Jak uszczelnić płytkę PCR

Wstęp

Płytki PCR, od wielu lat podstawowy element wyposażenia laboratorium, stają się coraz bardziej powszechne w nowoczesnym otoczeniu, ponieważ laboratoria zwiększają swoją przepustowość i coraz częściej stosują automatyzację w swoich przepływach pracy. Osiągnięcie tych celów przy jednoczesnym zachowaniu dokładności i integralności eksperymentów może być trudne. Jednym z powszechnych obszarów, w których mogą wkraść się błędy, jest uszczelnieniePłytki PCR, przy czym słaba technika umożliwia odparowanie próbek, zmieniając pH, a tym samym zakłócając funkcje enzymatyczne i zapraszając do skażenia. Uczenie się, jak uszczelnićPłytka PCRprawidłowo eliminuje te ryzyka i zapewnia powtarzalne wyniki.

Znajdź odpowiednią uszczelkę do swojej płytki PCR

Nasadki na talerze kontra uszczelki foliowe kontra pokrywki
Czapkisą dobrym sposobem na szczelne zamknięcie talerza, a jednocześnie dają elastyczność łatwego otwierania i ponownego zamykania talerza, kiedy tylko potrzebujesz, bez żadnych strat. Jednak nakrętki mają kilka kluczowych wad.

Po pierwsze, musisz kupić konkretną nasadkę, która jest kompatybilna, co sprawia, że ​​nie są one uniwersalne. Musisz się upewnić, że wybrana nasadka pasuje do płyty, co zależy od jej producenta, i wybrać nasadkę kopułkową lub płaską w zależności od używanego termocyklera.

Po drugie, zakładanie zatyczek na płytkę może być czynnością bardzo powtarzalną i żmudną, a ponadto istnieje ryzyko zanieczyszczenia krzyżowego, jeśli założy się niewłaściwą zatyczkę na niewłaściwe zagłębienie.

Chociaż uszczelnienia foliowe są mniej elastyczne pod względem zdejmowania i wymiany, są bardzo wszechstronne, ponieważ pasują do każdego rodzaju płytki PCR, bez względu na producenta. Można je po prostu przyciąć na wymiar, co czyni je bardzo skutecznymi.

Inną opcją jest pokrywka talerzowa. Zapewniają one mniejszą ochronę niż zatyczki i uszczelki i są używane głównie do krótkotrwałego przykrycia, aby zapobiec zanieczyszczeniu.

Uszczelnienia optyczne i foliowe

Niezależnie od tego, czy potrzebujesz uszczelnienia optycznego, przezroczystego czyfolia aluminiowasposób zapieczętowania talerza zależy od formatu eksperymentu.Folie do uszczelniania optycznegosą przezroczyste, co pozwala na obserwację próbek, a jednocześnie chroni je i zapobiega parowaniu. Są one również szczególnie przydatne w eksperymentach qPCR, które obejmują wykonywanie bardzo precyzyjnych pomiarów fluorescencji bezpośrednio z płytki, w takim przypadku będziesz potrzebować folii uszczelniającej, która filtruje jak najmniej fluorescencji. Ważne jest, aby upewnić się, że używana uszczelka lub nasadka ma wystarczająco wysoki poziom przejrzystości optycznej, aby zapewnić dokładność odczytów.

Folie foliowe nadają się do wszelkich próbek wrażliwych na światło lub przechowywanych w temperaturze poniżej 80°C. Z tego powodu większość próbek przeznaczonych do długoterminowego przechowywania będzie wymagać folii foliowej. Folie foliowe są również przebijalne, co jest przydatne do badania pojedynczych studzienek lub do przenoszenia próbek za pomocą igieł. Może to odbywać się ręcznie lub jako część platformy robotycznej.

Należy również wziąć pod uwagę, że substancje agresywne, takie jak kwasy, zasady lub rozpuszczalniki, wymagają uszczelnienia odpornego na ich działanie. W takim przypadku bardziej odpowiednia będzie uszczelka foliowa.

Folia klejąca kontra folia do zgrzewania termicznego
Uszczelki foliowe samoprzylepnesą bardzo proste i łatwe w użyciu. Wszystko, czego potrzebujesz, to aby użytkownik nałożył uszczelkę na płytkę i użył prostego narzędzia aplikatora, aby docisnąć i utworzyć szczelne uszczelnienie.

Zgrzewanie termiczne jest bardziej zaawansowane, zapewniając trwalsze uszczelnienie, które ma zmniejszone tempo parowania w porównaniu do konwencjonalnego uszczelnienia klejowego. Ta opcja jest odpowiednia, jeśli chcesz przechowywać próbki długoterminowo, chociaż wiąże się to z dodatkowym wymogiem dotyczącym sprzętu do zgrzewania płyt.

Jak uszczelnić płytkę PCR

Metoda uszczelniania płyt

Samoprzylepne

1. Upewnij się, że pracujesz na płaskiej i stabilnej powierzchni roboczej.

2. Wyjmij folię z opakowania i usuń warstwę podkładową.

3. Ostrożnie umieść uszczelkę na płytce, upewniając się, że wszystkie wgłębienia są zakryte.

4. Użyj narzędzia aplikatora, aby wywrzeć nacisk na płytkę. Zacznij od jednego końca i przejdź do drugiego, równomiernie dociskając

5. Powtarzaj to wiele razy

6. Przesuń aplikator wokół zewnętrznych otworów, aby upewnić się, że są one również prawidłowo uszczelnione.

Zgrzewanie

Zgrzewanie termiczne polega na stopieniu folii do krawędzi każdego dołka za pomocą zgrzewarki płytowej. Aby obsługiwać zgrzewarkę termiczną, zapoznaj się z instrukcjami producenta sprzętu. Upewnij się, że producent, od którego kupujesz sprzęt, jest renomowany, ponieważ bardzo ważne jest, aby zgrzewanie było prawidłowe, skuteczne i wodoszczelne.

Najważniejsze wskazówki dotyczące uszczelniania płyt

a. Podczas wywierania nacisku na uszczelkę, należy wykonywać go w kierunku poziomym i pionowym, aby zapewnić prawidłowe uszczelnienie

b. Zawsze dobrze jest przeprowadzić test tego, co robisz, i nie inaczej jest w przypadku uszczelniania płyt. Przetestuj na pustej płytce przed użyciem jej z próbkami.

c. Podczas testowania zdejmij uszczelkę i sprawdź, czy klej przykleił się prawidłowo, bez żadnych szczelin. Wizualna reprezentacja tego znajduje się w pierwszym dokumencie referencyjnym. Jeśli nie uszczelniłeś płyty prawidłowo, po usunięciu uszczelki pojawią się szczeliny, w których klej nie związał się w pełni z płytą.

d. W przypadku wysyłki i transportu próbek pomocne może okazać się nałożenie plastikowej plomby na folię, aby zapewnić dodatkową ochronę (szczególnie przed przebiciem).

e. Zawsze upewnij się, że podczas nakładania folii nie ma żadnych nierówności ani zmarszczek – mogą one powodować przecieki i parowanie