Mikropipetten er sannsynligvis det mest brukte verktøyet i laboratoriet. De brukes av forskere i en rekke sektorer, inkludert akademia, sykehus og rettsmedisinske laboratorier, samt legemiddel- og vaksineutvikling, for å overføre presise, svært små mengder væske.
Selv om det kan være irriterende og frustrerende å oppdage luftbobler i engangspipettespissen hvis de ikke blir oppdaget eller ignorert, kan det ha stor innvirkning på påliteligheten og reproduserbarheten av resultatene.
Den gode nyheten er at det finnes noen enkle tiltak du kan ta for å forhindre luftbobler og forbedre laboratorieeffektiviteten, operatørtilfredsheten samt nøyaktigheten og presisjonen til resultatene.
Nedenfor utforsker vi konsekvensene av å få en luftboble i pipettespissen og hva du bør gjøre videre.
Konsekvensen av bobler iPipettespiss
Selv om du bruker de mest nøyaktige, førsteklasses, godt vedlikeholdte, servicerte og kalibrerte pipettene, kan påliteligheten til resultatene påvirkes av laboratoriefeil. Når bobler kommer inn ituppdet kan ha flere utfall.
● Når brukeren oppdager luftboblen, må de bruke tid på å dispensere den aspirerte væsken på riktig måte, skyve ut spissen og starte prosessen på nytt.
● Uoppdagede luftbobler kan føre til lav volumoverføring, og dermed endre konsentrasjonen av reaksjonsblandinger, noe som kan føre til mislykkede eksperimenter og tvilsomme eller upålitelige resultater.
Disse utfallene kan ha flere konsekvenser (1).
● Redusert laboratorieeffektivitet – Tester og analyser må gjentas, noe som medfører ganske betydelige lønns- og materialkostnader.
● Tvilsomme eller feilaktige testresultater – Hvis feilaktige resultater publiseres, kan det få mer alvorlige konsekvenser, inkludert feildiagnose og dårlige pasientresultater.
● Tilbaketrekking av manuskripter fra tidsskrifter – Hvis fagfeller ikke klarer å gjenskape resultatene dine på grunn av luftbobler som forårsaker unøyaktige resultater, kan artiklene bli trukket tilbake.
Beste praksis for å forhindre luftbobler
I de fleste tilfeller skyldes luftbobler i pipettespissene operatørfeil. Dårlig teknikk på grunn av utilstrekkelig opplæring eller tretthet er vanligvis det underliggende problemet.
Pipettering er en profesjonell operasjon som krever 110 % oppmerksomhet, riktig opplæring og øvelse for å oppnå konsistente og nøyaktige resultater.
Selv om det finnes flere ting du kan gjøre for å redusere generelle pipetteringsfeil, har vi nedenfor fremhevet noen beste fremgangsmåter som kan brukes for å unngå luftbobler ipipettespisser.
Forbedre brukerteknikk
Pipettér sakte
Hvis stempelet slippes for raskt under aspirering, kan luftbobler komme inn i spissen. Dette kan være spesielt problematisk ved overføring av viskøse væsker. En lignende effekt kan oppstå hvis stempelet slippes for raskt etter dispensering.
For å unngå luftbobler ved aspirering, sørg for at stempelet på manuelle pipetter betjenes jevnt og regelmessig, med jevn kraft.
Bruk riktig nedsenkingsdybde
Hvis pipettespissen ikke senkes dypt nok under menisken i væskebeholderen, kan det føre til aspirasjon av luft og dermed bobledannelse.
Hvis spissen imidlertid senkes for dypt, kan det suges opp mer væske på grunn av økt trykk, eller det kan oppstå dråper på utsiden av spissen, så det er viktig å senke spissen ned ipipettespisstil riktig dybde.
Den anbefalte dybden varierer avhengig av pipettestørrelse, type og merke. Selv om produsentens anbefalinger bør følges, er her en generell veiledning fra National Physical Laboratory.
Veiledning for dypdykking av spissen
Pipettvolum (µl) og nedsenkingsdybde (mm)
- 1–100: 2–3
- 100–1000: 2–4
- 1000–5000: 2–5
ForvåtingPipettspisser
Ved pipettering av volumer større enn 10 µlpipettespisserblir vanligvis forhåndsfuktet ved å fylle dem flere ganger med væsken som dispenseres og kaste den ut i avløpet for å forbedre nøyaktigheten.
Hvis du ikke forfukter spissene, kan det oppstå luftbobler, spesielt ved bruk av viskøse eller hydrofobe væsker. For å unngå luftbobler, sørg for at du forfukter spissene når du pipetterer volum større enn 10 µl.
Bruk omvendt pipetteringsteknikker hvis det er aktuelt
Viskøse stoffer: Et vanlig problem ved pipettering av viskøse stoffer som protein- eller nukleinsyreløsninger, glyserol og Tween 20/40/60/80 er den hyppige dannelsen av bobler når fremoverpipetteringsteknikken brukes.
Langsom pipettering ved bruk av omvendt pipetteringsteknikk reduserer risikoen for bobledannelse ved overføring av viskøse løsninger.
ELISA-teknikk
Omvendt pipettering anbefales også ved pipettering av små volumer i96-brønns mikrotestplaterfor ELISA-teknikker. Når luftbobler trekkes inn i pipetten eller dispenseres i brønner når reagenser tilsettes, kan det påvirke verdiene for optisk tetthet og resultatene. Omvendt pipettering anbefales for å minimere eller eliminere dette problemet.
Bruk ergonomiske pipetter
Gammeldagse pipetter som ikke er designet med tanke på ergonomi krever mer fysisk anstrengelse, du blir sliten og pipetteringsteknikken din blir slurvete og dårlig. Feil nevnt ovenfor, som rask stempelutløsning, kan forekomme oftere.
Ved å investere i en mer ergonomisk løsning vil du kunne opprettholde utmerket teknikk og forhindre dannelse av luftbobler på grunn av dårlig teknikk.
Ta deg tid til å lære opp ansatte
Regelmessig opplæring og vurdering av personale i pipetteringsteknikker kan sikre at operatørfeil og luftbobledannelse reduseres.
Vurder flere automatiserte løsninger
Som nevnt ovenfor er de fleste luftbobler forårsaket av operatøren. Det kan være mulig å redusere operatørfeil og komfort ved å bruke elektroniske pipetter eller en fleksibel væskehåndteringsplattform somAgilent Bravo væskehåndteringsrobot.
Bruk god kvalitetPipettspisser
Mikropipetter kjøpes vanligvis inn med omhu, men ofte blir det lagt lite vekt på kvaliteten på engangspipettspissen. På grunn av den innflytelsen en spiss har på pipetteringsresultatene, krever standarden ISO 8655 en ekstra kalibrering hvis pipetter og spisser fra forskjellige produsenter brukes.
Dette kan være fordi mange billige tupper kan se fine ut i starten, men når du studerer dem nøye, kan de ha blink, utstikkere, riper og luftbobler, eller være bøyd eller inneholde urenheter.
Å kjøpe tupper av god kvalitet laget av høykvalitets polypropylen kan redusere forekomsten av luftbobler.
For å konkludere
Luftbobler i pipettespissen påvirker laboratoriets effektivitet, samt unøyaktighet og upresisjon i resultatene. Vi har nevnt flere ting du kan gjøre for å unngå at luftbobler kommer inn i pipettespissen.pipettespiss.
Men hvis kvaliteten er dårligpipettespisserforårsaker at luftbobler kommer inn i pipettespissen din, vil du bli glad for å vite at vår universelle passformpipettespisserer laget etter de høyeste standarder og er laget av ren polypropylen av førsteklasses kvalitet.
Suzhou Ace Biomedical-selskapetProduserer universelle pipettespisser av høy kvalitet med volum på 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 og 1250 µL, 96 spisser/stativ. Eksepsjonell holdbarhet – alle ACE-spissstativer tåler kravene ved bruk med flerkanalspipetter. Sterile, filterbaserte, RNase-/DNase-frie og ikke-pyrogeniske.
Velkommen til å spørre oss for mer informasjon.
Publisert: 29. desember 2022