Mikropipeta je vjerojatno najkorišteniji alat u laboratoriju.Koriste ih znanstvenici u širokom rasponu sektora, uključujući akademsku zajednicu, bolnice i forenzičke laboratorije, kao i razvoj lijekova i cjepiva za prijenos preciznih, vrlo malih količina tekućine
Iako može biti neugodno i frustrirajuće uočiti mjehuriće zraka u vrhu jednokratne pipete ako nisu uočeni ili zanemareni, to može imati veliki utjecaj na pouzdanost i ponovljivost rezultata.
Dobra vijest je da postoje neke jednostavne mjere koje možete poduzeti kako biste spriječili mjehuriće zraka i poboljšali učinkovitost laboratorija, zadovoljstvo operatera kao i točnost i preciznost rezultata.
U nastavku istražujemo posljedice dobivanja mjehurića zraka u vrhu pipete i što trebate učiniti sljedeće.
Posljedica mjehurića uVrh pipete
Čak i ako koristite najpreciznije, vrhunske, dobro održavane, servisirane i kalibrirane pipete, laboratorijske pogreške mogu utjecati na pouzdanost vaših rezultata.Kada mjehurići uđu uSavjetmože imati nekoliko ishoda.
● Kada korisnik uoči mjehurić zraka, mora provesti neko vrijeme ispuštajući usisnu tekućinu na odgovarajući način, izbaciti vrh i ponovno pokrenuti proces.
● Neotkriveni mjehurići zraka mogu dovesti do prijenosa malog volumena, mijenjajući tako koncentraciju reakcijskih smjesa što dovodi do neuspjelih eksperimenata i upitnih ili nepouzdanih rezultata.
Ovi ishodi mogu imati nekoliko posljedica (1).
● Smanjena učinkovitost laboratorija – Testovi i testovi morat će se ponavljati, stvarajući troškove rada i materijala, koji mogu biti prilično veliki.
● Upitni ili netočni rezultati testa – Ako se objave netočni rezultati, može doći do ozbiljnijih posljedica, uključujući pogrešnu dijagnozu i loše ishode za pacijente.
● Povlačenje rukopisa iz časopisa – Ako kolege ne uspiju replicirati vaše rezultate zbog mjehurića zraka koji uzrokuju netočne rezultate, dokumenti se mogu povući.
Najbolji postupci za sprječavanje mjehurića zraka
U većini slučajeva mjehurići zraka u vrhovima pipeta uzrokovani su pogreškom operatera.Loša tehnika zbog nedovoljnog treninga ili umora obično je temeljni problem.
Pipetiranje je vješta operacija koja zahtijeva 110% pažnje, odgovarajuću obuku i praksu za postizanje dosljednih i točnih rezultata.
Iako postoji nekoliko stvari koje možete učiniti kako biste smanjili opće pogreške pipetiranja, u nastavku smo istaknuli neke najbolje prakse koje se mogu primijeniti kako biste izbjegli mjehuriće zraka uvrhovi za pipete.
Poboljšajte korisničku tehniku
Pipetirajte polako
Ako se klip prebrzo otpusti tijekom aspiracije, mjehurići zraka mogu se unijeti u vrh.To može biti posebno problematično pri prijenosu viskoznih tekućina.Sličan učinak može se dogoditi ako se klip prebrzo otpusti nakon ispuštanja.
Kako biste izbjegli mjehuriće zraka tijekom aspiracije, pazite da klipom ručnih pipeta upravljate glatko i pravilno, primjenom dosljedne sile.
Koristite ispravnu dubinu uranjanja
Ako vrh pipete ne uronite dovoljno duboko ispod meniskusa spremnika tekućine, može doći do aspiracije zraka i stvaranja mjehurića.
Međutim, preduboko uranjanje vrha može usisati više tekućine zbog povećanog tlaka ili se mogu pojaviti kapljice na vanjskoj strani vrha, stoga je važno uronitivrh pipetena ispravnu dubinu.
Preporučena dubina ovisi o veličini pipete, vrsti i proizvođaču.Premda treba slijediti preporuke proizvođača, ovo je opći vodič koji je dao Nacionalni fizikalni laboratorij.
Vodič za dubinu uranjanja vrha
Volumen pipete (µl) i dubina uranjanja (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1000: 2 – 4
- 1000 – 5000: 2 – 5
Prethodno mokroSavjeti za pipete
Pri pipetiranju volumena većih od 10µlvrhovi za pipeteobično se prethodno navlaže tako da se nekoliko puta napune tekućinom koja se ispušta i izbaci u otpad kako bi se poboljšala točnost.
Ako ih prethodno ne navlažite, može doći do stvaranja mjehurića zraka, posebno kada koristite viskozne ili hidrofobne tekućine.Kako biste izbjegli mjehuriće zraka, osigurajte da prethodno navlažite vrhove kada pipetirate volumen veći od 10 µl.
Koristite tehnike obrnutog pipetiranja ako je prikladno
Viskozne tvari: čest problem pri pipetiranju viskoznih tvari kao što su otopine proteina ili nukleinskih kiselina, glicerol i Tween 20/40/60/80 je često stvaranje mjehurića kada se koristi tehnika pipetiranja naprijed.
Sporo pipetiranje, uporabom tehnike obrnutog pipetiranja smanjuje rizik od stvaranja mjehurića prilikom prijenosa viskoznih otopina.
ELISA tehnika
Obrnuto pipetiranje također se preporučuje kada se pipetiraju male količine uMikrotestne ploče s 96 jažicaza ELISA tehnike.Kada se mjehurići zraka uvuku u pipetu ili rasprše u jažice prilikom dodavanja reagensa, to može utjecati na vrijednosti optičke gustoće i rezultate.Preporuča se obrnuto pipetiranje kako bi se smanjio ili uklonio ovaj problem.
Koristite ergonomske pipete
Stare pipete koje nisu dizajnirane imajući na umu ergonomiju zahtijevaju više fizičkog napora, umorite se i vaša tehnika pipetiranja postaje neuredna i loša.Gore navedene pogreške, poput brzog otpuštanja klipa, mogu se pojaviti češće.
Ulaganjem u ergonomičnije rješenje moći ćete održavati izvrsnu tehniku i spriječiti stvaranje mjehurića zraka zbog loše tehnike.
Odvojite vrijeme za obuku osoblja
Redovita obuka i ocjenjivanje osoblja u tehnikama pipetiranja može osigurati smanjenje pogreške rukovatelja i stvaranje mjehurića zraka.
Razmotrite više automatiziranih rješenja
Kao što je gore navedeno, većinu mjehurića zraka uzrokuje operater.Moguće je smanjiti pogreške operatera i udobnost korištenjem elektroničkih pipeta ili fleksibilne platforme za rukovanje tekućinom kao što jeRobot za rukovanje tekućinama Agilent Bravo.
Koristite dobru kvalitetuSavjeti za pipete
Mikropipete se obično kupuju pažljivo, ali često se malo razmišlja o kvaliteti jednokratnog vrha pipete.Zbog utjecaja koji vrh ima na rezultate pipetiranja, standard ISO 8655 zahtijeva dodatnu kalibraciju ako se koriste pipete i vrhovi različitih proizvođača.
To bi moglo biti zato što mnogi jeftini vrhovi u početku mogu izgledati dobro, ali kada ih pažljivo proučite, mogu imati bljeskove, izbočine, ogrebotine i mjehuriće zraka ili mogu biti savijeni ili sadržavati nečistoće.
Kupnja kvalitetnih vrhova izrađenih od visokokvalitetnog polipropilena može smanjiti pojavu mjehurića zraka.
Zaključiti
Ulazak mjehurića zraka u vrh pipete utječe na učinkovitost laboratorija, kao i na netočnost i nepreciznost rezultata.Naveli smo nekoliko stvari koje možete učiniti kako biste izbjegli ulazak mjehurića zraka uvrh pipete.
Međutim, ako je loše kvalitetevrhovi za pipeteuzrokuju ulazak mjehurića zraka u vrh vaše pipete, bit će vam drago znati da naš univerzalnivrhovi za pipeteizrađeni su prema najvišim standardima i izrađeni su od čistog polipropilena vrhunske kvalitete.
Biomedicinska tvrtka Suzhou Aceproizvode visokokvalitetne univerzalne vrhove za pipete od 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 i 1250 µL volumena, 96 vrhova/stalak.Iznimna izdržljivost – svi ACE nosači vrhova mogu zadovoljiti zahtjeve upotrebe s višekanalnim pipetima.Sterilan, filter, bez RNaze/DNaze i nepirogen.
Dobrodošli da nas pitate za više detalja.
Vrijeme objave: 29. prosinca 2022