pipetpovzročajo vdor zračnih mehurčkov v konico pipete, boste veseli, da naša univerzalna oblikakonice pipetso izdelani po najvišjih standardih in so izdelani iz vrhunskega čistega polipropilena.
Biomedicinsko podjetje Suzhou AceIzdelujemo visokokakovostne univerzalne konice za pipete s prostornino 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 in 1250 µL, 96 konic/stojalo. Izjemna vzdržljivost – vsi stojali za konice ACE ustrezajo zahtevam uporabe z večkanalnimi pipetorji. Sterilni, s filtrom, brez RNaze/DNaze in apirogeni.
Dobrodošli, da nas povprašate za več podrobnosti.
Čas objave: 29. dec. 2022