La micropipeta es probablemente la herramienta más utilizada en el laboratorio.Son utilizados por científicos en una amplia gama de sectores, incluidos laboratorios académicos, hospitalarios y forenses, así como en el desarrollo de fármacos y vacunas, para transferir cantidades muy pequeñas y precisas de líquido.
Si bien puede resultar molesto y frustrante detectar burbujas de aire en la punta de la pipeta desechable si no se detectan o se ignoran, puede tener un gran impacto en la confiabilidad y reproducibilidad de los resultados.
La buena noticia es que existen algunas medidas sencillas que puede tomar para evitar las burbujas de aire y mejorar la eficiencia del laboratorio, la satisfacción del operador y la exactitud y precisión de los resultados.
A continuación, exploramos las consecuencias de tener una burbuja de aire en la punta de la pipeta y lo que debe hacer a continuación.
La consecuencia de las burbujas en elPunta de pipeta
Incluso si utiliza las pipetas más precisas, de alta gama, bien mantenidas, revisadas y calibradas, la confiabilidad de sus resultados puede verse afectada por errores de laboratorio.Cuando las burbujas entran en elconsejopuede tener varios resultados.
● Cuando el usuario detecta la burbuja de aire debe dedicar tiempo a dispensar adecuadamente el líquido aspirado, expulsar la punta y comenzar el proceso nuevamente.
● Las burbujas de aire no detectadas pueden provocar una transferencia de volumen bajo, alterando así la concentración de las mezclas de reacción y provocando experimentos fallidos y resultados cuestionables o poco fiables.
Estos resultados pueden tener varias consecuencias (1).
● Disminución de la eficiencia del laboratorio: las pruebas y ensayos tendrán que repetirse, lo que generará costos de mano de obra y materiales, que pueden ser bastante sustanciales.
● Resultados de pruebas cuestionables o incorrectos: si se publican resultados incorrectos, puede haber consecuencias más graves, incluidos diagnósticos erróneos y malos resultados para los pacientes.
● Retracción de manuscritos de revistas: si sus pares no logran replicar sus resultados debido a que las burbujas de aire causan resultados inexactos, es posible que se retiren los artículos.
Mejores prácticas para prevenir burbujas de aire
En la mayoría de los casos, las burbujas de aire en las puntas de las pipetas se deben a un error del operador.Una mala técnica debido a un entrenamiento insuficiente o a la fatiga suele ser el problema de fondo.
Pipetear es una operación especializada que requiere un 110% de atención, capacitación y práctica adecuadas para lograr resultados consistentes y precisos.
Si bien hay varias cosas que puede hacer para reducir los errores generales de pipeteo, a continuación destacamos algunas de las mejores prácticas que se pueden emplear para evitar burbujas de aire enpuntas de pipeta.
Mejorar la técnica del usuario
Pipetear lentamente
Si al aspirar se suelta el émbolo demasiado rápido, se pueden introducir burbujas de aire en la punta.Esto puede resultar especialmente problemático al transferir líquidos viscosos.Puede ocurrir un efecto similar si el émbolo se suelta demasiado rápido después de la dispensación.
Para evitar burbujas de aire al aspirar, tenga cuidado de operar el pistón de las pipetas manuales de manera suave y regular, aplicando una fuerza constante.
Utilice la profundidad de inmersión correcta
Si no se sumerge la punta de la pipeta a una profundidad suficiente por debajo del menisco del depósito de líquido, se puede producir una aspiración de aire y, por tanto, la formación de burbujas.
Sin embargo, sumergir la punta demasiado profundo puede aspirar más líquido debido al aumento de presión o pueden aparecer gotas en el exterior de la punta, por lo que es importante sumergir la punta.punta de pipetaa la profundidad correcta.
La profundidad recomendada varía según el tamaño, el tipo y la marca de la pipeta.Si bien se deben seguir las recomendaciones del fabricante, aquí hay una guía general proporcionada por el Laboratorio Nacional de Física.
Guía para la profundidad de inmersión de la punta
Volumen de pipeta (μl) y profundidad de inmersión (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
Pre-mojadoPuntas de pipeta
Al pipetear volúmenes superiores a 10 µlpuntas de pipetaPor lo general, se humedecen previamente llenándolos varias veces con el líquido que se dispensa y expulsándolo como desperdicio para mejorar la precisión.
No humedecerlos previamente puede provocar burbujas de aire, especialmente cuando se utilizan líquidos viscosos o hidrofóbicos.Para evitar burbujas de aire, asegúrese de humedecer previamente las puntas al pipetear un volumen superior a 10 µl.
Utilice técnicas de pipeteo inverso si corresponde
Sustancias viscosas: un problema común al pipetear sustancias viscosas como soluciones de proteínas o ácidos nucleicos, glicerol y Tween 20/40/60/80 es la frecuente formación de burbujas cuando se utiliza la técnica de pipeteo directo.
Pipetear lentamente, utilizando la técnica de pipeteo inverso, reduce el riesgo de formación de burbujas al transferir soluciones viscosas.
Técnica ELISA
También se recomienda el pipeteo inverso al pipetear volúmenes pequeños enPlacas de prueba micro de 96 pocillospara técnicas ELISA.Cuando se introducen burbujas de aire en la pipeta o se dispensan en los pocillos al añadir reactivos, esto puede influir en los valores de densidad óptica y en los resultados.Se recomienda el pipeteo inverso para minimizar o eliminar este problema.
Utilice pipetas ergonómicas
Las pipetas antiguas que no han sido diseñadas teniendo en cuenta la ergonomía requieren más esfuerzo físico, te cansas y tu técnica de pipeteo se vuelve descuidada y deficiente.Los errores mencionados anteriormente, como la liberación rápida del émbolo, pueden ocurrir con mayor frecuencia.
Al invertir en una solución más ergonómica podrá mantener una técnica excelente y evitar la formación de burbujas de aire debido a una mala técnica.
Tómese el tiempo para capacitar al personal
Capacitar y evaluar periódicamente al personal en técnicas de pipeteo puede garantizar que se reduzcan los errores del operador y la formación de burbujas de aire.
Considere soluciones más automatizadas
Como se señaló anteriormente, la mayoría de las burbujas de aire son causadas por el operador.Puede ser posible reducir el error y la comodidad del operador mediante el uso de pipetas electrónicas o una plataforma flexible de manipulación de líquidos como laRobot de manipulación de líquidos Agilent Bravo.
Utilice buena calidadPuntas de pipeta
Las micropipetas suelen adquirirse con cuidado, pero a menudo se presta poca atención a la calidad de la punta de pipeta desechable.Debido a la influencia que tiene una punta en los resultados del pipeteo, la norma ISO 8655 requiere una calibración adicional si se utilizan pipetas y puntas de diferentes fabricantes.
Esto podría deberse a que muchas puntas baratas pueden verse bien al principio, pero cuando las estudias detenidamente pueden tener destellos, protuberancias, rayones y burbujas de aire, o estar dobladas o contener impurezas.
Comprar puntas de buena calidad hechas de polipropileno de alta calidad puede reducir la aparición de burbujas de aire.
Para concluir
La aparición de burbujas de aire en la punta de la pipeta tiene un impacto en la eficiencia del laboratorio, así como en la inexactitud e imprecisión de los resultados.Hemos observado varias cosas que puede hacer para evitar que entren burbujas de aire en elpunta de pipeta.
Sin embargo, si la calidad es malapuntas de pipetaestán provocando que entren burbujas de aire en la punta de su pipeta, le complacerá saber que nuestro ajuste universalpuntas de pipetaestán fabricados con los más altos estándares y están fabricados con polipropileno puro de primera calidad.
Compañía biomédica Suzhou Aceproduzca puntas de pipeta universales de alta calidad con volúmenes de 10,20,50,100,200,300,1000 y 1250 µL, 96 puntas/gradiente.Durabilidad excepcional: todos los bastidores de puntas ACE resisten las demandas de uso con pipetas multicanal.Estéril, filtrante, libre de RNasa/DNasa y apirógeno.
Bienvenido a consultarnos para más detalles.
Hora de publicación: 29 de diciembre de 2022