Įvadas
PGR plokštelės..., daugelį metų buvęs laboratorijos pagrindu, šiuolaikinėje aplinkoje tampa dar labiau paplitęs, nes laboratorijos didina savo našumą ir vis dažniau automatizuoja savo darbo eigą. Šių tikslų pasiekimas išsaugant eksperimentų tikslumą ir vientisumą gali būti sudėtingas. Viena iš dažniausiai pasitaikančių sričių, kurioje gali atsirasti klaidų, yra sandarinimas.PGR plokštelės, naudojant prastą techniką, dėl kurios mėginiai išgaruoja, pakinta pH ir dėl to sutrikdomos fermentinės funkcijos bei skatinamas užteršimas. Išmokti sandarintiPGR plokštelėteisingai pašalina šias rizikas ir užtikrina atkartojamus rezultatus.
Raskite tinkamą sandariklį savo PGR plokštelei
Plokščių dangteliai ir plėvelių sandarikliai, palyginti su dangteliais
Kepurėsyra geras būdas sandariai užsandarinti lėkštę, tuo pačiu suteikiant jums galimybę lengvai ją atidaryti ir vėl užsandarinti be jokių atliekų. Tačiau dangteliai turi keletą esminių trūkumų.
Pirma, turėsite įsigyti specialų suderinamą dangtelį, todėl jie nėra universalūs. Turėsite įsitikinti, kad pasirinktas dangtelis tinka plokštelei, tai priklauso nuo jos gamintojo, ir pasirinkti išgaubtą arba plokščią dangtelį, atsižvelgiant į naudojamą termociklerį.
Antra, dangtelių uždėjimas ant plokštelės gali būti labai pasikartojantis ir varginantis procesas, be to, jei uždėsite netinkamą dangtelį ant netinkamo šulinio, kyla kryžminės taršos rizika.
Nors plėvelių sandarikliai yra mažiau lankstūs nuėmimo ir keitimo atžvilgiu, jie yra labai universalūs, nes tinka bet kokio tipo PGR plokštelėms, nepriklausomai nuo gamintojo. Juos galima tiesiog supjaustyti pagal dydį, todėl jie yra labai veiksmingi.
Kitas variantas – lėkštinis dangtelis. Jie suteikia mažiau apsaugos nei kamšteliai ir sandarikliai ir dažniausiai naudojami tik trumpalaikiam uždengimui, siekiant išvengti užteršimo.
Optiniai ir folijos plėvelės sandarikliai
Nesvarbu, ar jums reikia optinio, skaidraus sandariklio, araliuminio folijos plėvelėPlokštelės užsandarinimo būdą lemia jūsų eksperimentinis formatas.Optinės sandarinimo plėvelėsyra skaidrūs, kad galėtumėte stebėti mėginius, tuo pačiu juos apsaugodami ir neleisdami išgaruoti. Jie taip pat ypač naudingi atliekant qPCR eksperimentus, kurių metu atliekami labai tikslūs fluorescencijos matavimai tiesiai iš plokštelės, todėl jums reikės sandarinimo plėvelės, kuri kuo mažiau filtruotų fluorescenciją. Svarbu įsitikinti, kad jūsų naudojamas sandariklis arba dangtelis yra pakankamai skaidrūs, kad rodmenys būtų tikslūs.
Folijos plėvelės tinka bet kokiems mėginiams, kurie yra jautrūs šviesai arba turi būti laikomi žemesnėje nei 80 °C temperatūroje. Dėl šios priežasties daugumai mėginių, skirtų ilgalaikiam saugojimui, reikės folijos plėvelės. Folijos plėvelės taip pat yra praduriamos, o tai naudinga tiriant atskirus šulinėlius arba mėginius perkeliant adatomis. Tai galima atlikti rankiniu būdu arba naudojant robotinę platformą.
Taip pat atkreipkite dėmesį, kad agresyvioms medžiagoms, tokioms kaip rūgštys, bazės ar tirpikliai, reikės joms atsparaus sandariklio, tokiu atveju folijos sandariklis greičiausiai bus tinkamesnis.
Lipni ir terminio sandarinimo plėvelė
Lipnios plėvelės sandarikliaiyra labai paprasti ir lengvai uždedami. Jums tereikia užklijuoti sandariklį ant plokštelės ir paprastu aplikatoriaus įrankiu paspausti, kad susidarytų sandarus sandariklis.
Šilumos sandarinimas yra pažangesnis, užtikrinantis ilgiau išliekantį sandarinimą, kurio garavimo greitis yra mažesnis, palyginti su įprastu lipniu sandarinimu. Ši parinktis tinka, jei norite mėginius laikyti ilgą laiką, nors tam reikia papildomos plokščių sandarinimo įrangos.
Kaip užsandarinti PGR plokštelę
Plokščių sandarinimo metodas
Lipnus
1. Įsitikinkite, kad dirbate ant lygaus ir stabilaus paviršiaus
2. Išimkite plėvelę iš pakuotės ir nuimkite apsauginę plėvelę.
3. Atsargiai uždėkite plėvelę ant plokštelės, įsitikindami, kad visos duobutės yra uždengtos.
4. Naudokite aplikatoriaus įrankį, kad prispaustumėte plokštelę. Pradėkite nuo vieno galo ir tolygiai spausdami pereikite prie kito.
5. Pakartokite tai daug kartų
6. Aplikatoriumi perbraukite aplink išorinius šulinėlius, kad įsitikintumėte, jog jie taip pat tinkamai užsandarinti.
Šilumos sandarikliai
Terminis sandarinimas veikia lydant plėvelę prie kiekvieno šulinio krašto, naudojant plokštelių sandarinimo įrenginį. Norėdami naudoti terminį sandarinimo įrenginį, žr. įrangos gamintojo pateiktas instrukcijas. Įsitikinkite, kad gamintojas, iš kurio perkate įrangą, yra patikimas, nes labai svarbu, kad sandarinimas būtų tinkamas, efektyvus ir nepralaidus vandeniui.
Svarbiausi plokščių sandarinimo patarimai
a. Spausdami sandariklį, spauskite horizontaliai ir vertikaliai, kad užtikrintumėte tinkamą sandarumą.
b. Visada pravartu atlikti bandomąjį bandymą su viskuo, ką darote, ir tai niekuo nesiskiria nuo plokščių sandarinimo. Prieš naudodami plokštelę su mėginiais, išbandykite ją su tuščia.
c. Bandydami nuimkite plėvelę ir patikrinkite, ar klijai tinkamai prilipo, ar nėra tarpų. Pirmajame informaciniame dokumente yra vaizdinis šio paveikslėlio vaizdas. Jei tinkamai neužsandarinote plokštelės, nuėmus plėvelę, atsiras tarpų, kur klijai nevisiškai prilipo prie plokštelės.
d. Siunčiant ir transportuojant mėginius, gali būti naudinga ant folijos sandariklio uždėti plastikinę plėvelę, kad būtų užtikrinta papildoma apsauga (ypač nuo pradurimo).
e. Visada įsitikinkite, kad klijuodami plėvelę, nėra jokių iškilimų ar raukšlių – dėl jų gali atsirasti pratekėjimų ir garavimas.
Įrašo laikas: 2022 m. lapkričio 23 d.