Cara Menyegel Plat PCR

Perkenalan

Plat PCR, yang merupakan bagian pokok laboratorium selama bertahun-tahun, menjadi lebih umum dalam lingkungan modern karena laboratorium meningkatkan hasil produksi mereka dan semakin banyak menggunakan otomatisasi dalam alur kerja mereka. Mencapai tujuan ini sambil menjaga keakuratan dan integritas eksperimen bisa jadi sulit. Salah satu area umum tempat kesalahan dapat muncul adalah dengan penyegelanPlat PCR, dengan teknik yang buruk memungkinkan penguapan sampel, mengubah pH dan dengan demikian mengganggu fungsi enzimatik, dan mengundang kontaminasi. Mempelajari cara menyegelPlat PCRmenghilangkan risiko ini dengan benar dan memastikan hasil yang dapat direproduksi.

Temukan Segel yang Tepat untuk Pelat PCR Anda

Tutup Pelat vs. Segel Film vs. Tutup
Topiadalah cara yang baik untuk menyegel pelat dengan rapat, sekaligus memberi Anda fleksibilitas untuk membuka dan menutup kembali pelat dengan mudah sesuai kebutuhan tanpa ada pemborosan. Namun, tutup memiliki beberapa kelemahan utama.

Pertama, Anda harus membeli tutup khusus yang kompatibel, yang membuatnya tidak serbaguna. Anda harus memastikan bahwa tutup yang Anda pilih pas dengan pelat, yang bergantung pada produsennya, dan pilih yang berbentuk kubah atau datar berdasarkan thermocycler yang Anda gunakan.

Kedua, pemasangan tutup pada pelat bisa sangat berulang dan membosankan, dengan risiko kontaminasi silang jika Anda memasang tutup yang salah pada sumur yang salah.

Meskipun segel film kurang fleksibel dalam hal pelepasan dan penggantian, segel ini sangat serbaguna karena dapat digunakan pada semua jenis pelat PCR, tanpa memperhatikan siapa pembuatnya. Segel ini dapat dipotong sesuai ukuran, sehingga sangat efektif.

Pilihan lainnya adalah tutup pelat. Tutup ini menawarkan perlindungan yang lebih sedikit daripada tutup dan segel, dan umumnya hanya digunakan untuk penutup jangka pendek guna mencegah kontaminasi.

Segel Optik vs. Segel Foil

Apakah Anda memerlukan segel optik yang bening ataulapisan alumunium foilcara menyegel pelat ditentukan oleh format eksperimen Anda.Film penyegel optiktransparan agar Anda dapat mengamati sampel, sekaligus melindunginya dan mencegah penguapan. Mereka juga sangat berguna dalam eksperimen qPCR yang melibatkan pengukuran fluoresensi yang sangat presisi langsung dari pelat, dalam hal ini Anda akan memerlukan lapisan film penyegel yang menyaring fluoresensi sesedikit mungkin. Penting untuk memastikan bahwa segel atau tutup yang Anda gunakan memiliki tingkat kejernihan optik yang cukup tinggi untuk memastikan pembacaan akurat.

Film foil cocok untuk sampel yang sensitif terhadap cahaya atau harus disimpan pada suhu di bawah 80°C. Karena alasan ini, sebagian besar sampel yang ditujukan untuk penyimpanan jangka panjang akan memerlukan film foil. Film foil juga dapat ditusuk, yang berguna untuk memeriksa sumur individual, atau untuk pemindahan sampel dengan jarum. Ini dapat dilakukan secara manual atau sebagai bagian dari platform robotik.

Pertimbangkan juga bahwa zat agresif yang mencakup asam, basa, atau pelarut akan memerlukan segel yang dapat menahannya, dalam hal ini segel foil mungkin lebih tepat.

Perekat vs. Film Penyegel Panas
Segel film perekatsangat mudah dan praktis. Yang perlu dilakukan pengguna hanyalah menempelkan segel pada pelat, lalu menggunakan alat aplikator sederhana untuk menekan dan membentuk segel yang rapat.

Segel panas lebih canggih, menyediakan segel yang lebih tahan lama dengan tingkat penguapan yang lebih rendah dibandingkan dengan segel perekat konvensional. Pilihan ini sesuai jika Anda ingin menyimpan sampel dalam jangka panjang, meskipun hal ini memerlukan persyaratan tambahan untuk peralatan penyegel pelat.

Cara Menyegel Plat PCR

Metode Penyegelan Pelat

Perekat Diri

1. Pastikan Anda bekerja pada permukaan kerja yang datar dan stabil

2. Keluarkan film dari kemasannya, dan lepaskan lapisan belakangnya

3. Letakkan segel dengan hati-hati ke pelat, sambil memastikan semua sumur tertutup

4. Gunakan alat aplikator untuk memberikan tekanan pada pelat. Mulailah dari satu ujung dan lanjutkan ke ujung lainnya, sambil menekan secara merata.

5. Ulangi ini berkali-kali

6. Jalankan aplikator di sekeliling sumur luar, untuk memastikan sumur tersebut tertutup dengan baik.

Segel Panas

Penyegel panas bekerja dengan melelehkan lapisan film ke tepi setiap sumur, dengan bantuan penyegel pelat. Untuk mengoperasikan penyegel panas, lihat petunjuk yang diberikan oleh produsen peralatan. Pastikan produsen tempat Anda membeli peralatan memiliki reputasi baik, karena sangat penting bahwa penyegelan tersebut tepat, efektif, dan kedap air.

Kiat-kiat Utama Penyegelan Pelat

a. Saat memberikan tekanan pada segel, lakukan pada arah horizontal dan vertikal untuk memastikan segel terpasang dengan benar

b. Selalu merupakan praktik yang baik untuk melakukan uji coba terhadap apa pun yang Anda lakukan, dan ini tidak berbeda dengan penyegelan pelat. Uji dengan pelat kosong sebelum menggunakan pelat yang berisi sampel.

c. Saat pengujian, lepas segel dan lihat apakah perekat menempel dengan benar, tanpa celah. Ada representasi visual tentang hal ini dalam dokumen referensi pertama. Jika Anda belum menyegel pelat dengan benar, saat Anda melepas segel akan ada celah di mana perekat belum sepenuhnya menempel pada pelat.

d. Untuk pengiriman dan pengangkutan sampel, sebaiknya gunakan segel plastik di atas segel foil untuk perlindungan ekstra (terutama dari penusukan).

e. Selalu pastikan tidak ada benjolan atau kerutan saat mengaplikasikan film – ini akan menyebabkan kebocoran dan penguapan