כיצד לאטום צלחת PCR

מָבוֹא

צלחות PCR, מרכיב עיקרי במעבדה מזה שנים רבות, הופכים נפוצים אף יותר בסביבה המודרנית ככל שמעבדות מגדילות את תפוקת העבודה שלהן ומשתמשות יותר ויותר באוטומציה בתהליכי העבודה שלהן. השגת יעדים אלה תוך שמירה על הדיוק והשלמות של הניסויים יכולה להיות קשה. אחד התחומים הנפוצים שבהם טעויות עלולות להיווצר הוא איטום שלצלחות PCR, עם טכניקה לקויה המאפשרת אידוי של דגימות, שינוי רמת החומציות (pH) ולכן שיבוש תפקודים אנזימטיים, ומזמין זיהום. לימוד כיצד לאטוםצלחת PCRמבטל בצורה נכונה את הסיכונים הללו ומבטיח תוצאות ניתנות לשחזור.

מצא את האטם המתאים לצלחת ה-PCR שלך

מכסי פלטות לעומת אטמי סרט לעומת מכסים
כובעיםהן דרך טובה לאטום את הצלחת שלכם בצורה הדוקה, ועדיין לתת לכם את הגמישות לפתוח ולאטום מחדש את הצלחת בקלות רבה לפי הצורך ללא בזבוז. עם זאת, לפקקים יש כמה חסרונות עיקריים.

ראשית, תצטרכו לקנות את המכסה הספציפי התואם, מה שהופך אותם ללא רב-תכליתיים. תצטרכו לוודא שהמכסה שתבחרו מתאים לפלטה, שתלויה ביצרן שלה, ולבחור כיפה או שטוחה בהתאם לתרמוסייקלר בו אתם משתמשים.

שנית, הנחת המכסה על הצלחת יכולה להיות תהליך חוזר על עצמו ומייגע מאוד, עם סיכון לזיהום צולב אם מניחים את המכסה הלא נכון על הבאר הלא נכונה.

בעוד שאטמי סרט פחות גמישים מבחינת הסרה והחלפה, הם רב-תכליתיים מאוד מכיוון שהם יתאימו לכל סוג של לוחית PCR, ללא קשר ליצרן. ניתן פשוט לחתוך אותם לגודל המתאים, מה שהופך אותם ליעילים מאוד.

אפשרות נוספת היא מכסה צלחת. אלה מציעים פחות הגנה מאשר מכסים ואטמים, ומשמשים בעיקר לכיסוי לטווח קצר כדי למנוע זיהום.

אטמי סרט אופטי לעומת אטמי סרט נייר כסף

בין אם אתם זקוקים לאיטום אופטי, שקוף אוסרט נייר אלומיניוםלאטום את הצלחת שלך נקבע על ידי הפורמט הניסיוני שלך.סרטי איטום אופטייםשקופים כדי לאפשר לכם לצפות בדגימות, תוך הגנה עליהן ומניעת אידוי. הם גם שימושיים במיוחד בניסויי qPCR הכוללים ביצוע מדידות מדויקות ביותר של פלואורסצנציה ישירות מהפלטה, ובמקרה כזה תזדקקו לסרט איטום שמסנן כמה שפחות פלואורסצנציה. חשוב לוודא שהאטם או המכסה שבהם אתם משתמשים הם בעלי רמת בהירות אופטית גבוהה מספיק כדי להבטיח שהקריאות מדויקות.

סרטי נייר כסף מתאימים לכל דגימה רגישה לאור או שיש לאחסן בטמפרטורה נמוכה מ-80 מעלות צלזיוס. מסיבה זו, רוב הדגימות המיועדות לאחסון לטווח ארוך ידרוש סרט נייר כסף. סרטי נייר הכסף ניתנים גם לניקוב, דבר שימושי לבדיקת בארות בודדות או להעברת דגימות באמצעות מחטים. זה יכול להתרחש באופן ידני או כחלק מפלטפורמה רובוטית.

כמו כן, קחו בחשבון שחומרים אגרסיביים הכוללים חומצות, בסיסים או ממסים ידרשו אטימה שיכולה לעמוד בהם, ובמקרה כזה אטימה בנייר כסף ככל הנראה מתאימה יותר.

סרט דבק לעומת סרט איטום בחום
אטמי סרט דביקהם מאוד פשוטים וקלים ליישום. כל מה שצריך זה שהמשתמש יפעיל את האיטום על הפלטה, וישתמש בכלי אפליקטור פשוט כדי ללחוץ כלפי מטה וליצור אטימה הדוקה.

איטומי חום הם מתקדמים יותר, ומספקים איטום עמיד יותר ובעל קצב אידוי מופחת בהשוואה לאיטום דבק קונבנציונלי. אפשרות זו מתאימה אם אתם מחפשים לאחסן דגימות לטווח ארוך, אם כי הדבר כרוך בדרישה נוספת לציוד איטום לוחות.

כיצד לאטום צלחת PCR

שיטת איטום צלחות

דביק

1. ודאו שאתם עובדים על משטח עבודה שטוח ויציב

2. הוציאו את הסרט מהאריזה שלו והסירו את הגיבוי

3. הניחו בזהירות את האטם על הצלחת, תוך כדי וודא שכל החורים מכוסות.

4. השתמשו בכלי אפליקטור כדי להפעיל לחץ על פני הפלטה. התחילו מקצה אחד והתקדמו עד לקצה השני, תוך לחיצה שווה.

5. חזרו על כך מספר פעמים

6. העבירו את האפליקטור מסביב לבורות החיצוניות, כדי לוודא שגם הן אטומות כראוי.

אטמי חום

איטום חום פועל על ידי המסת הסרט לשפת כל באר, בעזרת אוטם פלטות. כדי להפעיל אוטם חום, עיינו בהוראות המסופקות על ידי יצרן הציוד. ודאו שהיצרן שממנו אתם רוכשים את הציוד הוא בעל מוניטין, שכן חשוב מאוד שהאיטום יהיה תקין, יעיל ואטום למים.

טיפים מובילים לאיטום צלחות

א. בעת הפעלת לחץ על האטם, יש ללחוץ הן בכיוון האופקי והן בכיוון האנכי כדי להבטיח אטימה תקינה.

ב. תמיד מומלץ לבצע ניסוי של כל מה שאתם עושים, וזה לא שונה עם איטום פלטות. בצעו בדיקה עם פלטה ריקה לפני השימוש בפלטה עם דוגמיות.

ג. בעת הבדיקה, הסירו את האטם ובדקו שהדבק נדבק כראוי, ללא רווחים. יש ייצוג חזותי של זה במסמך הייחוס הראשון. אם לא אטמתם את הפלטה כראוי, כשתסירו את האטם יהיו רווחים שבהם הדבק לא נדבק במלואו לפלטה.

ד. למשלוח והובלה של דגימות, ייתכן שיהיה מועיל להניח אטם פלסטיק על גבי אטם נייר הכסף להגנה נוספת (במיוחד מפני ניקוב).

ה. יש לוודא תמיד שאין בליטות או קמטים בעת מריחת היריעת הניילון - אלה יגרמו לדליפות ואידוי