La micropipetta è probabilmente lo strumento più utilizzato in laboratorio.Sono utilizzati dagli scienziati in un'ampia gamma di settori, tra cui il mondo accademico, gli ospedali e i laboratori forensi, nonché lo sviluppo di farmaci e vaccini per trasferire quantità precise e molto piccole di liquido
Sebbene possa essere fastidioso e frustrante individuare bolle d'aria nella punta della pipetta monouso se non vengono individuate o ignorate, può avere un enorme impatto sull'affidabilità e sulla riproducibilità dei risultati.
La buona notizia è che esistono alcune semplici misure che è possibile adottare per prevenire la formazione di bolle d'aria e migliorare l'efficienza del laboratorio, la soddisfazione dell'operatore nonché l'accuratezza e la precisione dei risultati.
Di seguito, esploriamo le conseguenze della presenza di una bolla d'aria nella punta della pipetta e cosa dovresti fare dopo.
La conseguenza delle bolle nelPuntale della pipetta
Anche se si utilizzano le pipette più accurate, top di gamma, ben mantenute, revisionate e calibrate, l'affidabilità dei risultati può essere influenzata da errori di laboratorio.Quando le bolle entrano nelmanciapuò avere diversi esiti.
● Quando l'utente individua la bolla d'aria deve dedicare del tempo a dispensare adeguatamente il liquido aspirato, espellere la punta e avviare nuovamente il processo.
● Le bolle d'aria non rilevate possono comportare un trasferimento di volume ridotto, alterando così la concentrazione delle miscele di reazione e portando a esperimenti falliti e risultati discutibili o inaffidabili.
Questi risultati possono avere diverse conseguenze (1).
● Diminuzione dell'efficienza del laboratorio – I test e le analisi dovranno essere ripetuti, con conseguenti costi di manodopera e materiali, che possono essere piuttosto ingenti.
● Risultati dei test discutibili o errati: se vengono rilasciati risultati errati, possono esserci conseguenze più gravi, tra cui diagnosi errate e scarsi risultati per i pazienti.
● Ritiro di manoscritti dalle riviste – Se i colleghi non riescono a replicare i risultati a causa di bolle d'aria che causano risultati imprecisi, i documenti potrebbero essere ritirati.
Migliori pratiche per prevenire le bolle d'aria
Nella maggior parte dei casi le bolle d'aria nei puntali delle pipette sono causate da un errore dell'operatore.Di solito il problema di fondo è una tecnica scadente dovuta ad un allenamento insufficiente o alla fatica.
Il pipettaggio è un'operazione specializzata che richiede il 110% di attenzione, formazione adeguata e pratica per ottenere risultati coerenti e accurati.
Anche se è possibile fare diverse cose per ridurre gli errori generali di pipettaggio, di seguito abbiamo evidenziato alcune pratiche ottimali che possono essere adottate per evitare bolle d'aria all'internopuntali per pipette.
Migliora la tecnica dell'utente
Pipettare lentamente
Se lo stantuffo viene rilasciato troppo velocemente durante l'aspirazione, è possibile che si introducano bolle d'aria nella punta.Ciò può essere particolarmente problematico durante il trasferimento di liquidi viscosi.Un effetto simile può verificarsi se lo stantuffo viene rilasciato troppo rapidamente dopo la dispensazione.
Per evitare bolle d'aria durante l'aspirazione, fare attenzione ad azionare il pistone delle pipette manuali in modo fluido e regolare, applicando una forza costante.
Utilizzare la profondità di immersione corretta
La mancata immersione della punta della pipetta sufficientemente in profondità al di sotto del menisco del serbatoio del liquido può provocare l'aspirazione di aria e quindi la formazione di bolle.
Tuttavia, immergendo la punta troppo in profondità si potrebbe aspirare più liquido a causa dell'aumento della pressione oppure potrebbero formarsi delle goccioline all'esterno della punta, quindi è importante immergere la puntapunta della pipettaalla profondità corretta.
La profondità consigliata varia in base alla dimensione, al tipo e alla marca della pipetta.Anche se è necessario seguire le raccomandazioni del produttore, ecco una guida generale fornita dal National Physical Laboratory.
Guida alla profondità di immersione della punta
Volume della pipetta (μl) e profondità di immersione (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
Pre-bagnatoPuntali per pipette
Quando si pipettano volumi superiori a 10 µlpuntali per pipettevengono solitamente pre-bagnati riempiendoli più volte con il liquido erogato ed espellendolo nello scarico per migliorare la precisione.
La mancata pre-bagnatura può provocare la formazione di bolle d'aria, soprattutto quando si utilizzano liquidi viscosi o idrofobi.Per evitare bolle d'aria, assicurarsi di pre-bagnare i puntali quando si pipetta un volume superiore a 10 µl.
Se appropriato, utilizzare tecniche di pipettaggio inverso
Sostanze viscose: un problema comune quando si pipettano sostanze viscose come soluzioni di proteine o acidi nucleici, glicerolo e Tween 20/40/60/80 è la frequente formazione di bolle quando si utilizza la tecnica di pipettaggio diretto.
Pipettare lentamente, utilizzando la tecnica di pipettaggio inverso, riduce il rischio di formazione di bolle durante il trasferimento di soluzioni viscose.
Tecnica ELISA
Si consiglia il pipettaggio inverso anche quando si pipettano piccoli volumiMicropiastre da 96 pozzettiper le tecniche ELISA.Quando le bolle d'aria vengono aspirate nella pipetta o dispensate nei pozzetti durante l'aggiunta dei reagenti, possono influenzare i valori di densità ottica e i risultati.Si consiglia il pipettaggio inverso per ridurre al minimo o eliminare questo problema.
Utilizzare pipette ergonomiche
Le pipette vecchio stile che non sono state progettate pensando all'ergonomia richiedono uno sforzo fisico maggiore, ti stanchi e la tua tecnica di pipettaggio diventa sciatta e scadente.Gli errori sopra menzionati, come il rilascio rapido dello stantuffo, potrebbero verificarsi con maggiore frequenza.
Investendo in una soluzione più ergonomica sarai in grado di mantenere una tecnica eccellente e prevenire la formazione di bolle d'aria dovute a una tecnica scadente.
Prenditi del tempo per formare il personale
La formazione e la valutazione regolari del personale sulle tecniche di pipettaggio possono garantire la riduzione degli errori dell'operatore e della formazione di bolle d'aria.
Prendi in considerazione più soluzioni automatizzate
Come notato sopra, la maggior parte delle bolle d'aria sono causate dall'operatore.Potrebbe essere possibile ridurre l'errore e il comfort dell'operatore utilizzando pipette elettroniche o una piattaforma flessibile per la gestione dei liquidi come laRobot Agilent Bravo per la gestione dei liquidi.
Usa buona qualitàPuntali per pipette
Le micropipette vengono solitamente acquistate con cura, ma spesso si presta poca attenzione alla qualità del puntale monouso.A causa dell'influenza che un puntale ha sui risultati di pipettaggio, la norma ISO 8655 richiede una calibrazione aggiuntiva se vengono utilizzate pipette e puntali di produttori diversi.
Ciò potrebbe essere dovuto al fatto che molti suggerimenti economici possono inizialmente sembrare belli, ma se li studi attentamente potrebbero presentare bagliori, sporgenze, graffi e bolle d'aria, oppure essere piegati o contenere impurità.
L'acquisto di puntali di buona qualità realizzati in polipropilene di alta qualità può ridurre la formazione di bolle d'aria.
Concludere
La presenza di bolle d'aria nel puntale della pipetta ha un impatto sull'efficienza del laboratorio, nonché sull'imprecisione e sull'imprecisione dei risultati.Abbiamo notato diverse cose che puoi fare per evitare che le bolle d'aria penetrino all'internopunta della pipetta.
Tuttavia, se di scarsa qualitàpuntali per pipettestanno causando l'ingresso di bolle d'aria nella punta della pipetta, sarai felice di sapere che la nostra vestibilità universalepuntali per pipettesono realizzati secondo gli standard più elevati e sono realizzati con polipropilene puro di prima qualità.
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Orario di pubblicazione: 29 dicembre 2022