Kā aizzīmogot PCR plāksni

Ievads

PCR plāksnes, kas daudzus gadus ir laboratorijas pamatelements, mūsdienu vidē kļūst arvien izplatītākas, jo laboratorijas palielina savu caurlaidspēju un arvien vairāk izmanto automatizāciju savās darbplūsmās. Šo mērķu sasniegšana, vienlaikus saglabājot eksperimentu precizitāti un integritāti, var būt sarežģīta. Viena no izplatītākajām jomām, kur var rasties kļūdas, ir blīvēšana.PCR plāksnes, ar sliktu tehniku, kas ļauj paraugiem iztvaikot, mainot pH līmeni un tādējādi traucējot fermentatīvās funkcijas, kā arī veicinot piesārņojumu. Mācīties, kā noslēgtPCR plāksnepareizi novērš šos riskus un nodrošina reproducējamus rezultātus.

Atrodiet pareizo blīvējumu savai PCR plāksnei

Plākšņu vāciņi pret plēves blīvējumiem pret vākiem
Cepuresir labs veids, kā cieši noslēgt šķīvi, vienlaikus nodrošinot iespēju to ļoti viegli atvērt un atkārtoti noslēgt, kad nepieciešams, bez jebkādiem atkritumiem. Tomēr vāciņiem ir pāris būtisku trūkumu.

Pirmkārt, jums būs jāiegādājas konkrēts, saderīgs vāciņš, kas padara tos nepiemērotus daudzpusībai. Jums jāpārliecinās, ka izvēlētais vāciņš atbilst plāksnei, kas ir atkarīgs no tās ražotāja, un jāizvēlas vai nu kupolveida, vai plakans vāciņš atkarībā no izmantotā termociklera.

Otrkārt, vāciņu uzlikšana uz plāksnes var būt ļoti atkārtota un nogurdinoša, un pastāv savstarpējas piesārņošanas risks, ja uz nepareizā vāciņa uzliksiet nepareizo iedobi.

Lai gan plēves blīves ir mazāk elastīgas noņemšanas un nomaiņas ziņā, tās ir ļoti daudzpusīgas, jo der jebkura veida PCR platei neatkarīgi no ražotāja. Tās var vienkārši sagriezt pēc izmēra, padarot tās ļoti efektīvas.

Vēl viena iespēja ir šķīvja vāks. Tie piedāvā mazāku aizsardzību nekā vāciņi un blīves, un tos galvenokārt izmanto tikai īslaicīgai aizsardzībai, lai novērstu piesārņojumu.

Optiskie un folijas plēves blīvējumi

Neatkarīgi no tā, vai jums ir nepieciešams optisks, caurspīdīgs blīvējums vaialumīnija folijas plēveJūsu plāksnes aizzīmogošanas iespējas nosaka jūsu eksperimentālais formāts.Optiskās blīvēšanas plēvesir caurspīdīgi, lai jūs varētu novērot paraugus, vienlaikus tos aizsargājot un novēršot iztvaikošanu. Tie ir arī īpaši noderīgi kvantitatīvās kvantitatīvās sekvences (QPCR) eksperimentos, kuros tiek veikti ļoti precīzi fluorescences mērījumi tieši no plāksnes, un tādā gadījumā jums būs nepieciešama blīvēšanas plēve, kas filtrē pēc iespējas mazāk fluorescences. Ir svarīgi pārliecināties, ka izmantotajam blīvējumam vai vāciņam ir pietiekami augsts optiskās dzidrības līmenis, lai nodrošinātu precīzus nolasījumus.

Folijas plēves ir piemērotas jebkuriem paraugiem, kas ir jutīgi pret gaismu vai jāuzglabā temperatūrā zem 80°C. Šī iemesla dēļ lielākajai daļai paraugu, kas paredzēti ilgstošai uzglabāšanai, būs nepieciešama folijas plēve. Folijas plēves ir arī caurduramas, kas ir noderīgi gan atsevišķu iedobju pārbaudei, gan paraugu pārnešanai ar adatām. To var veikt manuāli vai kā daļu no robotizētas platformas.

Tāpat ņemiet vērā, ka agresīvām vielām, tostarp skābēm, bāzēm vai šķīdinātājiem, būs nepieciešams blīvējums, kas tām izturēsies, un tādā gadījumā folijas blīvējums, visticamāk, būs piemērotāks.

Līmplēve pret siltumizolācijas plēvi
Līmplēves blīvējumiir ļoti vienkārši un viegli uzklājami. Lietotājam tikai jāuzliek blīvējums uz plāksnes un jāizmanto vienkāršs uzlikšanas rīks, lai to piespiestu un izveidotu ciešu blīvējumu.

Termoblīvumi ir modernāki, nodrošinot ilgstošāku blīvējumu ar samazinātu iztvaikošanas ātrumu salīdzinājumā ar parasto līmblīvumu. Šī opcija ir piemērota, ja vēlaties paraugus uzglabāt ilgtermiņā, lai gan tas rada papildu prasību pēc plākšņu blīvēšanas aprīkojuma.

Kā aizzīmogot PCR plāksni

Plākšņu blīvēšanas metode

Pašlīmējošs

1. Pārliecinieties, ka strādājat uz līdzenas un stabilas darba virsmas.

2. Izņemiet plēvi no iepakojuma un noņemiet aizmugurējo daļu.

3. Uzmanīgi uzlieciet blīvējumu uz plāksnes, vienlaikus pārliecinoties, ka visas iedobes ir pārklātas.

4. Izmantojiet aplikatora instrumentu, lai piespiestu plāksni. Sāciet no viena gala un virzieties uz otru, vienmērīgi piespiežot.

5. Atkārtojiet to vairākas reizes

6. Pārvietojiet aplikatoru ap ārējām iedobēm, lai pārliecinātos, ka arī tās ir pareizi noslēgtas.

Siltuma blīvējumi

Termoblīvi darbojas, ar plākšņu blīvējuma palīdzību piekausējot plēvi pie katras iedobes malas. Lai darbinātu termoblīvi, skatiet iekārtas ražotāja sniegtos norādījumus. Pārliecinieties, ka ražotājs, no kura iegādājaties iekārtu, ir cienījams, jo ir ļoti svarīgi, lai blīvējums būtu pareizs, efektīvs un ūdensnecaurlaidīgs.

Plākšņu blīvēšanas padomi

a. Piespiežot uz blīvējuma, dariet to gan horizontāli, gan vertikāli, lai nodrošinātu pareizu blīvējumu.

b. Vienmēr ir ieteicams veikt izmēģinājuma ciklu neatkarīgi no tā, ko darāt, un tas pats attiecas uz plākšņu blīvēšanu. Pirms plāksnes izmantošanas ar paraugiem pārbaudiet to ar tukšu.

c. Pārbaudes laikā noņemiet blīvējumu un pārbaudiet, vai līme ir pareizi pielipusi, bez spraugām. Pirmajā atsauces dokumentā ir vizuāls attēlojums tam. Ja plāksne nav pareizi noblīvēta, noņemot blīvējumu, būs spraugas vietās, kur līme nav pilnībā pielipusi pie plāksnes.

d. Paraugu transportēšanas un transportēšanas laikā papildu aizsardzībai (īpaši pret caurduršanu) var būt noderīgi uz folijas blīvējuma uzlikt plastmasas blīvējumu.

e. Uzklājot plēvi, vienmēr pārliecinieties, ka nav izciļņu vai grumbu — tie var izraisīt noplūdes un iztvaikošanu.